Fornito qui è un protocollo che dettaglia i passi per stabilire un modello animale di dolore cronico post-ischemia (CPIP). Questo è un modello ben riconosciuto che imita la sindrome del dolore regionale complesso umano di tipo I. Vengono ulteriormente valutate le ipersensibilità meccaniche e termiche, così come i comportamenti nocifensivi indotti dalla capsaicina osservati nel modello di ratto CPIP.
La sindrome del dolore regionale complessa di tipo I (CRPS-I) è una malattia neurologica che causa forti dolori tra i pazienti e rimane una condizione medica irrisolta. Tuttavia, i meccanismi sottostanti di CRPS-I devono ancora essere rivelati. È noto che l’ischemia/reperfusione è uno dei fattori principali che causa CRPS-I. Per mezzo di ischemia prolungata e di reperfusione dell’arto posteriore, è stato stabilito il modello di dolore post-ischemia del ratto (CPIP) per imitare CRPS-I. Il modello CPIP è diventato un modello animale ben riconosciuto per studiare i meccanismi di CRPS-I. Questo protocollo descrive le procedure dettagliate coinvolte nella creazione del modello di ratto del CPIP, compresa l’anestesia, seguita da ischemia/reperfusione dell’arto posteriore. Le caratteristiche del modello CPIP del ratto vengono ulteriormente valutate misurando le ipersensibilità meccaniche e termiche dell’arto posteriore, nonché le risposte nocifensive all’iniezione acuta di capsaicina. Il modello CPIP ratto presenta diverse manifestazioni CRPS-I-like, tra cui edema dell’arto posteriore e iperemia nella fase iniziale dopo l’istituzione, ipersensibilità termiche e meccaniche persistenti, e aumentato le risposte nocifensive all’iniezione di capsaicina acuta. Queste caratteristiche lo rendono un modello animale adatto per ulteriori indagini sui meccanismi coinvolti in CRPS-I.
Sindrome del dolore regionale complessa (CRPS) reprents sintomi di dolore complesso e cronico risultante da fratture, traumi, chirurgia, ischemia o lesione nervosa1,2,3. CRPS è classificato in due sottocategorie: CRPS tipo-I e tipo-II (CRPS-I e CRPS-II)4. Studi epidemiologici hanno rivelato che la prevalenza di CRPS era di circa 1:20005. Il CRPS-I, che non mostra evidenti danni ai nervi, può provocare dolore cronico e influisce drammaticamente sulla qualità della vita dei pazienti. Gli attuali trattamenti disponibili mostrano effetti terapeutici inadeguati. Pertanto, CRPS-I rimane ancora un problema clinico importante e impegnativo che deve essere affrontato.
Stabilire un modello animale preclinico che imita CRPS-I è fondamentale per esplorare i meccanismi alla base di CRPS-I. Per affrontare questo problema, Coderre et al. ha progettato un modello di ratto applicando ischemia prolungata e reperfusione all’arto posteriore per ricapitolare CRPS-I6. È noto che la lesione ischemia/reperfusione è tra le principali cause di CRPS-I7. Il modello CPIP ratto presenta molti sintomi CRPS-I-like, che includono edema degli arti posteriori e iperemia nella fase iniziale dopo la creazione del modello, seguita da persistenti ipersensibilità termiche e meccaniche6. Con l’aiuto di questo modello, si propone che la sensibilizzazione centrale al dolore, l’attivazione del canale TRPA1 periferico e la generazione di specie reattive di ossigeno, ecc. contribuiscano al CRPS-I8,9,10. Recentemente abbiamo stabilito con successo il modello di ratto CPIP ed eseguito il sequenziamento dell’RNA dei gangli della radice dorsale (DRG) che innervano la zampa posteriore colpita11. Abbiamo scoperto alcuni potenziali meccanismi che sono probabilmente coinvolti nella mediazione delle ipersensibilità del dolore di CRPS-I11. Abbiamo inoltre identificato il potenziale vanilloide 1 (TRPV1) del recettore transitorio nei neuroni DRG come importante contributore alle ipersensibilità meccaniche e termiche di CRPS-I12.
In questo studio, abbiamo descritto le procedure dettagliate coinvolte nella creazione del modello di ratto di CPIP. Abbiamo ulteriormente valutato il modello CPIP del ratto misurando le ipersensibilità meccaniche e termiche e la sua reattività alla sfida della capsaicina acuta. Proponiamo che il modello CPIP del ratto possa essere un modello animale affidabile per ulteriori indagini sui meccanismi coinvolti in CRPS-I.
Questo protocollo descrive i metodi dettagliati per stabilire un modello CPIP di ratto applicando l’ischemia/reperfusione agli arti posteriori dei ratti. Si tratta di valutare l’aspetto degli arti posteriori, l’edema, le ipersensibilità meccaniche/termiche e i comportamenti nocifensivi acuti in risposta all’iniezione di capsaicina.
L’ischemia/reperfusione degli arti è un fattore comune che contribuisce alla CRPS-I nei pazienti umani12. Questo protocollo descrive come …
The authors have nothing to disclose.
Questo progetto è stato sponsorizzato dalla National Natural Science Foundation of China (81873365 e 81603676), dai Fondi Provinciali di Scienze Naturali di Ehejiang per giovani studiosi distinti (LR17H270001) e dai fondi di ricerca dell’Università Cinese di Medicina dello Q2019J01, 2018 -Y37, 2018-Y19).
1.5 ml Eppendorf tube | Eppendorf | 22431021 | |
DMSO | Sigma-Aldrich | D1435 | |
Capsaicin | APEXBIO | A3278 | |
Digital caliper | Meinaite | NA | |
O-ring | O-Rings West | Nitrile 70 Durometer | 7/32 in. internal diameter |
Plantar Test Apparatus | UGO Basile, Italy | 37370 | |
von Frey filaments | UGO Basile, Italy | NC12775 |