الإدارة داخل الشعب الهوائية مباشرة لتحسين ترسب عامل انتقائي داخل الرئة الماوس
Summary
إدارة الرغامى (IT) من العوامل التجريبية في الفئران غالبا ما يؤدي إلى تسليم غير متناظرة إلى الرئتين البعيدة. في هذا التقرير، نقوم بوصف نهج داخل الشعب الهوائية مباشرة (IB) لcannulate كل رئة في الفئران الحية غير الجراحية. ويمكن استخدام هذا النهج لإدارة انتقائية وكلاء إلى رئة واحدة أو يمكن تكييفها لتحسين تسليم عامل متناظرة لكلا الرئتين.
Abstract
إدارة الرغامى (IT) من العوامل التجريبية هي تقنية أساسية في نماذج المورين من أمراض الرئة المنتشرة، مثل التليف الرئوي الناجم عن البلميسين. ومع ذلك، فإن توزيع العوامل التي تدار داخل التراخالية على رئة الفأر البعيدة غالباً ما يكون غير متماثل، مع زيادة تركيزات الرئة في الرئة اليسرى الأصغر (ولكن يمكن الوصول إليها على قدم المساواة). الموصوفة في هذا التقرير هو نهج جديد داخل الشعب الهوائية (IB) لcannulate الرئتين اليسرى و / أو اليمنى من الفئران الحية غير الجراحية. ويتضح أيضا كيف يمكن استخدام هذا النهج لإدارة انتقائية وكلاء إلى رئة واحدة أو تكييفها (عنطريق تسليم IB تعديل الجرعة) لتحسين التماثل بين اليسار واليمين من تسليم الرئة من العوامل التجريبية، وبالتالي تحسين نماذج من انتشار أمراض الرئة مثل التليف الرئوي الناجم عن البلميسين.
Introduction
الإدارة الرئوية المباشرة للعوامل التجريبية في الفئران تسمح بدراسة الاستجابات المناعية للرئة، وإصابة الرئة الحادة، والتليف الرئوي. يتم تنفيذ الإدارة الرئوية المباشرة عادة عن طريق الغرس داخل الرغامى (IT)، كما هو موضح سابقا 1،2،3. ومع ذلك، فإن هذا النهج غير انتقائي، ويؤثر على كلا الرئتين بطريقة غير مستهدفة وغير متناظرة في كثير من الأحيان. قد تستفيد النمذجة التجريبية لإصابة الرئة من القدرة على استهداف رئة واحدة محددة بشكل انتقائي، مما يسمح باستخدام الرئة التعارضية كتحكم. وعلى العكس من ذلك، فإن النمذجة الدقيقة لأمراض الرئة المنتشرة البشرية تستفيد من التوزيع المتناظر للعوامل التجريبية إلى parenchyma الرئة الثنائية.
الهدف العام لهذا التقرير هو وصف طريقة للتسليم الانتقائي للعوامل التجريبية إلىالرئة اليسرى أو اليمنى للفأر (الشكل 1). هذا النهج الإداري داخل الشعب الهوائية (IB) يسمح لعلاج من جانب واحد من الرئة الماوس ويمكن تكييفها بسهولة لضمان التسليم على قدم المساواة من عامل إلى الشعب الهوائية الرئيسية الثنائية. باستخدام إدارة IB لتقديم جرعات أكبر من العوامل التجريبية إلى الرئة اليمنى الأكبر وكميات أصغر إلى الرئة اليسرى الأصغر (أي، إدارة IB المعدلة بالجرعة)، التي يتضح من هذا التقرير هو تحسن في تجانس الرئة تسليم العوامل التجريبية، وتحسين نموذج إصابة الرئة المنتشرة في الفئران. وعلى هذا النحو، قد يكون لهذا التقرير قيمة بالنسبة للمحققين الذين يسعون إما إلى إعطاء عوامل تجريبية من جانب واحد للفئران أو تحسين تماثل ترسب المخدرات في كلتا الرئتين.
Protocol
Representative Results
Discussion
وقد تم على غرار إصابة الرئة بشكل كلاسيكي في القوارض باستخدام إدارة تكنولوجيا المعلومات من العوامل الضارة مثل BLM6. ومع ذلك، فإن إدارة تكنولوجيا المعلومات هذه لا تؤدي إلا إلى إصابة غير مكتملة، مما يعكس الطبيعة غير المستهدفة لإيصال الرئة مع هذا النهج7. هذه القيود على…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
تم تمويل هذا العمل من خلال منحة NHLBI HL125371 إلى E.P.S. ومن قبل إدارة التنمية (CDMRP) منحة W81XWH-17-1-0051 إلى Y.Y.
Materials
| 22 G shielded IV Catheter | BD | 381423 | |
| Bleomycin | Enzo life sciences | BML-AP302-0010 | |
| Compact Mini rodent anesthesia machine | DRE Veterinary | 9280 | |
| Evans blue dye | Sigma-Aldrich | E2129 | |
| FITC-dextran | Sigma-Aldrich | FD150 | |
| Isoflurane | Piramal Critical Care | NDC | |
| LED-30W Fiber Optic Dual Gooseneck Lights Microscope Illuminator | AmScope | LED-30W | |
| Low temperature cautery with fine tip | Bovie | AA02 | |
| Precisionglide needle, 18G x 1" | BD | 305195 | Beveled tip, 12 mm in length |
| Xylazine | AKORN | NDC 59399-110-20 | |
| Zatamine | VetOne | NDC 13985-702-10 | Ketamine |
References
- MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. An improved simple method of mouse lung intubation. Journal of Applied Physiology. 106 (3), 984-987 (2009).
- Thomas, J. L., et al. Endotracheal intubation in mice via direct laryngoscopy using an otoscope. Journal of Visualized Experiments. (86), (2014).
- Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice. Journal of Visualized Experiments. (108), 53771 (2016).
- McGovern, T. K., Robichaud, A., Fereydoonzad, L., Schuessler, T. F., Martin, J. G. Evaluation of respiratory system mechanics in mice using the forced oscillation technique. Journal of Visualized Experiments. (75), e50172 (2013).
- Halbower, A. C., Mason, R. J., Abman, S. H., Tuder, R. M. Agarose infiltration improves morphology of cryostat sections of lung. Laboratory Investigation. 71 (1), 149-153 (1994).
- Thrall, R. S., McCormick, J. R., Jack, R. M., McReynolds, R. A., Ward, P. A. Bleomycin-induced pulmonary fibrosis in the rat: inhibition by indomethacin. American Journal of Pathology. 95 (1), 117-130 (1979).
- Matute-Bello, G., Frevert, C. W., Martin, T. R. Animal models of acute lung injury. American Journal of Physiology Lung Cellular and Molecular Physiology. 295 (3), L379-L399 (2008).
- Del Sorbo, L., et al. Intratracheal Administration of Small Interfering RNA Targeting Fas Reduces Lung Ischemia-Reperfusion Injury. Criticial Care Medicine. 44 (8), e604-e613 (2016).
- McLemore, T. L., et al. Novel intrapulmonary model for orthotopic propagation of human lung cancers in athymic nude mice. Recherche en cancérologie. 47 (19), 5132-5140 (1987).
- Vertrees, R. A., et al. Development of a human to murine orthotopic xenotransplanted lung cancer model. Journal of Investigative Surgery. 13 (6), 349-358 (2000).
