Dépistage des génotypes de coton pour la résistance au nématode reniforme

Résumé

Ici, un protocole est présenté pour le criblage non destructif soudifieux rapide des génotypes de coton pour la résistance aux nématodes reniformes. Le protocole consiste à examiner visuellement les racines des semis de coton infectés par les nématodes afin de déterminer la réponse à l'infection. La pousse végétative de chaque plante est ensuite propagée pour récupérer les plantes pour la production de semences.

Résumé

Un protocole de dépistage rapide du nématode reniforme non destructif (Rotylenchulus reniformis) est nécessaire pour le développement de variétés de coton résistant(Gossypium hirsutum)afin d'améliorer la gestion du nématode. La plupart des protocoles consistent à extraire des nématodes vermiformes ou des œufs du système racinaire du coton ou à mettre en pot le sol pour déterminer la densité de population ou le taux de reproduction. Ces approches prennent généralement beaucoup de temps et un petit nombre de génotypes sont évalués. Une approche alternative est décrite ici dans laquelle le système racinaire est visuellement examiné pour l'infection de nématode. Le protocole consiste à inoculer les semis de coton 7 jours après la plantation avec des nématodes vermiformes et à déterminer le nombre de femelles attachées au système racinaire 28 jours après l'inoculation. Les données sont exprimées comme le nombre de femelles par gramme de poids frais des racines pour s'ajuster à la variation de la croissance des racines. Le protocole fournit une excellente méthode pour évaluer la résistance hôte-plante associée à la capacité du nématode d'établir un site d'infection; cependant, la résistance qui entrave la reproduction des nématodes n'est pas évaluée. Comme avec d'autres protocoles de criblage, la variation est généralement observée dans l'infection de nématode parmi les génotypes individuels à l'intérieur et entre les expériences. Les données sont présentées pour illustrer l'éventail des variations observées à l'aide du protocole. Pour s'adapter à cette variation, des génotypes témoins sont inclus dans les expériences. Néanmoins, le protocole fournit une méthode simple et rapide pour évaluer la résistance hôte-plante. Le protocole a été utilisé avec succès pour identifier les adhésions résistantes du G. arboreum germplasm collection et évaluer les populations de ségrégation de plus de 300 individus pour déterminer la génétique de la résistance. Une méthode de propagation végétative pour la récupération des plantes pour la reproduction de résistance a également été développée. Après l'enlèvement du système racinaire pour l'évaluation des nématodes, la pousse végétative est replantée pour permettre le développement d'un nouveau système racinaire. Plus de 95 % des pousses développent généralement un nouveau système racinaire dont les plantes atteignent leur maturité.

Introduction

Rotylenchulus reniformis (Linford et Oliveira), communément appelé nématode reniforme, est l'une des principales espèces de nématodes parasites présentes dans les sols du sud-est des États-Unis^1,2,3. Le nématode est un semi-endoparasite obligatoire et sédentaire nécessitant une plante hôte pour terminer son cycle de vie^2,4. Les nématodes femelles préadultes vermiformes pénètrent dans le système racinaire hôte pour établir un site d'alimentation dans la stèle^2,

Protocole

1. Maintenir une source de R. reniformis (en) Inoculum

1. Remplir les pots d'argile en terre cuite (15 cm de diamètre, 13,5 cm de hauteur) avec un mélange pasteurisé à la vapeur de limon sablonneux en 1 partie et de sable en 2 parties. Plantez une variété de tomate sensible (socopersicon) dans chaque pot et placez les pots dans une serre.
   REMARQUE : D'autres variétés végétales sensibles comme le coton peuvent être utilisées à la place de la tomate.
2. Inoculer les plants de tomates avec des nématodes reniformes vermiformes (voir l'étape 3.3). Maintenir les plantes dans la serre à une température d'environ 28 oC.

Résultats

Rotylenchulus reniformis infection du système racinaire pour deux variétés est présenté dans la figure 1. Relativement moins de nématodes reniformes femelles sont en mesure d'établir un site d'alimentation pour le génotype de coton résistant par rapport au génotype sensible. La variation de la croissance des racines est courante entre les adhésions, comme l'illustre la figure 2. Cette variation mesurée par le poids des r.......

Discussion

Un protocole de dépistage efficace est nécessaire pour 1) l'identification de R. génotypes de coton résistants aux reniformis afin d'évaluer la génétique de la résistance et 2) l'élevage de variétés résistantes. La plupart des protocoles évaluent R. densités de population de reniformis ou taux de reproduction en extrayant des nématodes vermiformes ou des œufs du système racinaire de coton ou du sol de mise^enpot 8^,11,.......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
Ray Leach Cone-tainer	Stuewe and Sons Inc.	SC10U
Plateau cone-tainer	Stuewe and Sons Inc.	RL98
Poncer	diverses
boules de coton	divers
pouces étiquettes de plantes (4 po L x 5/8 po l)	Pylon Platics	L-4-W	Toute marque ou fournisseur est acceptable.
Contenants d’échantillons de 4 oz	Fisher Scientific	16-320-731	Toute marque ou fournisseur est acceptable.
Colorant alimentaire rouge	McCormick & Co., Inc.
1 mL Pointes de pipette	divers Récipient de
10 L	divers		seaux peu coûteux fonctionnent bien.
Pots de 6 L	Nursery Supplies Inc.	Poly-Tainer-Can No2A	Toute marque ou fournisseur est acceptable. Des pots de différentes tailles peuvent être utilisés
Milieu de rempotage	Sun Gro Horticulture	Metro-Mix 360	Toute marque ou fournisseur est acceptable.
Engrais	Everris NA Inc.	Osmocote Plus	Toute marque ou fournisseur est acceptable.
Récipient en plastique (73,6 cm L x 45,7 cm L x 15,2 cm P)	Rubbermaid	3O29  ;	Toute marque ou fournisseur est acceptable.

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