Описано здесь использование нескольких самодельных инструментов для передачи, охлаждения и убить взрослых Drosophila, а также для очистки стеклянных флаконов культуры и собирать яйца. Эти инструменты просты в обработке и довольно эффективны в обращении с Drosophila.
Плодовая муха, Drosophila melanogaster, широко используется как в биологических исследованиях и биологии образования. Обработка взрослых мух является общим, но трудно на практике, как взрослые мухи летать. Продемонстрировано здесь, как сделать некоторые простые и экономически эффективные инструменты для решения сложных вопросов в обработке Drosophila. Отверстия в пены пробки сделаны и пипетки советы или воронки вставляются в отверстия. Мухи затем двигаться только в одном направлении в пипетки наконечник / воронка сборки, что позволяет эффективно контролировать передачу взрослых Drosophila в или из флакона. Существующие протоколы были изменены для охлаждающих мух, охлаждая в дробленом льду и перенося их на холодную, твердую поверхность ледяного покрова. Ледяной пакет покрыт куском медицинской марли, которая удерживает обездвиженных мух из сгущенной воды при обследовании под стереомикроскопом. Мухи, наконец, усыпленных для подсчета и сортировки или отбрасываются микроволновой печи. Также была разработана клетка в форме бутылки для сбора яиц, а также трудосберегающее устройство и сопутствующее протокол для очистки стеклянных флаконов культуры.
Плодовая муха, Drosophila melanogaster, является моделью организма широко используется в биологических исследованиях и биологии образования для изучения широкого круга тем1,2. Основными проблемами обработки drosophila являются передача взрослых от флакона к флакону и иммобилизации мух, чтобы они легче справиться, так как все взрослые (за исключением некоторых мутантов3,4) может летать.
Условно, исследователь передает летит из одного флакона в другой, держа два флакона рот в рот, нажав мух вниз или позволяя мух летать в другой флакон, а затем разделения и replugging обоих флаконов4. Очевидно, что для этого необходимо, чтобы открывались два флакона с одинаковым диаметром, и трудно контролировать количество передаваемых мух. Между тем, это требует быстрых рук, чтобы получить работу, и избежать бродячих мух может привести к проблемам для лаборатории или класса. Добавление экстра девственных мух или самцов мух к уже подготовленному кресту является еще одной рутинной задачей в экспериментах дрозофилы. Условно, мухи должны быть обездвижены в крест флакон перед добавлением дополнительных мух.
Взрослые дрозофилы регулярно обезболиваются эфиром, CO2или леденящей душу5. По сравнению с эфиром и CO2 воздействия, охлаждение является наиболее экономически эффективным агентом для иммобилизации взрослых Drosophila и наименее вредных как для мух и исследователей (особенно молодых студентов)6,7. Однако вода, которая непрерывно конденсируется на холодной поверхности или камере, мочит мух. Трудно определить фенотипы мокрых мух, и они могутлегко повреждаются во время манипуляции 8,9. Это удерживает метод охлаждения от становится все более широкое признание.
Инструменты для переноса мух и метод охлаждения мух ранее были описаны10. В этом вопросе сообщается, что модифицированная методика охлаждения анестезии является безопасной, надежной и осуществимой для экспериментов с дрозофилой. Также описаны в настоящем документе 1) методы для убийства взрослых для подсчета, сортировки или отбрасывания, 2) трудосберегающих устройств и протоколов для очистки стеклянных флаконов культуры, и 3) простая клетка для сбора яиц. Легко разработанные и экономически эффективные инструменты, описанные здесь, могут быть использованы для решения сложных проблем обработки мух, и эти методы были протестированы и доказали свою надежность, надежность и простота в обращении для опытных и начинающих исследователей.
Некоторые самодельные инструменты для обработки основных видов деятельности, связанных с воспитанием дрозофилы и эксперименты описаны в этой работе. Эти инструменты просты, но довольно эффективны. Фактически любая лаборатория может сделать эти инструменты с легкостью, и исследо…
The authors have nothing to disclose.
Ни один
a pair of pliers | |||
cordless drill driver | max speed: 500 rpm | ||
electric soldering iron | |||
file | |||
funnel | diameter of disk<60mm | ||
ice box | |||
insect pins | |||
infrared thermometer | HCIYET HT-830 | ||
long cuff rubber gloves | |||
mechanical pencils | |||
medical gauze | |||
microcentrifuge tube | 100 ul | ||
microwave oven | |||
Parafilm | |||
peri dish | internal diameter 60 mm | ||
pipette tips | 1 ml | ||
plastic film | |||
plastic peri dish | Φ36 mm used to cover the empty vial | ||
point tweezers | |||
protective work gloves | |||
re-freezable hard icepacks | 26.5×14.5×2.5 cm or larger | ||
rubber air blower | |||
snap cutter | |||
soft drink bottle | 500 ml, internal diameter c.a. 65 mm | ||
sponge stopper | |||
stainless steel sponges | |||
tube brush | |||
vial | Φ34 mm × 90 mm |