Denne protokol beskriver en ny adfærdstest — den menneskelige indflyvnings test i svinenes hjemme pen — til påvisning af funktionelle underskud i laboratorie grise efter subkonkussiv traumatisk hjerneskade.
Traumatiske hjerneskade (TBI) incidenser er steget i både civile og militære populationer, og mange forskere er ved at vedtage en svine model for TBI. I modsætning til gnaver modeller til TBI, er der få adfærdsmæssige tests, der er blevet standardiseret. Et større dyr kræver mere invasiv håndtering i testområder end gnavere, hvilket potentielt øger stress og variation i dyrenes respons. Her beskrives den menneskelige approach test (HAT), som blev udviklet til at blive udført foran laboratorie grise ‘ hjemme pen. Det er ikke invasivt, men fleksibelt nok, at det giver mulighed for forskelle i bolig opsætninger.
Under HATTEN blev tre adfærdsmæssige ethograms udviklet, og derefter blev der anvendt en formel til at oprette et approach Index (AI). Resultaterne indikerer, at HATTEN og dens indeks, AI, er følsomme nok til at detektere milde og midlertidige ændringer i svine adfærd efter en mild TBI (mTBI). Selv om specifikke adfærdsresultater er bolig afhængige, reducerer brugen af en kunstig intelligens desuden variationen og giver mulighed for ensartede målinger på tværs af laboratorier. Denne test er pålidelig og gyldig; HAT kan bruges på tværs af mange laboratorier og for forskellige typer af svine modeller af skade, sygdom og angst. Denne test blev udviklet til en optimeret manuel tidsstempling metode, således at observatøren konsekvent bruger ikke mere end 9 min på hver prøve.
Human MTBI er ofte defineret af funktionelle underskud på trods af fravær af globale strukturelle ændringer eller signifikant ødem i hjernen1,2,3. Faktisk, i nogle MTBI patienter, det karakteristiske træk ved denne skade er en ændring i deres psykologiske tilstand i fravær af nogen neuroanatomiske ændringer4,5. Vi udnyttede en svine model af mTBI6 , fordi svins hjerner både er anatomisk og fysiologisk tættere på mennesker end gnavere7, og tilsvarende målinger kunne give et relevant sæt af fælles dataelementer med mennesker.
I de seneste år har svine modellen vundet interessen for Neuro traume forskere og mTBI interessenter for prækliniske undersøgelser; men i modsætning til gnaver modeller af TBI, er der kun et par standardiserede adfærdsmæssige tests offentliggjort, der giver mulighed for vurdering af laboratorie grisens affektive tilstand (dvs. psykologisk tilstand)7,8,9, 10. Et langsigtet mål for vores laboratorium er at udvikle flere, komplementære adfærdsmæssige værktøjssæt, der er følsomme nok til at måle, når svinene oplever subklinisk sygdom, eller når dyrene er i en præpatologisk stress-relateret tilstand.
Gentagne adfærdsmæssige tests, der måler ændringen af affektive tilstand i et laboratorium gris kan være gode kandidater til at skelne et dyr med en præpatologisk tilstand fra raske dyr. For eksempel, in-pen hatte blev brugt til kommerciel svineproduktion til at hjælpe landmænd vælge sunde grise med gode temperament eller ændre ledelse og boliger strategier, der forårsagede angst, skade, og sygdom11,12. Disse tests blev anvendt til at kvantificere motivationen og den overordnede affektive tilstand for et svin eller en gruppe af svin13.
Vores laboratorium og andre forskere målte motivation i grise ved at kvantificere tre kategorier af adfærd: 1) sonderende stater, der er udtrykt gennem nonnutritive oral adfærd (NNOB), hvor grisen bruger sin mund, snude, eller ansigt til at sniffe, slikke, tygge, og rod et substrat, eller de chomp uden et substrat14,15; 2) rumlige forhold af grisen til en genstand eller er16; 3) næse retning, som bruges i stedet for øjenkontakt, fordi grise har monulært17, men nærsynet vision, og de prioriterer deres lugtesans over vision18. Hvis en sund gris associerer mennesker med givende stimuli, de udtrykker en høj frekvens af nnob, dirigere deres næse mod det menneskelige, og søge at få tættere nærhed til det menneskelige11,16. Men efter sygdom, skade, eller en smertefuld oplevelse, motivation til at søge selv behagelige stimuli er reduceret, og dermed, disse målbare adfærd er sandsynligvis reduceret19. Svine adfærd forskere bemærkede, at anhedonia, manglen på motivation til at opleve behagelige stimuli, er genkendeligt og målbare i grise i deres hjem miljøer20. Således kan gentagne hatte (før og efter behandling) tjene som en følsom foranstaltning til at skelne laboratorie grise behandlet med subkoncussive mTBI fra Sham-behandlede (anæstesi-only) emner. Anhedonia er en affektiv tilstand, som TBI-patienter kan opleve21. Den HAT, der anvendes her, har potentialet til at hjælpe med at strømline oversættelsen af adfærdsmæssige fund fra en dyremodel til klinisk arbejde. Hatte kan administreres dagligt i løbet af et eksperiment, som også kan hjælpe med at standardisere laboratorie svins pleje for at optimere dyrevelfærd og husdyrhold22.
Her, ved hjælp af HATTEN, de adfærdsmæssige forskelle som følge af mTBI i mini-svin er probed. Minimering adfærdsmæssige variabilitet blev opnået ved at udnytte ikke-invasive foranstaltninger af hatten og tillade grisene til at akklimatisere til deres hjem penne, rutine håndtering, og en daglig nydelse. Traditionelt bruges en test Arena til at måle adfærd (f. eks. åben felttest). En in-pen test kan være nyttige i laboratorier, der har begrænset plads. Flytning og håndtering af grise i en test Arena kan forårsage en stress respons (angst eller eustress) og potentielt tilføje til variationen af svarene på testen. En in-pen test fjerner denne håndtering komponent, og derfor, sandsynligvis reducerer variation fra håndtering-stress17. Af ovennævnte grunde, vi har udviklet en daglig, in-pen HAT til denne mTBI model.
Standardiserede og kvantificerede foranstaltninger, der passende definere den affektive tilstand af dyret er vigtige aspekter i udviklingen af en ny adfærd test. Desuden bør tests gentages på tværs af flere laboratorier. Her, for at udvikle denne protokol, blev HATTEN testet i tre laboratoriers forskellige boliger systemer. Tre subethograms blev oprettet for at tidsstemple specifikke adfærd fra Sample videoer. Dernæst blev en vægtet formel skabt til at indarbejde de tre ethograms og give mulighed for brug af hatte på tværs af flere laboratorier. Selv om denne test er udviklet og anvendes specifikt til mini-svin behandlet med subconcussive mTBI, de metoder og protokol, der er udviklet her, vil have ansøgninger om at skelne forskellen mellem en subklinisk såret/syg eller nødlidende svin og en sundt svin.
Adfærd udfald kan påvirkes af enkelt vs gruppe boliger, frirum, den type gulv, der anvendes, typen af hegn, placeringen af fodring og vand, afføring område, og den miljømæssige berigelse placering. Der blev derfor undersøgt tre boligtyper (figur 1): Boligtype A var på Kansas State University (Manhattan, KS); Boligtype B og C var på Virginia Tech University (Arlington, VA). Den enkelte Institutionsudvalg for dyrepasning og-anvendelse (IACUC) på hvert sted godkendte brugen af faciliteter og procedurer.
Til udvikling af ethogram af boliger type A (figur 1a), Minnesota-Cross mini-svin (orner = 7, forgyldt = 1; National svine forskning Resource Center, Columbia, MO; alder = 25,6 ± 3,66 [middel ± standardafvigelse (SD)] uger) blev anbragt indendørs i enkelt penne med dyrevenlige gulve (IACUC #3881). De svin, der anvendes til denne protokol var ved godt helbred ikke har behandlinger anvendes. Til udvikling af protokollen for boliger type B, Yucatan mini-svin (alder = 25,3 ± 2,80 uger [gennemsnit ± SD] var enkelt-husede (figur 1b) på Virginia Tech faciliteter (IACUC #15-060). Dyre behandlinger er beskrevet andetsteds29 og omfattede induktion af subconcussive MTBI ved hjælp af blast-bølge overtryk eller Sham kontrol (anæstesi kun). Til udvikling af protokollen af boliger type C, fem kvindelige Göttingen mini-svin (alder = 23,7 ± 1,18 uger [gennemsnit ± SD]) var par-huset på Virginia Tech i en stor pen (figur 1c; IACUC #15-060). De to første boligmiljøer er typiske laboratorie huse eller indeholder grise med enkelt huer. Boligtype C er et atypisk boligmiljø, der kan huse to eller flere grise og kan betragtes som mere af et beriget miljø end standard laboratorie boliger. Denne protokol kan bruges på tværs af boligtyper, hvis følgende metoder følges.
Milde skader på hjernen, der ikke resulterer i åbenlys anatomiske og strukturelle ændringer detekterbare med state-of-the-art Imaging kan være svært at identificere og behandle28. Men, patienter med mTBI er særligt sårbare over for yderligere fornærmelse, der kan forårsage betydelig skade på hjernen, og derfor er det vigtigt for denne population skal identificeres. Adfærdsmæssige tests udviklet i en mini-svine model af MTBI er især relevante for humane MTBI-patienter, fordi grise har en lignende fysiologi som mennesker og udtrykker lignende affektive tilstande, såsom anhedonia8,9,10 ,20. Her har vi udviklet en ikke-invasiv, in-pen adfærdsmæssige test (HATTEN), og har vist, at det er følsomt nok til at skelne mTBI grise fra Sham pigs. Desuden blev et vægtet indeks (AI) udviklet til adfærd observeret under HATTEN, der er allestedsnærværende på tværs af boliger og svine typer.
Ændringer og fejlfinding:
Metoderne til hatten blev fastlagt på grundlag af etologi Guidelines25 og flere trial-and-error strategier til forbedring af pålidelighed, repeterbarhed og validitet af testen6. Pålideligheds foranstaltninger hjalp med at identificere styrken og begrænsningerne ved testen. Pålidelighed definerer, i hvilket omfang målingen kan gentages og er konsistent og fri for tilfældige fejl28,29. Vi har tidligere rapporteret om den intra-og interobserver pålidelighed af HATTEN, og med de yderligere strukturelle ethograms, reliabilities er tilsvarende høj (Pearson’s R2 > 0,90) for varighed6. Frekvens-og latenstiforanstaltninger kræver uddannede observatører, hvorimod varigheds foranstaltningerne er mindre observatør afhængige og derfor mere pålidelige på tværs af laboratorier30.
Pålidelighed inden for et laboratorium og repeterbarhed på tværs af laboratorier er afhængig af metoder. I vores laboratorium, videosystemet registreres kontinuerligt, filerne blev oprindeligt gemt som 5-minutters filer, og nogle HAT sessioner fandt sted over to filer. Færre fejl blev foretaget, når det nøjagtige tidspunkt fra databladet blev brugt til at klippe og kombinere videoerne. Før udviklingen af ethogram, observatører fik lov til at pause, stoppe og spole videooptagelser til tidsstempel alle de adfærd i hele ethogram. Denne metode ikke kun forårsaget variation i tidsstempling hver prøve, spænder fra 3 min til 20 min, men mellem-og inden-observatør pålidelighed var også dårlig for de fleste adfærd. Derfor sætter vi afspilningshastigheden, og havde observatører tidsstempel hver kategori ad gangen. Derfor, når pålideligheden var lav i blot én kategori, observatører selvstændigt retimestem bare kategorien snarere end hele ethogram, efter at de har konsulteret definitionerne og optagelser sammen. De indstillede afspilnings-og kategori metoder tillod en konsistent forudsigelse af, hvor meget tid der var brug for til at tidsstemple hver prøve. For projekter, der strækker sig over mere end en måned, er rutinemæssig gennemgang af de kodede videoer og inden for observatørens pålidelighed vigtig at måle.
En anden faktor, der reducerer pålidelighed og repeterbarhed er video set-up. I første omgang blev der brugt et håndholdt kamera og et stativ, som blev flyttet fra pen til pen. Når denne metode blev brugt, svinene var nødvendige for at blive introduceret til stativ og kamera før HATTEN; ellers, svinene syntes at reagere på stativ og bevægelse mere end til testen-menneske. Desuden begrænsede ikke-overhead kameravinkler observatørens opfattelse under tidsstempling og dybden opfattelse af rummet øget inden-og mellem-observatør variation i den rumlige adfærd foranstaltninger; Derfor har vi udviklet protokollen med faste kameraer. Når denne metode anvendes, er der behov for ekstra omhu for at sikre, at kameraet er placeret korrekt før hver test, og der er behov for mere tid til opsætning mellem hvert svins session. Men vi lærte, at den kontinuerlige video overhead system er nødvendig for at starte sin oprindelige optagelse ved midnat mindst 24 h før den første HAT. Tidsstempel displayet for mange videosystemer er ikke korrekt og synkroniseret ned til rammen; Derfor er vi ikke længere afhængige af visnings tiderne. Midnat starter tilladt for den nøjagtige frame-optagelse og videoredigering, og tidsstempel displayet blev ikke brugt.
Desuden var akklikalering af svinene og opsætning af en rutine vigtig ved fejlfinding af denne test. I optagelser af grise, der ikke var godt tilvænet til deres miljøer, blev pacing observeret under HATTEN. Dette er en indikator for, at grisen kan være i en agiteret tilstand31 snarere end i en sonderende tilstand32. Akklikalationsperioder på tre eller flere uger kan nedsætte antallet af svin i et eksperiment. Men hvis pacing fortsætter i alle prøvetagnings perioderne, kan dette ethogram være nødvendigt at justeres til at omfatte gåture og stående stille.
Gyldighed er, i hvilket omfang en måling repræsenterer det tilsigtede omfang af det spørgsmål, der stilles25. Da vi først udviklede HATTEN, brugte vi kun et rumligt etogram. Definitioner af rumlig ethogram adfærd beskrive præcist og specifikt nærhed til de menneskelige, og de fortæller observatøren direkte, hvor meget plads grisen blade mellem sig selv og et menneske. Men når disse metoder er nødvendige for at blive anvendt til et nyt laboratorium set-up, vi erkendte, at Spatial ethograms er laboratorie specifikke. Pennedimensioner og placeringen af andre genstande påvirker resultatet af det rumlige etogram; Derfor skal et diagram med målinger og detaljerne i pennen offentliggøres, hvis pennens opsætning ikke tidligere er blevet rapporteret. Ud over at rapportere om pennen miljø, den strukturelle adfærd blev tilføjet til ethogram. I modsætning til rumlig opførsel, kan strukturel adfærd lettere evalueres på tværs af laboratorier; disse adfærdsmønstre har gyldighed, fordi de specifikt beskriver svinets niveau af aktiv tilstand. Når en gris hviler, er det sandsynligvis ikke motiveret til at nærme sig og er ude af stand til at ændre holdninger til at nærme sig så hurtigt som en stående gris. Tilsvarende er en gris, der viser NNOB, i en sonderende tilstand, men et svin med hovedet stadig, mens de står, er mere sandsynligt i en catatonisk tilstand. Næse orienteringen hjælper med gyldighed, fordi næsen, ørerne og derefter øjnene er, hvad grisen bruger til at indsamle oplysninger om det menneskelige.
Begrænsninger af teknikken:
En potentiel bekymring med denne teknik er variabiliteten i svins respons på test-mennesker. Desuden vil grise se på testen-menneskets hænder, som kan forårsage utilsigtet talenter af denne person. Derfor blev disse begrænsninger udtrykt gennem eksperimentelt afprøvning af 1) svinenes reaktioner på et velkendt menneske og ukendte mennesker, og 2) standardisering af, at, efter at pellet er faldet, test-menneske står stille og placerer deres hænder ud af svine synet. Data viste, at der ikke var nogen behandling eller behandling x tidsforskelle under HATTEN (tabel 2), hvilket tyder på, at hatten kan administreres af enten velkendte eller ukendte mennesker. Andre forskere tyder på, at grise har tendens til at generalisere om mennesker baseret på tidligere interaktioner11,12,13; Derfor skal et svins tidligere erfaringer med mennesker være positive. Denne udfordring kan også afhjælpes med et årvågne eksperimentelt design; for hver blok er der behov for et tilstrækkeligt antal forsøgsenheder, som er repræsenteret for hver behandling af interesse.
I denne undersøgelse, selv om der kun var to erfarne observatører tidsstempling alle de videoer for alle tre boliger typer, der var forskelle mellem boliger typer for specifikke adfærd udfald (tabel 1). F. eks. gik grise i Boligtype B ind i det nærmeste område oftere end i Boligtyperne A og C. Dette skyldes sandsynligvis en forskel i pennematerialet; i boliger type B, var forsiden af pennen en kæde-forbundet port med vandrette stænger, der tillod grisen at klatre porten under HATTEN. Boliger type A og C, på den anden side, havde lodrette stænger og færre vandrette overflader til grisene til at klatre på. Denne variabilitet kan afhjælpes ved at tilføje varigheden i de nære og nærmeste områder, før man sammenligner dem på tværs af boligtyper (tabel 1; P > 0,10). Svin i Boligtype C brugte imidlertid mere tid i det fjerne område end i Boligtyperne A og B (tabel 1; P < 0,05), hvilket sandsynligvis skyldtes placeringen af vandere i bagsiden af pennen i stedet for på forsiden af pennen. Dette er en begrænsning, der kan afhjælpes, hvis laboratorierne vælger at standardisere placeringen af vandscootere, skåle og legetøj og sørg for, at de er faste, så grisen ikke flytter objektet ind i et andet område.
Denne test har stor tilgængelighed for laboratorier af alle typer, men som tidligere nævnt, vil den manuelt stemplede rumlige ethogram og målinger variere mere på tværs af laboratorier. Ikke desto mindre, kroppen-og hoved-strukturelle ethograms er allestedsnærværende. Laboratorier, der har adgang til valideret, automatiseret sporing for svin kan drage fordel ved at have den rumlige ethogram spores automatisk i stedet for manuelt, fordi afstanden flyttes og satsen for bevægelse kan være yderligere resultater af adfærd foranstaltninger fra HATTEN. Begrænsningerne fra in-pen-opsætning og traditionelle teknologier i stedet for testområder og automatiske sporingsteknologier kan afhjælpes ved at tilpasse AI-formlen. AI giver standardiserede målinger og terminologi for, hvordan de enkelte grise bruger deres penneplads og udtrykker interesse for et menneske. Denne beregning, der er afledt af fælles adfærd foranstaltninger, er følsom over for Porcin modeller af subkoncussive mTBI og, eventuelt, andre stater af subklinisk skade eller sygdom. Desuden reducerer AI tilfældige variationer under eksperimenter og kan lettere sammenlignes på tværs af eksperimenter og laboratorier end metoder, der er afhængige af mere eksperiment specifikke målinger. Den strukturelle adfærd forudsat fundamentet for denne formel, fordi disse adfærdsmønstre er standard målinger på tværs af behandlinger, mens den rumlige adfærd er afhængige af pennen set-up, antallet af grise i en pen, og tracking system. For eksempel bemærkede vi, at når to raske grise testes i en pen, vil de udføre lignende rumlig adfærd ved at nærme sig hinanden, men den gris, der følger den første kan orientere sin næse mere mod sin pen Mate end mod det menneskelige og udtrykke mere NNOB , fordi grisen, der fører, fungerer som Sentinel. Ikke desto mindre, AI aids i at reducere denne variation selv fra parret adfærd.
Selv om AI er et glimrende værktøjsæt til standardisering af testen på tværs af laboratorier, forskere kan stadig ønsker at undersøge test-specifikke adfærd resultater inden for et laboratorium eller eksperiment, især hvis de har nok strøm (dvs., eksperimentelle enheder og gentagne tests) i et enkelt eksperiment. Derfor blev tabel 1, der indeholder alle udfald af adfærd, variansen, fordelingen og en beregnet test for antallet af dyr for hver specifik adfærd, medtaget her. For eksempel, hvis forskerne har pen miljøer, der tillader grise til konsekvent klatre under HATTEN og de kender deres behandling forårsager over en 75% forskel i klatring adfærd, så de kan retfærdiggøre dyre antal baseret på variansen målt. Hvis nye adfærd er føjet til ethogram, videnskabsfolk bliver nødt til at retfærdiggøre, hvilke adfærd er tegn på tilgang eller tilbagetrækning, før indarbejde dem i indekset. For eksempel, hvis de fleste af dyrene i et eksperiment tempo langs væggene i pennen (dvs., thigmotaxis)32, varigheden af denne adfærd kan indarbejdes i kroppen-strukturelle ethogram kategori. Den opførsel kunne være repræsenteret i den nærmere stablet søjlegraf (i.e., figur 5) eller tabelskema, og så er der ikke mere, sig kan sammenfattes oppe hos opstille-skønt i nærværelse af anvender den indeksberegning. AI kan derfor repræsentere adfærd, der er allestedsnærværende på tværs af laboratorier, men yderligere unikke adfærd kan stadig repræsenteres separat.
Betydning i forhold til eksisterende metoder:
De eksisterende metoder til HATTEN blev fastlagt for svin på kommercielle bedrifter for at vurdere dyrenes velfærd. Her er der oprettet en protokol for laboratorie grise, som kan hjælpe forskerne med at vurdere dyrenes velfærd og skelne mTBI-svin fra Sham-behandlede svin. En alternativ traditionel test kunne være at bruge en åben-felttest. Denne test blev tidligere anvendt til at vurdere svine emotionalitet og velfærd33. Åben-felt tests blev oprindeligt designet til afprøvning af de affektive tilstande af gnavere ved at måle deres naturlige aversion for at åbne rum og lys. I modsætning hertil kan sunde grise se de samme stimuli som appetitvækkende10, og efter en sygdom, skade, eller STRESSBEHANDLING, de sandsynligvis udtrykke frygt. Denne test kræver mere laboratorie plads og vil kræve, at grise acclimerer til at blive håndteret og anbragt i en åben Arena. Hvis laboratorier har plads og protokoller til håndtering af svinene er på plads, kan gentagne HAT sessioner, ud over en åben-felttest, bidrage til yderligere at skelne behandlede dyr fra Sham-behandlede dyr.
Kritiske trin i protokollen:
De første tre trin i protokollen er de mest kritiske for vellykkede HAT foranstaltninger. Samlingerne pr. gris tager kun 3 min; Men, passende forberedelse vil bidrage til at gøre denne test pålidelig. Som nævnt ovenfor er kameraets placering og optagelses opsætning afgørende for klarhed og replikering. Forkerte kameravinkler kan begrænse observatørens vision, hvilket vil tilføje fejl til målingerne. En anden ofte overset trin er fastsættelse af objekter i pennen. Grisen vil flytte ikke-faste genstande, og dette kan påvirke dens motivation til at nærme sig mennesket. Set-up og styresystemet er vigtigt, fordi grise skal akklieres til deres miljøer, før de kan udføre testen konsekvent. Svin, der ikke er godt tilvænet til deres hjem penne eller rutine eller oplever stress vil defecate i andre områder snarere end på bagsiden af pennen34. Afføring området kan påvirke deres motivation til at nærme sig. Fra kameravisningen bør observatøren kunne identificere individuelle svin. Det er imidlertid vigtigt, at mærkningsordningen ikke indeholder oplysninger om dyrets behandling, da det vil fordomme observatøren25.
Identifikation af grise er meget vigtigt for at opnå de korrekte adfærdsmæssige data for den rigtige gris, selv når de er enkelt-husede. Grise er ofte flyttet til deres behandlinger, og en mærkning genforsikrer observatøren, at de ser det samme svin, efter at det er blevet fjernet og placeret tilbage i sin pen. Grise kan huses i par, som i boliger type C, og derfor bliver det meget vigtigt at identificere svinene. Husdyr mærkning maling og markører kræver daglig anvendelse; Derfor, denne protokol kræver brug af en medicinsk kvalitet tape og en smøre af tag cement. Båndet stikker bedst til grise med længere hår. Grise med kort hår og tør hud vil flytte båndet oftere end grise med længere hår.
Fremtidige ansøgninger:
Sammenfattende er den ikke-invasive in-pen HAT test, der er beskrevet her, følsom nok til at detektere milde og tidsmæssige afhængige ændringer i grise efter mTBI. Desuden har vi udviklet et vægtet indeks kaldet AI til at evaluere ændringer i grise, der er anbragt i forskellige pennetyper, samt i forskellige typer af svin. Selvom HATTEN er blevet brugt til at påvise ændringer i svin, der er udsat for mTBI, kan denne adfærdsmæssige test være nyttig til påvisning af målbare adfærdsændringer i dyr, der oplever stress eller præpatologiske tilstande.
The authors have nothing to disclose.
Forfatterne vil gerne anerkende midler fra kontoret for flådens forskning (Grant #12166253). Desuden, forfatterne venligt takke Animal Care personale, dyrlæger, og studerende på Kansas State University og Virginia Tech for deres støtte under dyret arbejde. Forfatterne vil også gerne takke Nadège Krebs for hendes tekniske assistance, og studerende Shelby Stair, Sarah Greenway, og Mikayla Goering for deres tekniske bistand og yderligere dyrepleje.
Dome 3.0 Megapixel Cameras with 2.8-12mm lens set between 2.8-3.2 mm | Points North Surveillance, Auburn, ME | CDL7233S | Lower mm lenses are needed for low-profile pens |
Manfrotto 244 friction arm kit | B&H Photo | B&H # MA244; MFR # 244 | To mount and secure cameras at a 90 degree angle |
Video Recording System | Points North Surveillance, Auburn, ME | NVR-RACK64 | NVR is customized |
Colored and patterned duct tape attached to a double-sided medical grade tape | MBK Tape Solutions, Chatsworth, CA | 3M 1522H | Sustainable marking of pigs |
Approach Index Formula generator | Dinasym, Manhattan, KS | Approach Formula | Company will customize macros for specific lab needs |
Geovision Software | Points North Surveillance, Auburn, ME | Geovision | Software to edit video time into 180 second clips |
Clicker | Petco | Good2Go Dog Training Clicker | |
Reward treat (feed pellet, carob chip, raisin, marshmallow) | Variable | N/A | Depending on previous exposure, adult pigs are very neophobic when new food is introduced. Limit-fed pigs can be fed a few pellets of feed. |
Statistical Analysis System (SAS) | SAS Institute, Cary, North Carolina | SAS 9.0 | Our laboratories preference for analyzing mixed models and repeated measures |
Observer 11.5 software | Noldus Information Technology, Leesburg, VA | Observer 11.5 | Software to manually timestamp video clips |