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Identificação de eventos de recombinação homóloga em células-tronco embrionárias de camundongo usando Southern Blotting e reação em cadeia da polimerase
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Identification of Homologous Recombination Events in Mouse Embryonic Stem Cells Using Southern Blotting and Polymerase Chain Reaction

Identificação de eventos de recombinação homóloga em células-tronco embrionárias de camundongo usando Southern Blotting e reação em cadeia da polimerase

DOI:
10.3791/58467-v

•

08:01 min

•

November 20, 2018

•

, , , , , , , , ,
1Lab of Animal Models and Functional Genomics (LAMFG), The Key Laboratory of Animal Vaccine & Protein Engineering, College of Veterinary Medicine,Hunan Agricultural University (HUNAU), 2Department of Pathology,Georgetown University Medical School, 3College of Food Science and Technology,Hunan Agricultural University (HUNAU), 4Lab of Molecular Cardiology (LMC),National Heart, Lung, and Blood Institute (NHLBI)/National Institutes of Health (NIH), 5Transgenic Core,National Heart, Lung, and Blood Institute (NHLBI)/National Institutes of Health (NIH)

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:02Southern Blotting Screening
  • 04:40Results: Identification of Homologous Recombination Events in Mouse Embryonic Stem Cells
  • 06:07Conclusion

Summary

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Aqui, apresentamos um protocolo detalhado para identificar os eventos de recombinação homóloga que ocorreram em células-tronco embrionárias do mouse usando a mancha do Sul e/ou PCR. Este método é exemplificado pela geração de nonmuscle myosin II substituição genética rato modelos usando embrionária baseada em células-tronco homóloga mediada por recombinação segmentação tecnologia tradicional.

Tags

Homologous RecombinationMouse Embryonic Stem CellsSouthern BlottingPolymerase Chain ReactionBiologie moléculaireCellular BiologyGenetically Modified CellsGDNA DigestionAgarose Gel ElectrophoresisDNA TransferDNA LabelingDNA Hybridization

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