Chirurgie du nerf facial dans le modèle de rat pour étudier l’inhibition et la régénération axonales

Résumé

Ce protocole décrit une approche reproductible à la chirurgie du nerf facial dans le modèle de rat, y compris des descriptions de divers modèles inductibles de blessure.

Résumé

Ce protocole décrit des méthodes cohérentes et reproductibles pour étudier la régénération et l’inhibition axonales dans un modèle de blessure de nerf facial de rat. Le nerf facial peut être manipulé sur toute sa longueur, de son segment intracrânienne à son cours extratemporal. Il existe trois types primaires de lésions nerveuses utilisées pour l’étude expérimentale des propriétés régénératrices : écrasement de nerf, transection et écart nerveux. La gamme d’interventions possibles est vaste, y compris la manipulation chirurgicale du nerf, l’administration de réactifs ou de cellules neuroactives, et soit des manipulations centrale ou d’organe final. Les avantages de ce modèle pour étudier la régénération nerveuse incluent la simplicité, la reproductibilité, la cohérence interspécifique, les taux de survie fiables du rat, et une taille anatomique accrue par rapport aux modèles murins. Ses limites impliquent une manipulation génétique plus limitée par rapport au modèle de souris et la capacité régénératrice superlative du rat, de sorte que le scientifique de nerf facial doit évaluer soigneusement les points de temps pour la récupération et s’il faut traduire des résultats à des animaux plus élevés et des études humaines. Le modèle de rat pour la blessure de nerf facial permet des paramètres fonctionnels, électrophysiologiques, et histomorphométriques pour l’interprétation et la comparaison de la régénération de nerf. Il bénéficie ainsi d’un potentiel énorme pour promouvoir la compréhension et le traitement des conséquences dévastatrices des lésions nerveuses faciales chez les patients humains.

Introduction

Les lésions nerveuses crâniennes dans la région de la tête et du cou peuvent être secondaires aux étiologies congénitales, infectieuses, idiopathiques, iiatrogéniques, traumatiques, neurologiques, oncologiques ou systémiques¹. Le nerf crânien VII, ou le nerf facial, est généralement affecté. L’incidence du dysfonctionnement du nerf facial peut être significative, car elle affecte 20 à 30 pour 100.000 personnes chaque année². Les principales branches motrices du nerf facial sont les branches temporelles, zygomatiques, buccales, maniibulaires marginales et cervicales; selon la branche impliquée, les conséquences peuvent in....

Protocole

Toutes les interventions ont été effectuées conformément aux directives des National Institutes of Health (NIH). Le protocole expérimental a été approuvé par le Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux (IACUC) de l’Université du Michigan avant sa mise en œuvre. Des rats Sprague-Dawley adultes de dix semaines ont été utilisés.

1. Avant le jour opératoire

1. Assurer un stock approprié d’instruments chirurgicaux stérilisés, de médicaments analgésiques, de médicaments anesthésiques et d’oxygène avant le jour de l’opération. Veuillez consulter la Table des Matériaux pour une liste complète.

Résultats

Après la procédure chirurgicale initiale, il existe deux principaux types de mesures de résultats: les mesures en série chez l’animal vivant et les mesures qui nécessitent le sacrifice de l’animal. Des exemples de mesures en série incluent des essais électrophysiologiques, tels qu’une mesure potentielle d’action musculaire composée³⁰, évaluations du mouvement du muscle facial par laser-assisté ou vidéographie signifie⁹, ou même l’imagerie vi.......

Discussion

Le modèle de lésion du nerf facial de rat a émergé comme le système le plus polyvalent pour l’évaluation des facteurs neurotrophiques en raison de son accessibilité chirurgicale, modèle de ramification, et la signification physiologique^{27,29,33,34,35,36}. La combinaison de la démonstration vidéo et de l’application de données .......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
1,8 % isoflurane	VetOne	13985-030-40
11-0 microsutures en nylon	AROSuture	TK-117038
4-0 suture monocryle	VWR	75982-084
Buprénorphine SR	ZooPharm	MIF 900-006
Carprofène	Sigma-Aldrich	MFCD00079028
Chlorhexidine	VWR
Pince bijoutier	VWR	21909-458
Écarteur Micro Weitlaner	VWR	82030-146
Micro-ciseaux	VWR	100492-348
Mini ciseaux de ténotomie	VWR	89023-522
Lame de scalpel numéro 15	VWR	102097-834
Microscope opératoire	Leica
Gel ophtalmique à la vaseline	Pharmaderm	B002LUWBEK
Eau stérile	VWR	89125-834
Adhésif tissulaire	Vetbond, 3M	NC9259532
Tampon conducteur d’eau	Aqua Relief System	ARS2000B
Bupivacaïne			Utilisation comme analgésique local

IC19135805