Summary

Fokusert ion Beam litografi å etse nano-arkitekturer i Microelectrodes

Published: January 19, 2020
doi:

Summary

Vi har vist at den etsing av nano-arkitektur i intracortical microelectrode enheter kan redusere inflammatorisk respons og har potensial til å forbedre elektrofysiologisk innspillinger. Metodene beskrevet her skissere en tilnærming til etch nano-arkitekturer inn i overflaten av ikke-funksjonell og funksjonell enkelt skaft silisium intracortical microelectrodes.

Abstract

Med fremskritt innen elektronikk og fabrikasjon teknologien, intracortical microelectrodes ha gjennomgått innholdsrik forbedringer muliggjør det produksjon av sofistikert microelectrodes med betydelig resolution og expanded evnene. Fremdriften i produksjonsteknologi har støttet utviklingen av BioMimetic elektroder, som har som mål å sømløst integreres i hjernens parenchyma, redusere neuroinflammatory responsen observert etter elektrode innsetting og forbedre kvaliteten og lang levetid for elektrofysiologisk innspillinger. Her beskriver vi en protokoll for å ansette en BioMimetic tilnærming nylig klassifisert som nano-arkitektur. Bruken av fokuserte ion Beam litografi (LØGN) ble benyttet i denne protokollen til å etse spesifikke nano-arkitektur funksjoner inn i overflaten av ikke-funksjonell og funksjonell enkelt skaft intracortical microelectrodes. Etsing nano-arkitekturer inn i elektrode overflaten indikerte mulige forbedringer av biokompatibilitet og funksjonaliteten til den implantert enheten. En av fordelene med å bruke LØGN er evnen til å etse på produserte enheter, i motsetning til under fabrikasjon av enheten, tilrettelegging grenseløse muligheter til å endre mange medisinske enheter etter produksjon. Protokollen som presenteres her, kan optimaliseres for ulike materialtyper, Nano-arkitektur funksjoner og typer enheter. Augmenting overflaten av implantert medisinsk utstyr kan forbedre enhetens ytelse og integrering i vevet.

Introduction

Intracortical Microelectrodes (IME) er invasiv elektroder som gir et middel for direkte grensesnitt mellom eksterne enheter og neuronal populasjoner inne i cerebral cortex1,2. Denne teknologien er et uvurderlig verktøy for opptak nevrale handling potensialer for å forbedre vitenskapsmenn evne til å utforske neuronal funksjon, forhånd forståelse av nevrologiske sykdommer og utvikle potensielle terapier. Intracortical microelectrode, brukes som en del av Brain Machine Interface (BMI) systemer, gjør opptak av handlingen potensialer fra en person eller små grupper av neurons å oppdage motoriske intensjoner som kan brukes til å produsere funksjonelle utganger3. Faktisk, BMI systemer har blitt brukt for protese og terapeutiske formål, slik som ervervet Sensorimotor rytme kontroll for å drive en datamaskin markøren hos pasienter med amyotrofisk lateral sklerose (ALS)4 og ryggmargsskader5 og gjenopprette bevegelsen i mennesker som lider av kronisk tetraplegi6.

Dessverre, IME ofte ikke å spille inn konsekvent over tid på grunn av flere feil moduser som inkluderer mekaniske, biologiske og materielle faktorer7,8. Neuroinflammatory-responsen som oppstår etter at elektrode elektroden er antatt å være en betydelig utfordring som bidrar til elektrode svikt9,10,11,12,13,14. Den neuroinflammatory responsen er initiert under den første innsetting av IME som bryter blod hjerne barrieren, skader den lokale hjernen parenchyma og forstyrrer gliacellene og neuronal nettverk15,16. Denne akutte responsen er karakterisert ved aktiveringen av gliacellene celler (mikroglia/makrofager og astrocytter), som frigjør Pro-inflammatoriske og nevrotoksiske molekyler rundt implantatet området17,18,19,20. Den kroniske aktiveringen av gliacellene celler resulterer i en fremmedlegeme reaksjon karakterisert ved dannelsen av en gliacellene arr isolere elektroden fra friske hjernevevet7,9,12,13,17,21,22. Til syvende og sist hindrer elektroden evne til å registrere neuronal handling potensialer, på grunn av den fysiske barrieren mellom elektroden og neurons og degenerasjon og død av neurons23,24,25.

Den tidlige svikt i intracortical microelectrodes har ført til betydelig forskning i utviklingen av neste generasjons elektroder, med vekt på BioMimetic strategier26,27,28,29,30. Av spesiell interesse for protokollen som er beskrevet her, er bruken av nano-arkitekturen som en klasse for BioMimetic overflate endringer for IME31. Det er fastslått at overflater som etterligner arkitekturen til det naturlige in vivo-miljøet, har en forbedret biokompatiblerespons 32,33,34,35,36. Dermed er hypotesen overbevisende denne protokollen at diskontinuitet mellom den grove arkitekturen i hjernevevet og glatt arkitektur av intracortical microelectrodes kan bidra til neuroinflammatory og kroniske fremmedlegemer respons på implantert IME (for en full gjennomgang referere til Kim et al.31). Vi har tidligere vist at bruken av nano-arkitektur funksjoner som ligner på hjernens ekstracellulære Matrix Architecture reduserer astrocytt inflammatoriske markører fra celler kultivert på nano-architectured underlag, sammenlignet med flat kontroll overflater i både in vitro og ex vivo-modeller av nevroinflammasjon37,38. Videre har vi vist anvendelsen av fokusert ion Beam (LØGN) litografi til etch nano-arkitekturer direkte på silisium sonder resulterte i betydelig økt neuronal levedyktighet og lavere uttrykk for Pro-inflammatoriske gener fra dyr implantert med Nano-arkitektur sonder i forhold til jevn kontrollgruppe26. Derfor formålet med protokollen som presenteres her er å beskrive bruken av LØGN litografi å etse nano-arkitekturer på produsert intracortical microelectrode enheter. Denne protokollen ble utviklet for å etse nano-arkitektur størrelse funksjoner i silisium overflater av intracortical microelectrode Shanks utnytte både automatiserte og manuelle prosesser. Disse metodene er ukomplisert, reproduserbar, og kan sikkert være optimalisert for ulike enhets materialer og ønsket funksjon størrelser.

Protocol

Merk: gjør følgende trinn når du bruker riktig personlig verneutstyr, for eksempel en Laboratoriefrakk og hansker. 1. montering av ikke-funksjonell silisium probe for fokusert ion Beam (LØGN) Litografi Merk: for hele prosedyren som beskriver fabrikasjon av SOI wafer med 1 000 sonder, Vennligst referer til Ereifej et al.39. Isolere en stripe av 2-3 silisium sonder fra silisium på isolator (SOI) wafer inneholder 1 000 sonder. Ikk…

Representative Results

Liten LØGN etset nano-arkitektur på overflater av single skaft Intracortical sonderUtnytte metodene som er beskrevet her, intracortical sonder ble etset med spesifikke nano-arkitekturer følgende etablerte protokoller39. Dimensjoner og form av nano-arkitektur design beskrevet i disse metodene ble gjennomført fra tidligere in vitro resultater som viser en nedgang i gliacellene celle reaktivitet når kultivert med Nano-arkitektur design beskrevet her37…

Discussion

Den fabrikasjon protokollen skissert her utnytter fokusert ion Beam litografi til effektivt og reproduserbar etch nano-arkitekturer inn i overflaten av ikke-funksjonell og funksjonell enkelt skaft silisium microelectrodes. Fokusert ion Beam (løgn) litografi gjør det mulig for selektiv ablasjon av underlaget overflaten ved hjelp av en fint fokusert ion Beam50,51. Liten løgn er en direkte-skrive teknikk som kan produsere ulike funksjoner med nanoskala oppløsnin…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Denne studien ble støttet av USA (US) Department of Veterans Affairs rehabilitering forskning og utvikling service Awards: #RX001664-01A1 (CDA-1, Ereifej) og #RX002628-01A1 (CDA-2, Ereifej). Innholdet representerer ikke synspunktene til US Department of Veterans Affairs eller myndighetene i USA. Forfatterne vil gjerne takke FEI co (nå en del av Thermofisher Scientific) for personalet assistanse og bruk av instrumentering, som hjalp til med å utvikle skriptene som brukes i denne forskningen.

Materials

16-Channel ZIF-Clip Headstage Tucker Davis Technologies ZC16 The headstage and headstage holder may need to be changed, depending on the electrode used. https://www.tdt.com/zif-clip-digital-headstages.html
1-meter cable, ALL spring wrapped Thomas Scientific 1213F04 Any non treated petri dish will suffice. https://www.thomassci.com/Laboratory-Supplies/Cell-Culture-Dishes/_/Non-Treated-Petri-Dishes?q=petri%20dish%20cell%20culture
32-Channel ZIF-Clip Headstage Holder Tucker Davis Technologies Z-ROD32 The headstage and headstage holder may need to be changed, depending on the electrode used. https://www.tdt.com/zif-clip-digital-headstages.html
Acetone, Thinner/Extender/Cleaner, 30ml Ted Pella 16023 https://www.tedpella.com/SEMmisc_html/SEMpaint.htm#anchor16062
Baby-Mixter Hemostat Fine Science Tools 13013-14 Any curved hemostat will suffice. https://www.finescience.com/en-US/Products/Forceps-Hemostats/Hemostats/Baby-Mixter-Hemostat
Carbon Conductive Tape, Double Coated Ted Pella 16084-7 The protocol suggested three options for mounting the functional electrode to the aluminum stub (copper or carbon conductive tape or a low profile clip. We utilized the carbon conductive tape in our study. https://www.tedpella.com/semmisc_html/semadhes.htm
Corning Costar Not Treated Multiple Well Plates – 6 well Sigma Aldrich CLS3736-100EA Any non-treated 6 well plate will suffice. https://www.sigmaaldrich.com/catalog/substance/
Dumont #5 Fine Forceps Fine Science Tools 11251-30 Either this fine forceps or the vacuum pump will suffice. https://www.finescience.com/en-US/Products/Forceps-Hemostats/Dumont-Forceps/Dumont-5-Forceps/11251-30
Ethanol, 190 proof (95%), USP, Decon Labs Fisher Scientific 22-032-600 Any 95% ethanol will suffice. https://www.fishersci.com/shop/products/ethanol-190-proof-95-usp-decon-labs-10/22032600
Falcon Cell Strainer Fisher Scientific 08-771-1 https://www.fishersci.com/shop/products/falcon-cell-strainers-4/087711
FEI, Tescan, Zeiss (also for Philips, Leo, Cambridge, Leica, CamScan), aluminum, grooved edge, Ø32mm Ted Pella 16148 Depending on the SEM machine used, you may need a different size stub. https://www.tedpella.com/SEM_html/SEMpinmount.htm#_16180
Fisherbrand Aluminum Foil, Standard-gauge roll Fisher Scientific 01-213-101 Any aluminum foil will suffice. https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-aluminum-foil-7/p-306250
Fisherbrand Low- and Tall-Form PTFE Evaporating Dishes Fisher Scientific 02-617-149 Any Teflon plate will suffice, this is used to dry the probes after washing on a surface they will not stick onto. https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbrand-low-tall-form-ptfe-evaporating-dishes-12/p-88552
Michigan-style silicon functional electrode NeuroNexus A1x16-3mm-100-177 http://neuronexus.com/electrode-array/a1x16-3mm-100-177/
Model 1772 Universal holder KOPF Model 1772 Other stereotaxic frames and accessories will suffice. http://kopfinstruments.com/product/model-1772-universal-holder/
Model 900-U Small Animal Stereotaxic Instrument KOPF Model 900-U Other stereotaxic frames and accessories will suffice. http://kopfinstruments.com/product/model-900-small-animal-stereotaxic-instrument1/
Model 960 Electrode Manipulator with AP Slide Assembly KOPF Model 960 Other stereotaxic frames and accessories will suffice. http://kopfinstruments.com/product/model-1772-universal-holder/
Parafilm M 10cm x 76.2m (4" x 250') Ted Pella 807-5 https://www.tedpella.com/grids_html/807-2.htm
PELCO Vacuum Pick-Up System, 220V Ted Pella 520-1-220 Either this vacuum pump or the fine forceps will suffice. http://www.tedpella.com/grids_html/Vacuum-Pick-Up-Systems.htm#anchor-520
PELCO Conductive Silver Paint Ted Pella 16062 https://www.tedpella.com/SEMmisc_html/SEMpaint.htm#anchor16062
SEM FIB FEI Helios 650 Nanolab Thermo Fisher Scientific Helios G2 650 This is the specific focused ion beam and scanning electron microscope used in the protocol. The Nanobuilder software is what it comes with. If a different FIB instrument is used, it may not be completely compatible with the protocol, specifically the steps requiring the Nanobuilder software. https://www.fei.com/products/dualbeam/helios-nanolab/

References

  1. Salcman, M., Bak, M. J. A new chronic recording intracortical microelectrode. Medical and Biological Engineering. 14 (1), 42-50 (1976).
  2. Im, C., Seo, J. -. M. A review of electrodes for the electrical brain signal recording. Biomedical Engineering Letters. 6 (3), 104-112 (2016).
  3. Donoghue, J. Bridging the Brain to the World: A Perspective on Neural Interface Systems. Neuron. 60 (3), 511-521 (2008).
  4. Gilja, V., et al. Clinical translation of a high-performance neural prosthesis. Nature medicine. 21 (10), 1142-1145 (2015).
  5. Wolpaw, J. R., McFarland, D. J. Control of a two-dimensional movement signal by a noninvasive brain-computer interface in humans. Proceedings of the National Academy of Sciences. 101 (51), 17849-17854 (2004).
  6. Ajiboye, A. B., et al. Restoration of reaching and grasping in a person with tetraplegia through brain-controlled muscle stimulation: a proof-of-concept demonstration. Lancet. 389 (10081), 1821-1830 (2017).
  7. Polikov, V. S., Tresco, P. A., Reichert, W. M. Response of brain tissue to chronically implanted neural electrodes. Journal of Neuroscience Methods. 148 (1), 1-18 (2005).
  8. Barrese, J. C., et al. Failure mode analysis of silicon-based intracortical microelectrode arrays in non-human primates. Journal of Neural Engineering. 10 (6), 066014 (2013).
  9. McConnell, G. C., et al. Implanted neural electrodes cause chronic, local inflammation that is correlated with local neurodegeneration. Journal of Neural Engineering. 6 (5), 056003 (2009).
  10. Potter, K. A., Buck, A. C., Self, W. K., Capadona, J. R. Stab injury and device implantation within the brain results in inversely multiphasic neuroinflammatory and neurodegenerative responses. Journal of Neural Engineering. 9 (4), 046020 (2012).
  11. Biran, R., Martin, D. C., Tresco, P. A. Neuronal cell loss accompanies the brain tissue response to chronically implanted silicon microelectrode arrays. Experimental Neurology. 195 (1), 115-126 (2005).
  12. Kozai, T. D., Jaquins-Gerstl, A. S., Vazquez, A. L., Michael, A. C., Cui, X. T. Brain tissue responses to neural implants impact signal sensitivity and intervention strategies. ACS Chemical Neurosciences. 6 (1), 48-67 (2015).
  13. Jorfi, M., Skousen, J. L., Weder, C., Capadona, J. R. Progress towards biocompatible intracortical microelectrodes for neural interfacing applications. Journal of Neural Engineering. 12 (1), 011001 (2015).
  14. Michelson, N. J., et al. Multi-scale, multi-modal analysis uncovers complex relationship at the brain tissue-implant neural interface: new emphasis on the biological interface. Journal of Neural Engineering. 15 (3), 033001 (2018).
  15. Saxena, T., et al. The impact of chronic blood-brain barrier breach on intracortical electrode function. Biomaterials. 34 (20), 4703-4713 (2013).
  16. Potter, K. A., et al. The effect of resveratrol on neurodegeneration and blood brain barrier stability surrounding intracortical microelectrodes. Biomaterials. 34, 7001-7015 (2013).
  17. Ravikumar, M., et al. The Roles of Blood-derived Macrophages and Resident Microglia in the Neuroinflammatory Response to Implanted Intracortical Microelectrodes. Biomaterials. 0142 (35), 8049-8064 (2014).
  18. Hermann, J., Capadona, J. Understanding the Role of Innate Immunity in the Response to Intracortical Microelectrodes. Critical Reviews in Biomedical Engineering. 46 (4), 341-367 (2018).
  19. Ereifej, E. S., et al. Implantation of Intracortical Microelectrodes Elicits Oxidative Stress. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. , (2018).
  20. Block, M. L., Zecca, L., Hong, J. S. Microglia-mediated neurotoxicity: uncovering the molecular mechanisms. Nature Reviews Neuroscience. 8 (1), 57-69 (2007).
  21. Nguyen, J. K., et al. Influence of resveratrol release on the tissue response to mechanically adaptive cortical implants. Acta Biomaterialia. 29, 81-93 (2016).
  22. Salatino, J. W., Ludwig, K. A., Kozai, T. D., Purcell, E. K. Glial responses to implanted electrodes in the brain. Nature Biomedical Engineering. 1 (11), 862 (2017).
  23. Block, M. L., Zecca, L., Hong, J. -. S. Microglia-mediated neurotoxicity: uncovering the molecular mechanisms. Nature Reviews Neuroscience. 8 (1), 57-69 (2007).
  24. Biran, R., Martin, D., Tresco, P. Neuronal cell loss accompanies the brain tissue response to chronically implanted silicon microelectrode arrays. Experimental Neurology. 195 (1), 115-126 (2005).
  25. Liu, X., et al. Stability of the interface between neural tissue and chronically implanted intracortical microelectrodes. IEEE Transactions on Rehabilitation Engineering. 7 (3), 315-326 (1999).
  26. Ereifej, E. S., et al. The Neuroinflammatory Response to Nanopatterning Parallel Grooves into the Surface Structure of Intracortical Microelectrodes. Advanced Functional Materials. , (2017).
  27. Nguyen, J. K., et al. Mechanically-compliant intracortical implants reduce the neuroinflammatory response. Journal of Neural Engineering. 11 (5), 056014 (2014).
  28. Wei, X., et al. Nanofabricated Ultraflexible Electrode Arrays for High-Density Intracortical Recording. Advanced Science. , 1700625 (2018).
  29. Patel, P. R., et al. Chronic in vivo stability assessment of carbon fiber microelectrode arrays. Journal of Neural Engineering. 13 (6), 066002 (2016).
  30. Chen, R., Canales, A., Anikeeva, P. Neural recording and modulation technologies. Nature Reviews Materials. 2 (2), 16093 (2017).
  31. Kim, Y., et al. Nano-Architectural Approaches for Improved Intracortical Interface Technologies. Frontiers in Neuroscience. 12, (2018).
  32. Millet, L. J., Bora, A., Sweedler, J. V., Gillette, M. U. Direct cellular peptidomics of supraoptic magnocellular and hippocampal neurons in low-density co-cultures. ACS Chemical Neurosciences. 1 (1), 36-48 (2010).
  33. Ding, H., Millet, L. J., Gillette, M. U., Popescu, G. Actin-driven cell dynamics probed by Fourier transform light scattering. Biomedical Optical Express. 1 (1), 260-267 (2010).
  34. Kotov, N. A., et al. Nanomaterials for Neural Interfaces. Advanced Materials. 21 (40), 3970-4004 (2009).
  35. Curtis, A. S., et al. Cells react to nanoscale order and symmetry in their surroundings. IEEE Trans Nanobioscience. 3 (1), 61-65 (2004).
  36. Zervantonakis, I. K., Kothapalli, C. R., Chung, S., Sudo, R., Kamm, R. D. Microfluidic devices for studying heterotypic cell-cell interactions and tissue specimen cultures under controlled microenvironments. Biomicrofluidics. 5 (1), 13406 (2011).
  37. Ereifej, E. S., et al. Nanopatterning effects on astrocyte reactivity. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 101 (6), 1743-1757 (2013).
  38. Ereifej, E. S., Cheng, M. M. -. C., Mao, G., VandeVord, P. J. Examining the inflammatory response to nanopatterned polydimethylsiloxane using organotypic brain slice methods. Journal of Neuroscience Methods. 217 (1-2), 17-25 (2013).
  39. Ereifej, E. S., et al. The Neuroinflammatory Response to Nanopatterning Parallel Grooves into the Surface Structure of Intracortical Microelectrodes. Advanced Functional Materials. 28 (12), 1704420 (2018).
  40. Buzsáki, G. Large-scale recording of neuronal ensembles. Nature Neuroscience. 7 (5), 446-451 (2004).
  41. Mullen, R. J., Buck, C. R., Smith, A. M. NeuN, a neuronal specific nuclear protein in vertebrates. Development. 116 (1), 201-211 (1992).
  42. Rennaker, R. L., Miller, J., Tang, H., Wilson, D. A. Minocycline increases quality and longevity of chronic neural recordings. Journal of Neural Engineering. 4 (2), 1-5 (2007).
  43. Sladek, Z., Rysanek, D. Expression of macrophage CD14 receptor in the course of experimental inflammatory responses induced by lipopolysaccharide and muramyl dipeptide. Veterinarni Medicina. 53 (7), 347-357 (2008).
  44. Janova, H., et al. CD14 is a key organizer of microglial responses to CNS infection and injury. Glia. , (2015).
  45. Ziegler-Heitbrock, H. W. L., Ulevitch, R. J. CD14: Cell surface receptor and differentiation marker. Immunology Today. 14 (3), 121-125 (1993).
  46. Lowenstein, C. J., Padalko, E. iNOS (NOS2) at a glance. Journal of Cell Science. 117 (14), 2865-2867 (2004).
  47. Aktan, F. iNOS-mediated nitric oxide production and its regulation. Life Sciences. 75 (6), 639-653 (2004).
  48. Kozai, T. D., et al. Comprehensive chronic laminar single-unit, multi-unit, and local field potential recording performance with planar single shank electrode arrays. Journal of Neurosciences Methods. 242, 15-40 (2015).
  49. Kozai, T. D., et al. Mechanical failure modes of chronically implanted planar silicon-based neural probes for laminar recording. Biomaterials. 37, 25-39 (2015).
  50. Raffa, V., Vittorio, O., Pensabene, V., Menciassi, A., Dario, P. FIB-nanostructured surfaces and investigation of bio/nonbio interactions at the nanoscale. IEEE Transactions on Nanobioscience. 7 (1), 1-10 (2008).
  51. Lehrer, C., Frey, L., Petersen, S., Ryssel, H. Limitations of focused ion beam nanomachining. Journal of Vacuum Science & Technology B: Microelectronics and Nanometer Structures Processing, Measurement, and Phenomena. 19 (6), 2533-2538 (2001).
  52. Watkins, R., Rockett, P., Thoms, S., Clampitt, R., Syms, R. Focused ion beam milling. Vacuum. 36 (11-12), 961-967 (1986).
  53. Veerman, J., Otter, A., Kuipers, L., Van Hulst, N. High definition aperture probes for near-field optical microscopy fabricated by focused ion beam milling. Applied Physics Letters. 72 (24), 3115-3117 (1998).
  54. Lanyon, Y. H., Arrigan, D. W. Recessed nanoband electrodes fabricated by focused ion beam milling. Sensors and Actuators B: Chemical. 121 (1), 341-347 (2007).
  55. Menard, L. D., Ramsey, J. M. Fabrication of sub-5 nm nanochannels in insulating substrates using focused ion beam milling. Nano Letters. 11 (2), 512-517 (2010).
  56. Ziberi, B., Cornejo, M., Frost, F., Rauschenbach, B. Highly ordered nanopatterns on Ge and Si surfaces by ion beam sputtering. Journal of Physics: Condensed Matter. 21 (22), 224003 (2009).
  57. Reyntjens, S., Puers, R. A review of focused ion beam applications in microsystem technology. Journal of Micromechanics and Microengineering. 11 (4), 287 (2001).
  58. Heyderman, L., David, C., Kläui, M., Vaz, C., Bland, J. Nanoscale ferromagnetic rings fabricated by electron-beam lithography. Journal of Applied Physics. 93 (12), 10011-10013 (2003).
  59. Baquedano, E., Martinez, R. V., Llorens, J. M., Postigo, P. A. Fabrication of Silicon Nanobelts and Nanopillars by Soft Lithography for Hydrophobic and Hydrophilic Photonic Surfaces. Nanomaterials. 7 (5), 109 (2017).
  60. Eom, H., et al. Nanotextured polymer substrate for flexible and mechanically robust metal electrodes by nanoimprint lithography. ACS Applied Materials & Interfaces. 7 (45), 25171-25179 (2015).
  61. Li, K., Morton, K., Veres, T., Cui, B. 5.11 Nanoimprint Lithography and Its Application in Tissue Engineering and Biosensing. Comprehensive Biotechnology. , 125-139 (2011).
  62. Dong, B., Zhong, D., Chi, L., Fuchs, H. Patterning of conducting polymers based on a random copolymer strategy: Toward the facile fabrication of nanosensors exclusively based on polymers. Advanced Materials. 17 (22), 2736-2741 (2005).
  63. Dalby, M. J., Gadegaard, N., Wilkinson, C. D. The response of fibroblasts to hexagonal nanotopography fabricated by electron beam lithography. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 84 (4), 973-979 (2008).
  64. Tseng, A. A., Chen, K., Chen, C. D., Ma, K. J. Electron beam lithography in nanoscale fabrication: recent development. IEEE Transactions on Electronics Packaging Manufacturing. 26 (2), 141-149 (2003).
  65. Yang, Y., Leong, K. W. Nanoscale surfacing for regenerative medicine. Wiley Interdisciplinary Reviews: Nanomedicine and Nanobiotechnology. 2 (5), 478-495 (2010).
  66. Vermeij, T., Plancher, E., Tasan, C. Preventing damage and redeposition during focused ion beam milling: The “umbrella” method. Ultramicroscopy. 186, 35-41 (2018).

Play Video

Citer Cet Article
Mahajan, S., Sharkins, J. A., Hunter, A. H., Avishai, A., Ereifej, E. S. Focused Ion Beam Lithography to Etch Nano-architectures into Microelectrodes. J. Vis. Exp. (155), e60004, doi:10.3791/60004 (2020).

View Video