Neurotransmitter ændring er en mekanisme af neurale dysfunktion, der opstår efter hjernerystelse og bidrager til de undertiden katastrofale langsigtede konsekvenser. Denne rotte model kombinerer mikrodialyse, tillader in vivo neurotransmitter kvantificering, med en vægt-dråbe teknik udøve hurtig acceleration og deceleration af hovedet og torso, en vigtig faktor for menneskelige kraniocerebrale traumer.
Vedvarende kognitive og motoriske symptomer er kendte konsekvenser af hjernerystelse/mild traumatisk hjerneskade (mTBIs), som delvis kan tilskrives ændret neurotransmission. Faktisk har cerebral mikrodialyse undersøgelser hos gnavere demonstreret en overdreven ekstracellulær glutamat frigivelse i hippocampus inden for de første 10 minutter efter traumer. Mikrodialyse giver den klare fordel ved in vivo neurotransmitter kontinuerlig prøvetagning uden at skulle ofre dyret. Ud over ovennævnte teknik, en lukket hovedskade model, der udøver hurtig acceleration og deceleration af hovedet og torso er nødvendig, da en sådan faktor ikke er tilgængelig i mange andre dyremodeller. Wayne State vægt-drop model efterligner denne væsentlige bestanddel af menneskelige kraniocerebrale traumer, tillader induktion af en indvirkning på hovedet af en uhæmmet gnaver med en faldende vægt. Vores roman og translationel rat model kombinerer cerebral mikrodialyse med Wayne State vægt-drop model til at studere, i let bedøvet og uhæmmet voksne rotter, de akutte ændringer i ekstracellulære neurotransmitter niveauer efter hjernerystelse. I denne protokol blev mikrodialyse sonden indsat inde i hippocampus som region af interesse, og blev indsat i hjernen i Impact. Der er en høj tæthed af terminaler og receptorer i hippocampus, hvilket gør det til en relevant region til at dokumentere ændret neurotransmission efter hjernerystelse. Når de anvendes til voksne Sprague-Dawley rotter, vores kombinerede model induceret stigninger i hippocampus ekstracellulære glutamat koncentrationer inden for de første 10 min, i overensstemmelse med den tidligere rapporterede post-hjernerystelse symptomologi. Denne kombinerede vægt-drop model giver et pålideligt værktøj for forskerne at studere tidlige terapeutiske reaktioner på hjernerystelse ud over gentagne hjerneskade, da denne protokol inducerer en lukket-hovedet mildt traume.
Formålet med denne metode er at give forskerne et pålideligt værktøj, der trofast reproducerer biomekanik af humant kraniocerebralt traume samtidig tillade langsgående karakterisering af de molekylære virkninger af hjernerystelse/mild traumatisk hjerne skade (mTBIs). Denne metode kombinerer cerebral mikrodialyse med Wayne State vægt-drop model til at dokumentere, i let bedøvet og uhæmmet voksne rotter, de akutte ændringer i ekstracellulære neurotransmitter niveauer efter hjernerystelse. Med denne minimalt-invasive metode, neurotransmittere såsom glutamat, GABA, taurin, glycin og serin kan hurtigt og kontinuerligt kvantificeres efter traumer, in vivo, mens ikke at skulle ofre dyret.
Hjernerystelse/mTBI er en patofysiologisk forstyrrelse, der påvirker hjernens funktion forårsaget af en ekstern kraft mekanisme. Hjernerystelse/mTBI er den mest almindeligt form for traumatisk hjerneskade, der tegner sig for 70-90% af tilfældene1. De fleste af de akutte funktionelle forstyrrelser efter en hjernerystelse kan tilskrives en primær og en sekundær hjernen skade2,3: (1) den primære hjerneskade induceres af den hurtige acceleration og deceleration af hoved og torso som skader hjernevæv ved kompression efterfulgt af stretching og klipning af axoner under tilbageslag4,5,6 og (2) den sekundære hjerneskade er den indirekte cellulære respons på traumet. Det finder sted timer og dage efter den primære hjerneskade og spiller en vigtig rolle i motoren og kognitiv svækkelse observeret over tid. Mange af symptomerne kan tilskrives ændret neurotransmission såsom den tidligere påviste overdreven ekstracellulære glutamat frigivelse i de første 10 min efter skade7,8,9. På grund af sin høje tæthed af terminaler og receptorer, hippocampus er en hjernestruktur særligt sårbar over for denne excitotoxic respons efter skade. At være stærkt involveret i kognitiv funktion10,11, undersøgelser i gnavere rapporterede, at hippocampus skader forbundet med hjernerystelse kan føre til funktionsnedsættelser i frygt conditioning og indlæring rumlig hukommelse12 , 13. Hovedformålet med denne metode var at udarbejde en rotte model for hjernerystelse/MTBI, ved hjælp af Wayne State lukket hovedvægt-drop procedure til trofast reproducere mekanismerne i den primære hjerneskade, og indarbejde cerebral mikrodialyse at studere in vivo, den akutte ekstracellulære neurotransmitter ændringer på grund af den sekundære hjerneskade efter en hjernerystelse. Koncentrationer af ekstracellulær glutamat og GABA blev målt i hippocampus til at fungere som repræsentative resultater af vores metode.
Tidligere gnaver undersøgelser har kombineret mikrodialyse og andre modeller af skade, såsom åben-kraniet vægt fald og kontrolleret kortikale virkning, at påvise de akutte ændringer i ekstracellulære neurotransmitter niveauer efter en skade af varierende sværhedsgrad grader14,15,16,17. Men ud over de høje grader af variabilitet, den translationelle værdi af modeller som åben-kraniet vægt fald og kontrolleret kortikale virkning er hæmmet af en iboende mangel på økologisk gyldighed på grund af 2 faktorer: (1) disse modeller fremkalde skader meget mere alvorlige end sport-relaterede hjernerystelse led hos mennesker, der involverer direkte hjerne lastning og (2) disse modeller nødvendiggør en kranie-eller kraniotomi, idet lederen af gnaver er helt tilbageholdende i en stereotaxisk ramme, hvilket hæmmer den hurtige acceleration og deceleration af hoved og torso, således dårligt gengive biomekanik af hjernerystelse.
Mikrodialyse er en minimalt-invasiv metode, der giver den klare fordel ved prøvetagning af neurotransmittere såsom glutamat, GABA, taurin, glycin og serin, in vivo og kontinuerligt efter traumer, mens de ikke behøver at ofre dyret. Ud over de fordele, der tilbydes ved mikrodialyse, Wayne State University udviklet en lukket-kraniet vægt-dråbe model (i modsætning til åbne kraniet fra andre modeller), som tillader induktion af en mTBI på en let bedøvet og uhæmmet gnaver, således tillader hurtig acceleration og deceleration af hovedet og torso18. Som tidligere nævnt, acceleration og deceleration af hoved og torso er en kerne biomekaniske træk ved sport-relaterede hjernerystelse set hos mennesker, at tidligere gnaver mTBI modeller har undladt at behandle. Vægt-drop proceduren kan gøres meget hurtigt og kræver ikke nogen forudgående kirurgi eller hovedbund incision. Efter induktion af hjernerystelse, genvinder gnavere den stabiliserende refleks næsten spontant og oplever ikke lammelse, krampeanfald eller åndedrætsbesvær efter en enkelt påvirkning. Intrakranielle blødninger og kranie frakturer er sjældne, og der er kun indberettet mindre underskud i motorisk koordination hos gnavere. Denne rotte model er nem at bruge, billig og letter kvantificeringen af neurotransmittere frigivet i den akutte fase efter en hjernerystelse uden at fjerne mikrodialyse sonde under påvirkning.
Vores rotte model kombinerer mikrodialyse og hjernerystelse er passende for forskere, der søger at karakterisere længderetningen de molekylære virkninger af hjernerystelse og kan anvendes i en bred vifte af terapeutiske undersøgelser. Faktisk, på trods af flere års forskning og et overvældende behov, ingen lægemiddel til at forhindre de langsigtede virkninger af hjernerystelse har bestået den kliniske forsøg fase19. En af de mulige årsager til disse fejl kan være brugen af dyremodeller, der ikke trofast gengiver de traumatiske biomekaniske kræfter af hjernerystelse, som opleves af mennesker. Den metode, der præsenteres her, opfylder definitionen af menneskelige hjernerystelse, som specificerer, at den primære hjernen skade er induceret af en stump effekt samt hurtig acceleration og deceleration af hovedet og torso2,3.
Desuden er vores kombinerede model passende for forskere, der studerer virkningerne af gentagen mild traumatisk hjerneskade (rmTBI), da en af dens vigtigste egenskaber, der adskiller den fra andre dyremodeller for hjernerystelse, er, at den gør det muligt at inducere gentagne, milde skader til samme sag18. Hos mennesker, rmtbi er forbundet med mere alvorlige post-traumatiske symptomer, længere inddrivelse gange, og forværret motoriske og kognitive funktionsnedsættelser, der har tendens til at sprede sig over tid20,21. Andre relevante dyremodeller har også gjort det muligt bedre at forstå den posttraumatiske Patofysiologi af rmtbi22,23,24,25,26,27 . Øget hjerne sårbarhed er blevet påvist hos gnavere efter mindst 5 mTBI med 24 timers intervaller. Neuroinflammation stiger med antallet af mTBI erfarne og markører for neurodegeneration synes28. Gentagne mTBI ville forhindre overgangen af microglia fra en proinflammatorisk tilstand til en normal tilstand af opsving, resulterer i langvarig excitotoxic aktivitet og aktivering af neurodegenerative mekanismer 29. Med vores model, rotter kunne blive udsat for 1 virkning pr. dag i perioden på 1 uge for i alt 5 eksponeringer. I betragtning af enkelheden i denne dyremodel, det kunne lette karakteriseringen af de kumulative virkninger af akut vilkårlig neurotransmitter frigivelse opstår umiddelbart efter en mTBI.
Denne model giver også dyrene mulighed for let at blive udsat for 2 påvirkninger om dagen, hvilket gør det muligt at studere endnu mere alvorlige forhold, såsom når en atlet får en anden traumatisk virkning inden for kort tid fra det første slag30. Som påvist i en tidligere undersøgelse31, timingen af et andet slag til hovedet kan dramatisk påvirke vaskulære og axonal skade. Jo tættere det andet slag er på det første slag, jo mere skadelige konsekvenser. Denne model er egnet til at undersøge, hvordan denne særlige tilstand påvirker ekstracellulære neurotransmitter frigivelse.
I denne metode, hippocampus blev brugt som region af interesse på grund af sin relevans i hjernerystelse forskning, men mikrodialyse prøver kan indsamles fra andre regioner af interesse samt. Men, enhver anden hjerneregion skal tages i betragtning på grund af den plads efterladt af Impact site fra guide kanyle, herunder dental cement omkring det, kan tage en betydelig mængde plads på rotte hoved. Ud over dette, de mikrodialyse parametre præsenteret i denne metode, såsom membranens molekylvægt cut-off og aktiv længde, Prøvetagningstiden intervaller og strømningshastigheden kan justeres i henhold til den type molekyle undersøgt. Den effektive samling af pro-inflammatoriske cytokiner involveret i hjernerystelse, for eksempel, ville kræve en membran med en meget større porestørrelse.
Kritiske trin i protokollen
Til generering af pålidelige resultater, kritiske trin i denne protokol kræver særlig opmærksomhed. Under kanylen implantations kirurgi, undgå at bruge mere cement end nødvendigt, især når det er meget flydende for at forhindre spild overslag stedet. For at undgå blokering af implantationsstedet, brug en Obturator, der har samme længde som kanyle. Under mikrodialyse proceduren skal proben langsomt sættes ind i kanylen, og sørg for, at den er sat helt ind til udtagning af dialysat. Før hjernerystelse induktion, skal du sørge for, at aluminiums arket er korrekt slidtet med en skarp barberkniv. Ellers vil virkningen fra messing vægten ikke være tilstrækkelig til at rippe aluminiums arket og rotten forbliver brystet ned i stedet for undergår en 180 ° rotation og landing på ryggen. Hvis dette er tilfældet, skader induceret vil skyldes den stumme virkning, ikke i modsætning til hvad der ses i den åbne-kraniet vægt dråbe modeller og være betydeligt mere alvorlige. Under hjernerystelse induktion, undgå at påvirke kanylen med vægten, da dette ville generere kritisk skade på kraniet af rotten. Det anbefales stærkt at arbejde i teams af 2 for at begrænse manipulations fejl under eksperimentet.
Ændringer og fejlfinding
Under mikrodialyse proceduren skal strømmen være konstant og give et volumen, der passer til perfusions hastigheden, når sonden er forbundet med pumpen. Lavere volumener kan indikere tilstedeværelsen af tilstopning i membranen af sonden eller luftbobler i linjerne. I tilfælde af tilstopning skal sonden kasseres og udskiftes. Luftbobler kan dog skubbes ud ved cirkulerende ACSF i linjerne. Hvis der ikke er nogen tilstopning eller luftbobler noteret, og der stadig ikke er nogen strøm, kan en lille del af udstrømnings røret tættest på enden skæres.
Metodens begrænsninger
Andre undersøgelser ved hjælp af Wayne State University vægt-drop har evalueret nogle fundamentale strukturelle og molekylære ændringer18. En mere omfattende undersøgelse ville imidlertid bevare legitimiteten af denne procedure. Oplysninger om de biologiske og neuroanatomiske ændringer, der finder sted på epigenetiske og cellulære niveauer vil yderligere størkne den pålidelige og translationelle værdi af vores metode. Endvidere, evaluering af kognitiv funktion er en pålidelig måling af resultatet relateret til mTBI i gnaver modeller33. Mens den tid-til-højre blev målt i denne protokol og blev betydeligt forsinket i tilskadekomne tilfælde i forhold til Sham tilfælde, undersøgelser i fremtiden bør koncentrere sig om metodisk måling kognitive funktion efter traume induktion i gnavere.
Metodens betydning i forhold til eksisterende/alternative metoder.
Den vigtigste betydning af metoden er dobbelt: for det første, det giver mulighed for vellykket induktion af en hjernerystelse med Wayne State University procedure, som giver mulighed for hurtig acceleration og deceleration af hovedet og torso. Med denne metode blev alvorlige kvæstelser som kardiorespiratoriske arrestationer, kraniets fraktur, høj dødelighed og tegn på synlige cerebral kontusioner på slag stedet undgået. For det andet, denne mikrodialyse teknik med succes replikeret den tidligere demonstrerede den akutte og kortvarige ekstracellulære glutamat frigivelse finder sted inden for de første 10 min efter traume induktion14,16. Desuden reducerer det betydeligt sandsynligheden for at inducere skader på den mTBI-følsomme blod-hjerne barriere, der er forbundet med gentagen mikrodialyse sonde indsættelse34, ved at holde sonden indsat under hele proceduren.
Fremtidige anvendelser eller anvisninger af metoden.
I betragtning af de let anvendelige aspekter af Wayne State University vægt-drop proceduren og de akutte ekstracellulære neurotransmitter niveauændringer målt ved mikrodialyse, vores rotte model kombinerer mikrodialyse og hjernerystelse giver forskerne en pålidelig værktøj til trofast reproducerer biomekanik af humant kraniocerebrale traumer og længde-udinalt karakterisere de molekylære virkninger af hjernerystelse. Vores rotte model kunne også anvendes i en bred vifte af terapeutiske undersøgelser, da det giver en værdifuld mulighed for at studere mekanismen og effekten af farmakologisk agenter in vivo, kontinuerligt og uden at skulle ofre dyret. Desuden kan tilgængeligheden af en rotte model som den, der præsenteres her, i høj grad lette den bedre forståelse af forholdet mellem neurotransmitter ubalancer og de adfærdsmæssige konsekvenser af hjernerystelse.
The authors have nothing to disclose.
Vi er glade for Louis chiocchio for dyrepleje og vedligeholdelse, Morgane regniez for assistance med intrakardiel perfusion procedure, og David castonguay for assistance med cryostat. Dette arbejde blev støttet af Caroline Durand Foundation Chair i akut traumatologi af universite de Montreal tildelt LDB.
Animal Preparation | |||
Sprague Dawley Rats | Charles River Laboratories | SAS SD 40 | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Microdialysis Guide Cannula Implantation Surgery | |||
Ketamine Hydrochloride (100 mg/ml) | Bioniche | 1989529 | |
Xylazine Hydrochloride (100 mg/ml) | Bimeda | 8XYL004C | |
Solution of Chlorhexidine Gluconate 2% and Isopropyl Alcohol 2% | Carefusion | 260100C | |
Lidocaine Hydrochloride | Alveda Pharma | 0122AG01 | |
Bupivacaine Hydrochloride | Hospira | 1559 | |
Ophthalmic Ointment | Baussh and Lomb inc. | 2125706 | |
Stereotaxic Frame | Stoelting | 51600 | |
Stereotaxic Cannula Holder Arm | Harvard Apparatus | 72-4837 | |
Drill | Dremel | 8050-N/18 | |
Suture Thread Coated Vicryl Rapide 4-0 | Ethicon | VR2297 | |
Dental Acrylic Cement | Harvard Apparatus | 72-6906 | |
Screws | JI Morris Company | P0090CE125 | |
Isoflurane | Baxter | CA2L9100 | |
Cannula Gauge 20 10.55mm | HRS Scientific | C311G/SPC | |
Dummy-Cannula 10.55mm | HRS Scientific | C311DC/1/SPC | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Microdialysis Procedure | |||
CMA 402 Syringe Pump | Harvard Apparatus Canada | CMA-8003110 | |
Microsyringe 2.5ml Glass | Harvard Apparatus Canada | CMA-8309021 | |
Syringe Clip Medium For 1-2.5ml | Harvard Apparatus Canada | CMA-3408310 | |
Low-Torque Dual Channel Quartz-Lined Swivel | Instech Laboratories Inc. | 375/D/22QM | |
GSC Cast Iron Support Ring Stand | Fisher Scientifique | S13748 | |
Fisherbrand Castaloy Adjustable-Angle Clamps | Fisher Scientifique | 05769Q | |
NaHCO3 Sodium Bicarbonate | Sigma-Aldrich Canada | S5761-500G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
MgCl2 Magnesium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | M8266-100G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
NaCl Sodium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | S7653-1KG | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
L-Ascorbic Acid | Sigma-Aldrich Canada | A5960-25G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
KCl Potassium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | P9333-500G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
NaH2PO4 Sodium Phosphate Monobasic | Sigma-Aldrich Canada | S0751-1KG | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
CaCl2 Calcium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | 383147-100G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
Lighter | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Epoxy Glue | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Super Glue Gel | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Heat Shrink Tube 0.063" Inner Diameter Gardner Bender | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Cut-Off Wheels Dremel #409 | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
BD Needle 26 Gauge 0.5 Inch PrecisionGlide Sterile 305111 | Fisher Scientifique | 14-826-15 | For Laboratory Constructed Probes |
BD Needle 21 Gauge 1.5 Inch PrecisionGlide Sterile 305167 | Fisher Scientifique | 14-826-5B | For Laboratory Constructed Probes |
26G Stainless Steel Tubing One Foot | HRS Scientific | SST-26/FT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/20 .024" OD X .015" ID | HRS Scientific | C315CT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/10 .024" OD X .011" ID | HRS Scientific | C314CT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/50 .038" OD X .023" ID | HRS Scientific | C313CT | For Laboratory Constructed Probes |
30S WIRE ST.ST 0.008X 1’ Long | HRS Scientific | 008BSH/30S | For Laboratory Constructed Probes |
Polymicro Technologies Flexible Fused Silica Capillary Tubing Inner Diameter 50µm, Outer Diameter 150µm | Molex LLC Polymicro Technologies | 106815-0015 | For Laboratory Constructed Probes |
Spectra Por 132294 Micro-Dialysis Hollow Fiber Membranes 13 kD MWCO | Spectrum Labs | FSSP9778671 | For Laboratory Constructed Probes |
Stainless Steel Collar | Sirnay In.c | 304 | For Laboratory Constructed Probes / Custome made |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Concussion Apparatus | |||
Brass Weight | Rapido Métal Inc. | Attach metal loop to base | |
Metal Loop | Rona Inc. | Available at most hardware stores | |
PVC Guide Tube | Rona Inc. | Available at most hardware stores | |
Alluminum Foil | Alcan | Available at most grocery stores | |
Tape | Available commercially | ||
GSC Cast Iron Support Ring Stand | Fisher Scientifique | S13748 | |
U-Shaped Plexiglas Frame | Présentoirs PlexiPlus Inc. | Custom made | |
Foam Cushion | Mousse D&R Foam Inc. | Custom made | |
Razor Blades | VWR International | 55411-055 | |
Super Strong Trilene XT 20 lb. Berkley | Canadian Tire | Available at most hardware stores | |
Isoflurane | Baxter | CA2L9100 | |
Stop Watch | Available at most sporting goods retailer |
Animal Preparation | |||
Sprague Dawley Rats | Charles River Laboratories | SAS SD 40 | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Microdialysis Guide Cannula Implantation Surgery | |||
Ketamine Hydrochloride (100 mg/ml) | Bioniche | 1989529 | |
Xylazine Hydrochloride (100 mg/ml) | Bimeda | 8XYL004C | |
Solution of Chlorhexidine Gluconate 2% and Isopropyl Alcohol 2% | Carefusion | 260100C | |
Lidocaine Hydrochloride | Alveda Pharma | 0122AG01 | |
Bupivacaine Hydrochloride | Hospira | 1559 | |
Ophthalmic Ointment | Baussh and Lomb inc. | 2125706 | |
Stereotaxic Frame | Stoelting | 51600 | |
Stereotaxic Cannula Holder Arm | Harvard Apparatus | 72-4837 | |
Drill | Dremel | 8050-N/18 | |
Suture Thread Coated Vicryl Rapide 4-0 | Ethicon | VR2297 | |
Dental Acrylic Cement | Harvard Apparatus | 72-6906 | |
Screws | JI Morris Company | P0090CE125 | |
Isoflurane | Baxter | CA2L9100 | |
Cannula Gauge 20 10.55mm | HRS Scientific | C311G/SPC | |
Dummy-Cannula 10.55mm | HRS Scientific | C311DC/1/SPC | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Microdialysis Procedure | |||
CMA 402 Syringe Pump | Harvard Apparatus Canada | CMA-8003110 | |
Microsyringe 2.5ml Glass | Harvard Apparatus Canada | CMA-8309021 | |
Syringe Clip Medium For 1-2.5ml | Harvard Apparatus Canada | CMA-3408310 | |
Low-Torque Dual Channel Quartz-Lined Swivel | Instech Laboratories Inc. | 375/D/22QM | |
GSC Cast Iron Support Ring Stand | Fisher Scientifique | S13748 | |
Fisherbrand Castaloy Adjustable-Angle Clamps | Fisher Scientifique | 05769Q | |
NaHCO3 Sodium Bicarbonate | Sigma-Aldrich Canada | S5761-500G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
MgCl2 Magnesium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | M8266-100G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
NaCl Sodium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | S7653-1KG | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
L-Ascorbic Acid | Sigma-Aldrich Canada | A5960-25G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
KCl Potassium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | P9333-500G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
NaH2PO4 Sodium Phosphate Monobasic | Sigma-Aldrich Canada | S0751-1KG | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
CaCl2 Calcium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | 383147-100G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
Lighter | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Epoxy Glue | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Super Glue Gel | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Heat Shrink Tube 0.063" Inner Diameter Gardner Bender | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Cut-Off Wheels Dremel #409 | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
BD Needle 26 Gauge 0.5 Inch PrecisionGlide Sterile 305111 | Fisher Scientifique | 14-826-15 | For Laboratory Constructed Probes |
BD Needle 21 Gauge 1.5 Inch PrecisionGlide Sterile 305167 | Fisher Scientifique | 14-826-5B | For Laboratory Constructed Probes |
26G Stainless Steel Tubing One Foot | HRS Scientific | SST-26/FT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/20 .024" OD X .015" ID | HRS Scientific | C315CT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/10 .024" OD X .011" ID | HRS Scientific | C314CT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/50 .038" OD X .023" ID | HRS Scientific | C313CT | For Laboratory Constructed Probes |
30S WIRE ST.ST 0.008X 1’ Long | HRS Scientific | 008BSH/30S | For Laboratory Constructed Probes |
Polymicro Technologies Flexible Fused Silica Capillary Tubing Inner Diameter 50µm, Outer Diameter 150µm | Molex LLC Polymicro Technologies | 106815-0015 | For Laboratory Constructed Probes |
Spectra Por 132294 Micro-Dialysis Hollow Fiber Membranes 13 kD MWCO | Spectrum Labs | FSSP9778671 | For Laboratory Constructed Probes |
Stainless Steel Collar | Sirnay In.c | 304 | For Laboratory Constructed Probes / Custome made |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Concussion Apparatus | |||
Brass Weight | Rapido Métal Inc. | Attach metal loop to base | |
Metal Loop | Rona Inc. | Available at most hardware stores | |
PVC Guide Tube | Rona Inc. | Available at most hardware stores | |
Alluminum Foil | Alcan | Available at most grocery stores | |
Tape | Available commercially | ||
GSC Cast Iron Support Ring Stand | Fisher Scientifique | S13748 | |
U-Shaped Plexiglas Frame | Présentoirs PlexiPlus Inc. | Custom made | |
Foam Cushion | Mousse D&R Foam Inc. | Custom made | |
Razor Blades | VWR International | 55411-055 | |
Super Strong Trilene XT 20 lb. Berkley | Canadian Tire | Available at most hardware stores | |
Isoflurane | Baxter | CA2L9100 | |
Stop Watch | Available at most sporting goods retailer |