Summary

질병 억제의 빠른 예비 평가로 격판덮개 경쟁 분석 결과

Published: October 28, 2018
doi:

Summary

제시는 특정 퇴 비 포함 박테리아와 균 류 Rhizoctonia solani의 성장을 억제 하는 것 인지를 식별 하는 접시 경쟁 분석 결과 대 한 프로토콜.

Abstract

목표는 개발 하 고 최적화 solani Rhizoctoniasoilborne 균에 대 한 특정 퇴 비의 병 진압 능력을 감지 하는 간단 하 고, 저렴 하 고 효과적인 검정 이었다. R. solani 다양 한 식물 호스트 전세계의 병원 체 이다. 곰 팡이 saprophyte로 토양에서 살아 난다 그리고 간단한 물 한 천 매체에 급속 하 게 성장. 플레이트 분석 결과 R. solani의 성장을 느리게 하는 그들의 기능에 대 한 퇴 비를 비교 하는 빠른 방법입니다. 분석 결과 또한 강했다 초기 blights, Fusarium 윌 트, Phytophthora 뿌리 썩 음, 등 Pythium 루트 썩 어 토양에서 무기물으로 살아 나는 다른 soilborne 곰 팡이 병원 균의 억제와 잘 상관 한다.

Introduction

Rhizoctonia 나타냅니다는 Thanatephorus cucumeris (프랭크) Donk의 버섯의 광범위 한 복잡 한 (anamorph Rhizoctonia solani Kühn =) 루트 썩 음 및 감쇠 떨어져1을 일으키는 병원 체 이다. Rhizoctonia solani 적극적인 병원 체 이며 sclerotia 불리 한 환경 조건1로 살아남을 수 있는 saprophyte. 그 결과, 글로벌 유통 있으며 Solanaceae, 등 Fabaceae, 국화과, 심각한 경제적 손실을 인 십자화과 식물 호스트의 넓은 범위에 질병을 일으킬 수 있습니다.

퇴 비는 특정 식물 병원 체2biocontrol 대리인 항구 용량이. 그러나, 모든 퇴 비는 모두도 할 그들은 모든 병원 균을 영향을 마찬가지로3. 나무 기반 탄소는 건초 또는 밀 짚-탄소 근거한 퇴 비 보다는 셀 루 로스 비율에 더 높은 리그 닌. R. solani 밀 짚에서 쉽게 사용할 수 있는 탄소를 좋아한다. 반면, Trichoderma 종 등 생물 학적 제어 버섯 탄소 덜 쉽게 사용할 수 있을 때 더 효과적입니다. 유익한 균 류 및 박테리아 퇴 비로 경쟁, 적개심 또는 식물 성장3규제를 통해 식물 질병을 억제 수 있습니다. 제안 된 분석 결과 주로 항생제, ecoenzymes 또는 병원 체에 해로운 chelators의 생산에 의해 만들어진 적개심을 감지 합니다.

식물 생물 검정 composts 부탁 또는 식물 성장4억제 여부를 결정 하는 황금 표준입니다. 그러나, 식물 생물 검정 개월 소요 (주)는 보다 더 많은 노동 루트 시스템의 척도를 뿌리로 식물을 추출 하며 원하는 수 있는 완료. 대 등 하 게 강력 하 고, 그러나 빨리 (일) 분석 품질 관리 프로그램에 대 한 이상적인 것입니다. 이 문서의 목표는 퇴 비의 진압 가능성을 예측 하는 상대적으로 신속 하 고 정확한 테스트를 보여 줍니다. 메서드가는 Alfano 외. 후에 모방 되었다 두 개의 예외, 퇴 비 추출 물 5 희석 했다 그리고 물 천 감자 포도 당 한 천 (PDA) 대신 사용 되었다. R. solani PDA 승진 박테리아와 오염 문화6다른 곰 팡이의 성장을 하는 반면 간단한 물 한 미디어에 급속 하 게 성장.

이 플레이트 분석 결과 무기물 R. solani7, 강했다 초기 blights, Fusarium 윌 트, Phytophthora 뿌리 썩 음, Pythium 루트 부패 등으로 토양에서 생존 하는 식물 병원 균의 범위에 적용 되는 억제의 지표 역할을 합니다. 격판덮개 경쟁 분석 결과 토양 병원 균의 생물학 통제 대리인으로 봉사 하는 미생물의 포함을 위해 퇴 비 제품의 범위에 유용 합니다. 분석 결과 상업 퇴 비 제품6,8에서 질병 억제의 가장 일관 된 지표 중 하나 였다. 제품은 조리법, 성숙, 그리고 생산 과정에서 그들의 변이 대 한 선정 됐다.

Protocol

1. 사전에 준비 마스터 곰 팡이 문화 (시험 체) 미국 유형 문화 수집, 미생물학 컬렉션9, teleomorph Thanatephorus cucumeris (프랭크) (ATCC 10154) 또는 MYA 4031에서에서 주문. 또는: 저자에 의해 수행으로 지역 격리를 수집 합니다. 빨간 무 (Raphanus sativus)의 모 종 잘 작동 미끼 식물; R. solani에 의해 발생 하는 댐핑-오프 또는 루트 썩 어의 역사를가지고 알…

Representative Results

완성 된 퇴 비 안정 되 고 성숙, 두 용어는 종종 혼용 하는, 그래서 수 있습니다 안전 하 게 포장, 수송 그리고 하지 원인 불리 한 효과는 최종 사용4동안 해야 합니다. 안정성 분해 저항 이며 일반적으로 미생물 활동의 인덱스를 사용 하 여 결정 됩니다. 미생물 호흡의 일반 조치는 적극적인 병원 체 및 saprophyte R. solani7등의 ?…

Discussion

우리 알고 이전 연구에서 특정 퇴 비는 R. solani 억제에 효과적 진압 효과 퇴 비에 살고 있는 미생물 퇴 비6,8의 비 생물 적인 속성이 아닌 때문입니다. ‘ 죽 일 ‘ microbiota 수단으로 압력가 마로 소독의 사용 미디어10의 탄소 화학에 영향을 받아왔다. 우리는 압력가 마로 소독 Whatman No. 1 종이 통해 진공 여과를 사용 비교. 필터링도 압?…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

버몬트 농업 실험 역 경쟁 해치 프로그램 VT-HO1609 연구 자금. 린 팡 버몬트 대학6에서 그녀의 석사 학위 논문의 일환으로 방법을 사용.

Materials

autoclavable narrow-neck glass conical flask Fisher Scientific 10-040D 125-mL
dehydrated granulated agar Fisher Scientific DF0145-17-0 500 g quantity
heat resistant gloves Fisher Scientific MEMGG1314WL several brands available
Parafilm (strips of 2-3 cm wide) Fisher Scientific PM992 13-374-16 5 or 10 cm widths work
disposable polystyrene petri dishes Fisher Scientific R80116 comes in sleeves of 20/ea or cases of 500
dehydrated potato dextrose agar Fisher Scientific DF0013-15-8 comes in quantities of 100, 500 and 2000 grams
benchtop reciprocal shaker Thomas Scientific 1227Y31 other models will work
water bath ThermoScientific S37363 5L general purpose
clear ruler, flat, at least 10 cm Any use metric rule
ATCC culture American Type Culture Collection ATCC 10154 teleomorph Thanatephorus cucumeris (Frank) (ATCC 10154) or MYA 4031;
lab tape Fisher Scientific 15935 autoclavable and removable, 1" wide preferred
water resistant marker office or scientific supply Sharpie fine tip write sample number on tape

References

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Citer Cet Article
Neher, D. A., Weicht, T. R. A Plate Competition Assay As a Quick Preliminary Assessment of Disease Suppression. J. Vis. Exp. (140), e58767, doi:10.3791/58767 (2018).

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