Koronare Vorläuferzellen und lösliche Biomarker bei kardiovaskulärer Prognossie nach koronarer Angioplastie

Summary

Die Entwicklung von schweren kardiovaskulären Ereignissen, die die kardiovaskuläre Prognose nach der koronaren Angioplastie beeinflussen, wird durch das Ausmaß der koronaren Schäden und der Gefäßreparatur beeinflusst. Die Verwendung neuartiger koronarer zellulärer und löslicher Biomarker, die auf Gefäßschäden und -reparaturen reagieren, sind nützlich, um die Entwicklung von MACEs und Prognosen vorherzusagen.

Abstract

Wichtige unerwünschte kardiovaskuläre Ereignisse (MACEs) wirken sich negativ auf die kardiovaskuläre Prognose von Patienten aus, die aufgrund einer koronaren ischämischen Verletzung einer koronaren Angioplastie unterzogen werden. Das Ausmaß der koronaren Schäden und die Mechanismen der Gefäßreparatur sind Faktoren, die die zukünftige Entwicklung von MACEs beeinflussen. Intrinsische gefäßliche Merkmale wie die Plaqueeigenschaften und die Komplexität der Koronararterie haben prognostische Informationen für MACEs gezeigt. Die Verwendung von intrakoronar zirkulierenden Biomarkern wurde jedoch als bequeme Methode zur Früherkennung und Prognose von MACEs postuliert, da sie dynamische Mechanismen mit koronaren Schäden und Reparaturen stärker widerspiegeln. Die Bestimmung koronar zirkulierender Biomarker während der Angioplastie, wie die Anzahl der Subpopulationen mononuklearer Vorläuferzellen (MPCs) sowie die Konzentration löslicher Moleküle, die Entzündungen, Zellhaftung und -reparatur reflektieren, Bewertung zukünftiger Entwicklungen und Prognose von MACEs 6 Monate nach der koronaren Angioplastie. Diese Methode wird durch ihre translationale Natur und bessere Leistung als periphere blutzirkulierende Biomarker in Bezug auf die Vorhersage von MACEs und ihre Auswirkungen auf die kardiovaskuläre Prognose, die für die Risikoschichtung von Patienten angewendet werden kann, hervorgehoben. mit koronaren Herzkrankheit unter angioplasty.

Introduction

Koronare Angioplastie und Stents stellen ein Bergungsverfahren für Patienten mit koronaren Herzerkrankungen (CAD) dar. Jedoch, große unerwünschte kardiovaskuläre Ereignisse (MACEs), einschließlich Herz-Kreislauf-Tod, Myokardinfarkt, koronare Restenose, und Episoden von Angina oder Dekompensierung Herzinsuffizienz, kann Monate nach koronaren Eingriff auftreten, was zu ungeplanten Besuchen im Krankenhaus. MACEs sind weltweit verbreitet und ihre Morbi-Sterblichkeit ist hoch¹.

Koronare ischämische Verletzungen induzieren eine frühe vaskuläre Reaktion und reparative Mechanismen, die die Mobilisierung von MPCs aufgrund ihrer Differenzierungsfähigkeit und/oder ihres angio-reparativen Potenzials sowie der Produktion von löslichen Molekülen wie interzellulären Adhäsionsmolekülen (ICAMs), Matrix-Metalloproteinasen (MMPs) und reaktiven Sauerstoffspezies, die die Zelladhäsion, gewebeumbauenund, reflektieren, reflektieren. Obwohl intrinsische gefäßliche Merkmale wie Plaque-Eigenschaften und koronare Arterienkomplexität verwendet wurden, um MACEs vorherzusagen, haben einige Studien vorgeschlagen, dass Biomarker im Zusammenhang mit den Mechanismen der Verletzung und Reparatur im koronaren Endothel sehr nützlich für die frühe Identifizierung und Prognose von kardiovaskulären Ereignissen bei Patienten mit CAD, die koronare Angioplastie^2,3,4,5.

Kontinuierliches Interesse am Verständnis der Mechanismen, die CAD-Verletzungen und -Reparaturen zugrunde liegen, hat die Forscher motiviert, intrakoronar zirkulierende Biomarker zu untersuchen, da die koronare Probenahme Gefäßschäden genauer widerspiegelt und⁶repariert. Die Charakterisierung von koronaren Biomarkern in Studien am Menschen war jedoch knapp^7,8,9. Daher bestand der Zweck dieser Studie darin, eine Methode zur Bestimmung der Menge an koronar zirkulierenden MPCs und löslichen Molekülen zu beschreiben, die sowohl Gefäßverletzungen als auch Reparaturen widerspiegeln, und zu zeigen, ob diese Biomarker mit MACEs und der klinischen Prognose von CAD-Patienten, die einer koronaren Angioplastie unterzogen wurden, in Verbindung gebracht werden. Diese Methode basiert auf der Verwendung von vaskulären, zirkulierenden MPCs und löslichen Molekülen, die durch Probenahmevonstellen am nächsten an der Gefäßschädigung gewonnen werden. Es kann auch nützlich sein für klinische Studien für Dieschämien unterden Gliedmaßen, Schlaganfall, Vaskulitis, venöse Thrombose, und andere Verletzungen mit Gefäßverletzungen und Reparatur.

Protocol

Dieses Protokoll entspricht den institutionellen Leitlinien der Ethikkommission für die menschliche Forschung. 1. Koronare Angiographie, Ultraschall und Blutentnahme Fordern Sie klinische und demografische Basisinformationen an, bevor koronare Interventionen vorliegen. Sammeln Sie die Daten des Einzelnen: Alter, Geschlecht, aktueller Raucherstatus, Body-Mass-Index (BMI), Bluthochdruck, Dyslipidämie, Diabetes mellitus, Medikamente und die Indikation für die aktuelle koronare Angiog…

Representative Results

Koronare, venöse Sinus und peripheres Blut wurden von 52 Patienten entnommen, die einer koronaren Angiographie unterzogen wurden (Abbildung 1) und eine hohe Prävalenz von Bluthochdruck und Dyslipidämie zeigten. Bei der klinischen Nachbeobachtung wurden 11 (21,1%) MACEs traten 6 Monate nach koronarer Angiographie auf: Tod (n = 1), Angina, die einen Krankenhausaufenthalt erfordert (n = 6), Myokardinfarkt (n = 2) und/oder Hinweise auf Herzinsuffizienz (n = 4)…

Discussion

Die Blutentnahme aus der betroffenen Herzkranzgefäße kann schwierig sein. Manchmal ist die Herzkranzgefäße kaum zugänglich. In diesem Fall kann die Probenahme aus der venösen Sinus eine Alternative sein. Wir führten Validierungstests durch, in denen zirkulierende Biomarker in der Herzkranzgefäße mit venösen Sinus verglichen wurden, ohne signifikante Unterschiede. Die Leistung zirkulierender Biomarker wurde jedoch nur für koronare Proben validiert. Daher muss die Leistung von Biomarkern, die aus der venösen Si…

Materials

BSA	Roche	10735086001	Bovine Serum Albumin (BSA) as a buffering agent, stabilizer, standard and for blending.
Calibration Beads	Miltenyi Biotec / MACS	#130-093-607	MACQuant calibration beads are supplied in aqueous solution containing 0.05% sodium azide. 3.5 ml for up to 100 tests
CD133/1 (AC133)-PE	Milteny Biotec / MACS	#130-080-801	Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer
CD184 (CXCR4)-PE-VIO770	Miltenyi Biotec / MACS	#130-103-798	Monoclonal, Isotype recombinant human IgG1, conjugated
CD309 (VEGFR-2/KDR)-APC	Miltenyi Biotec / MACS	#130-093-601	Antibody conjugated to R-Phycoerythrin in PBS/EDTA buffer
CD34-FITC	Miltenyi Biotec / MACS	#130-081-001	The monoclonal antibody clone AC136 detecs a class III epitope of the CD34
CD45- VioBlue	Miltenyi Biotec / MACS	#130-092-880	Monoclonal CD45 Antibody, human conjugated
Conical Tubes	Thermo SCIENTIFIC	#339651	15ml conical centrifuge tubes
Cytometry Tubes	FALCON Corning Brand	#352052	5 mL Polystyrene Round-Bottom Tube. 12×75 style. Sterile.
EDTA	BIO-RAD	#161-0729	Heavy metals, (as Pb) <10ppm, Fe <0.01%, As <1ppm, Insolubles <0.005%
Improved Neubauer	Without brand	Without catalog number	Hemocytometer for cell counting. (range 0.1000mm, 0.0025mm2)
K2 EDTA Blood Collection Tubes	BD Vacutainer	#367863	Lilac plastic vacutainer tube (K2E) 10.8mg, 6 mL.
Lymphoprep	Stemcell Technologies	01-63-12-002-A	Sterile and checked on the presence of endotoxins. Density: 1.077±0.001g/mL
Paraformaldehyde	SIGMA-ALDRICH	#SZBF0920V	Fixation of biological samples, (powder, 95%)
Pipette Transfer 1,3mL	CRM Globe	PF1016, PF1015	The transfer pipette is a tool that facilitates liquid transfer with greater accuracy.
Test Tubes	KIMBLE CHASE	45060 13100	Heat-resistant test tubes. SIZE/CAP 13 x 100 mm