Method Article

Échographie de haute fréquence pour l’analyse du développement foetale et placentaire In Vivo

DOI:

10.3791/58616

November 8th, 2018

In This Article

Summary

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Nous décrivons ici la technique des ultrasons de haute fréquence pour l’analyse in vivo du foetus chez les souris. Cette méthode permet le suivi des fœtus et l’analyse des paramètres placentaires ainsi que le débit sanguin maternel et fœtal pendant toute la grossesse.

Abstract

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L’échographie est une méthode largement utilisée pour détecter des anomalies de l’orgue et des tumeurs dans les tissus humains et animaux. La méthode est non invasif, indolore et inoffensif, et l’application est facile, rapide et peut être faite n’importe où, même avec les appareils mobiles. Pendant la grossesse, l’échographie sert habituellement à suivre de près le développement du foetus. La technique est importante pour évaluer la restriction de croissance intra-utérine (RCIU), une complication de la grossesse à court et à long terme des conséquences santé pour la mère et le fœtus. Comprendre le processus de RCIU est indispensable pour élaborer des stratégies thérapeutiques efficaces.

Le système à ultrasons utilisé dans ce manuscrit est un appareil d’échographie produit pour l’analyse des petits animaux et peut être utilisé dans divers domaines de recherche, y compris la recherche de la grossesse. Nous décrivons ici l’utilisation du système pour l’analyse in vivo des fœtus de natural killer (NK) cellule/mastocytes (MC)-les mères déficientes qui donnent naissance à des petits restreint la croissance. Le protocole comprend la préparation du système, manipulation des souris avant et Pendant les mesures et l’utilisation du B-mode, couleur mode doppler et mode doppler-l’onde du pouls. Taille foetus, taille placentaire et approvisionnement en sang au foetus ont été analysés. Nous avons trouvé réduit l’implantation tailles et petits placentas souris NK/MC-déficientes du milieu de la gestation à partir. En outre, MC/NK-insuffisance a été associée à l’absence et inversé le flux diastolique bout dans foetus Arteria umbilicalis(UmA) et un index de résistance élevée. Les méthodes décrites dans le protocole facilement utilisable pour les thèmes de recherche liés et non liés.

Introduction

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Les ultrasons sont des ondes sonores avec des fréquences au-dessus de la gamme audible de l’oreille humaine, supérieure à 20 kHz,1. Animaux comme les chauves-souris, au pays de Galles, dauphins2,3,4de la souris, rats5et lémuriens souris6 tous utiliser d’ultrasons pour l’orientation et de la communication. Homme Profitez des ultrasons pour plusieurs applications techniques et médicales. Un appareil d’échographie est capable de créer l’onde sonore et distribuer et représenter le signal. Si l’échographie rencontre un o....

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Protocol

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Toutes les méthodes décrites ici ont été approuvés par le « Landesverwaltungsamt Sachsen Anhalt : 42502-2-1296UniMD. »

1. marche à suivre

  1. Compagnon de 6 à 8 semaines femelle MC-deficient C57BL/6J-Cpa3Cre /+ (Cpa3Cre /+) souris et MC-suffisamment C57BL/6J-Cpa3+/+ (contrôle de la colonie ; Cpa3+/+) avec des mâles BALB/c.
  2. Fixez le jour de la gestation (gd) 0 après confirmation de la fiche vaginale et traiter les femelles immédiatement après confirmation de la fiche.
    Remarque : Une fiche est le sperme du mâle dans....

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Results

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Les composants individuels du système ultrasons utilisé dans ce manuscrit sont indiquées à la Figure 1. La figure 2 illustre représentant images échographiques acquise en mode B à gd5, 8, 10 et 12 (B) et à la mesure de superficie correspondante implantation résultats (A), démontrant une superficie importante implantation réduite de traitées anti-CD122 Cpa3Cre / + souris de gd10 partir........

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Discussion

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En utilisant notre système d’échographie, nous avons démontré de gd10 restriction de croissance foetale chez les mères MC/NK-déficient sur. En outre, à gd10 et 12, nous avons observé des dimensions réduites placentaires et à gd14 l’absence ou l’inversion du flux diastolique de bout dans l’UmAs de certains fœtus de souris uMC/uNK-déficientes. Ce signe de la mauvaise vascularisation était associé à un index de résistance significative des artères indiquant RCIU. Les résultats confirment le rôle important des uMCs et admini.......

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Disclosures

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Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Acknowledgements

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Un grand Merci à la société de l’Instrument d’imagerie (surtout à Magdalena Steiner, Katrin Suppelt et Sandra Meyer) pour leur soutien agréable et rapide et pour répondre à toutes nos questions concernant le système d’imagerie et son usage rapidement et complètement. Nous sommes reconnaissants à Prof. Hans-Reimer Rodewald et Dr Thorsten Feyerabend (DKFZ Heidelberg, Allemagne) pour la fourniture de la colonie de Cpa3. En outre, nous remercions Stefanie Langwisch, qui dirigeait le service des colonies de souris et qui produit les images dans la Figure 1.

Le travail et le système d’imagerie ont été financés par des subventions de la Deutsche F....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb)BioLegend123204Klon TM-&beta ; 1; 500 et micro ; g
Système Vevo 2100  ; FujiFilm VisualSonics Inc.Sonde  ; MS550D-0421
Logiciel Vevo LAB  ; FujiFilm VisualSonics Inc.
IsofluraneBaxterPZN : 6497131
Gel d’électrodesParker12_8
Ruban chirurgical3M Transpore1527-1
Crème pour les yeuxBayerPZN : 1578675
Applicateurs à embout en cotonRaucotupf11969100 pièces
Crème dépilatoireReckitt Benckiser
2077626 compressesNobamed Paul Danz AG85611010 x 10 cm
Gel à ultrasonsGello GmbH246000

References

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  1. Abramowicz, J. S., Kremkau, F. W., Merz, E. Ultraschall in der Geburtshilfe: Kann der Fötus die Ultraschallwelle hören und die Hitze spüren? Ultraschall in der Medizin. 33 (3), Stuttgart, Germany. 215-217 (1980).
  2. Jones, G. Echolocation. Current Biology. 15 (13), R484-R488 (2005).
  3. Simmons, J. A.

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High Frequency UltrasoundFetal DevelopmentPlacental AnalysisIn Vivo ImagingB Mode ImagingColor DopplerPulse Wave DopplerResistance IndexUmbilical ArteryGestational Measurement

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