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Article de méthode

Induction de mort cérébrale chez les souris utilisant la surveillance et la ventilation intra-artérielles de tension artérielle par trachéostomie

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DOI :

10.3791/60831

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17 avril 2020

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* These authors contributed equally

Dans cet article

Résumé

Nous présentons un modèle murin d’induction de mort de cerveau afin d’évaluer l’influence de ses effets pathophysiologiques sur des organes aussi bien que sur des greffes consécutives dans le contexte de la transplantation d’organe solide.

Résumé

Bien que le don vivant et le don après la mort circulatoire offrent d’autres possibilités de transplantation d’organes, le don après la mort cérébrale du donneur (BD) représente toujours la principale source de transplantations solides. Malheureusement, la perte irréversible de la fonction cérébrale est connue pour induire de multiples changements pathophysiologiques, y compris les modifications hémodynamiques ainsi que hormonales, conduisant finalement à une réponse inflammatoire systémique. Les modèles qui permettent une étude systématique de ces effets in vivo sont rares. Nous présentons un modèle murin d’induction de BD, qui pourrait aider à enquêter sur les effets dévastateurs de BD sur la qualité d’allogreffe. Après la mise en œuvre de la mesure de la pression artérielle intra-artérielle par l’intermédiaire de l’artère carotide commune et de la ventilation fiable par l’intermédiaire d’une trachéotomie, BD est induite par une augmentation constante de la pression intracrânienne à l’aide d’un cathéter ballon. Quatre heures après l’induction de BD, les organes peuvent être récoltés pour l’analyse ou pour d’autres procédures de transplantation. Notre stratégie permet l’analyse complète de la BD du donneur dans un modèle murin, permettant ainsi une compréhension approfondie des effets liés à la BD dans la transplantation d’organes solides et ouvrant potentiellement la voie à un préconditionnement optimisé des organes.

Introduction

La transplantation est actuellement le seul traitement curatif pour l’échec d’organe de phase finale. Jusqu’à présent, les patients atteints de décès du cerveau (BD) ont été la principale source de dons d’organes, bien que le don et le don vivant après la mort circulatoire soient des alternatives précieuses1. BD est défini par un coma irréversible (avec une cause connue), l’absence de réflexes de tige de cerveau et l’apnée2. Malheureusement, les organes de BD démontrent des résultats inférieurs dans la survie à long terme de greffe indépendamment de l’antigène leucocyte humain (HLA)-décalage et temps ischémique froid

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Protocole

Des expériences sur les animaux ont été réalisées conformément aux Principes de soins aux animaux de laboratoire formulés par la National Society for Medical Research et le Guide for the Care and Use of Laboratory Animals préparés par l’Académie nationale des sciences et publiés par les National Institutes of Health (NiH Publication no 86-23, révisé en 1985). Toutes les expériences ont été approuvées par le Ministère autrichien de l’éducation, de la science et de la culture (BMWF-66.011/0071-II/3b/2012).

1. Cathétérisme artérielle

  1. Anesthésiez la souris avec une injection intraperitonéale de kétamine et de xylazine

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Résultats

Le modèle murine BD a été réalisé avec succès plus de 100 fois avec un taux de réussite de plus de 90%. En outre, la transplantation d’organes post-interventionnels du cœur et du rein a été exécutée en toute sécurité7.

BD induit une variété de changements pathophysiologiques qui peuvent être étudiés plus en plus loin en utilisant ce modèle. Comme le montre la figure 1, la pre.......

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Discussion

BD, un facteur de risque pour la qualité d’allogreffe chez les donneurs multi-organes, implique une pléthore de changements pathophysiologiques, qui ne peuvent être suffisamment évalués qu’à l’aide de modèles in vivo. Les changements hémodynamiques, la tempête de cytokine, les changements hormonaux et leur impact ultime sur la qualité et la survie de greffe d’organe ne peuvent pas être analysés in vitro4. La majorité de la transplantation de base ainsi que la recherche immunologique dépend des out.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Cathéter artériel (BD Neoflon 26G)TransducteursBD 391349
(APT300)Harvard Apparatus Inc.73-3862
Cathéter d’embolectomie artérielle Fogarty N° ; 3Edwards Lifesciences Corporation120403F
ForcepsFST11271-30
Systèmes de couverture homéothermique avec sonde flexibleHarvard Apparatus Inc.55-7020
KetansolGraeub6680110
Micro ciseauxFST15018-10
Porte-aiguilleFST12060-02
Prolene 5-0Ethicon8698H
Pompe 11 Elite Infusion uniquement AppareilHarvard Inc.70-4500
CiseauxFST14075-11
Microscope stéréotaxiqueOlympusSZX7
Transpore Tape3M1527-1
UnderpadsMolinea.A274301
Ventilateur pour souris (MiniVent Model 845)Harvard Apparatus Inc.73-0043
XylasolGraeub7630109
de pression artérielle

Références

  1. Hart, A., et al. OPTN/SRTR 2017 Annual Data Report: Kidney. American Journal of Transplantation. 19 (Suppl 2), 19(2019).
  2. The Quality Standards Subcommittee of the American Academy of Neurology. Practice parameters for determining brain death in adults (summary s....

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Réimpressions et autorisations

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