뮤린 심장 이식을 위한 커프 기술의 최적화

Summary

마우스 자궁 경부 이성애 심장 이식을 위한 커프 기술에 대한 내부 튜브 접근법을 도입하여 커프스 위에 혈관을 상회합니다. 우리는 두 경험이 풍부한 외과 의사 사이의 협력이 수술 시간을 현저하게 단축한다는 것을 발견했습니다.

Abstract

뮤린 심장 이식은 40 년 이상 수행되었습니다. 미세 수술의 발전과 함께, 특정 새로운 기술은 수술 효율을 개선하기 위해 사용되었습니다. 우리의 실험실에서, 우리는 두 가지 주요 단계로 커프 기술을 최적화했습니다. 첫째, 내부 튜브 기술을 사용하여 외부 경정맥과 경동맥 혈관에 임시 내부 튜브를 삽입하여 커프스 위에 혈관의 전복을 용이하게 했습니다. 둘째, 우리는 두 경험이 풍부한 외과 의사의 협력을 통해 완전한 이성애 심장 이식을 수행했습니다. 이러한 수정으로 인해 작동 시간이 25분으로 단축되었으며 성공률은 95%였습니다. 이 보고서에서는 이러한 절차를 자세히 설명하고 추가 비디오를 제공합니다. 우리는 향상 된 커프 기술에 이 보고 는 뮤린 이종성 심장 이식에 대 한 실용적인 지침을 제공할 것입니다 믿고 기본 연구에 대 한이 마우스 모델의 유틸리티를 향상 시킬 것 이다.

Introduction

1973년 복부 내의 종단 간 해부학을 통한 마우스 이성애 심장 이식의 확립은 기본 이식 면역학 연구^1에서중요한 이정표였다. 이 모델은 허혈 재관전 상해^2,면역 거부 및 공차^3,,4의메커니즘을 분석하기 위한 중요하고 유효한 도구를 제공했다. 그러나, 수술의 복잡하고 시간이 많이 소요되는 특성뿐만 아니라 감염의 잠재력은 심한 perioperative 복부 유착 및 염증 반응을 초래할 수 있으며, 이로 인해 이성애 심장 이식 모델에 대한 낮은 효율이 초래됩니다.

자궁 경부 이종성 심장 이식 기술은 1991년^5년에첸에 의해 처음 기술되었다. 이 모델에서, 수령인의 외부 경정맥은 접목의 폐 동맥에 마취되고 경동맥은 상승대동맥에 마취된다. 이 방법의 주요 장점은 모니터링의 편리함과 수령인에게 외상을 줄이는 것입니다. 같은 해, 마쓰라는 외부 경정맥과 경동맥의 끝이 테플론 커프위에 상정되어 있는 개선된 기술을 설명했고, 외장 실크 합자^6으로고정되었다. 몇몇 연구원은 또한 수령인^7의외부 경정맥에 커프를 삽입하기 전에 기증자 심혼에 있는 오른쪽 폐 동맥에 커프를 고정했습니다. 지금까지, 커프 기술은 폐^8,간⁹및 신장¹⁰ 이식을 위한 것을 포함하여 각종 혈관 혈통 이식 모형에 널리 적용되었습니다.

현재까지 커프 기술과 관련된 몇 가지 어려움이 있습니다. 예를 들어, 경동맥은 추가탄성으로 인해 커프를 상회하기가 어렵고, 그 결과 조직이 뒤로 뒤집힌다. 따라서, 추가 연습 및 미세 수술 확장기는이 단계를 완료 하는 데 필요할 수 있습니다. 또한 자궁 경부 혈관 준비는 최대 25 분이 걸릴 수 있습니다.

이러한 문제를 해결하기 위해, 우리는 커프 기술을 기반으로 하고 혈관 벽의 환향을 돕는 내부 튜브를 사용하여 외부 경정맥과 경동맥에 커프를 고정하는 것을 포함하는 내부 튜브 기술을 소개합니다. 또한 간단한 교육을 통해 받는 사람 준비가 15.5 분으로 줄어듭니다. 이 기술은 수술의 복잡성을 감소시키고 추가 연습이나 혈관 확장제의 사용을 필요로하지 않습니다. 그것은 모든 이식 면역 연구에서 적용 될 수있다, 특히 받는 사람이 두 개의 심장 동종 이식을받는 동안 제 3 자 면역 내성을 확인하기위한, 복부 내에서 다른 하나 와 목^(11)에다른. 우리는 또한 이 모형을 설치하기 위하여 두 명의 숙련된 외과 의사 사이 협력을 추천합니다, 한 외과 의사는 수령인 동물을 준비하고 다른 하나는 기증자 심혼을 수확하고 이식합니다. 이러한 공동 작업으로 작동 시간을 25분으로 단축할 수 있습니다. 이러한 최적화된 절차를 사용하여, 우리는 신유전자, 동종^{12,,,13,,14,,15,,16,,17,,18,19}및 제노제닉 마우스 심장 이식^{모델(20)을}확립했다.

내부 튜브 기술의 발달에 대한 근거는 높은 성공률을 가진 마우스 심장 이식 모델의 설립을 위한 수술 시간을 줄이는 것이었습니다. 자궁 경부 심장 이식 모델의 최적화는 전통적인 봉합및 커프^{기술(21)에}비해 짧은 수술 기간에 높은 성공률의 획득을 용이하게 한다. 또한, 협력 모델은 단일 작업자와 함께 수행되는 수술에 비해 기증자 심장의 따뜻한 허혈성 시간을 더욱 줄일 수 있다.

Protocol

동물(BALB/c, C57BL/6, 남성, 8-12주)은 샤먼 대학 실험실 동물 센터의 특정 병원균 이없는 시설에 보관되어 있습니다. C57BL/6은 받는 사람으로 사용되며 BALB/c는 기증자로 사용됩니다. 모든 절차는 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC) 지침에 따라 수행됩니다. 참고: 마이크로 가위, 마이크로 스트레이트 집게, 마이크로 커브드 집게 및 마이크로 바늘 홀더를 포함한 마이크로 수술 기?…

Representative Results

수술 시간 훈련 후 숙련된 외과 의사는 내부 튜브 기술을 사용하여 35분 이내에 성공적으로 수술을 수행할 수 있으며, 수령인 준비를 위해 약 15.5분, 기증자 준비를 위해 10.9분이 필요하며, 기증자 심장 해부학에 4.4분이 필요합니다. 감기와 따뜻한 허혈 시간(기증자 제제에서 심장 이식까지)은 내부 튜브 기술 및 봉합 기술없이 커프 기술을 사용하여 수술에 비해 15….

Discussion

마우스 심장 이식 모델은 이식 면역학 연구를 위한 중요한 도구이며, 이 모델의 면역 메커니즘을 평가하기 위한 도구와 재료로 많은 수의 유전자 변형 마우스를 사용할 수 있다. 그러나 혈관 봉합사 및 혐오와 같은 미세 수술 기술적 과제는 광범위한 사용을 제한했습니다. 본 연구에서는, 우리는 뮤린 심장 이식의 특정 핵심 기술적인 도전을 조사하고 좋은 결과를 얻었습니다. 프로토콜의 중요한 ?…

Materials

Artery cuff	Self-made		Polyamide tube. diameter: 0.55 mm,length: 1.0 mm
Artery inner tube	Self-made		Polyamide tube. Diameter: 0.28mm
Micro curved forceps	Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory	WA3050	1/8 arc, 0.3-mm tip without a hook
Micro needle holders	Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory	WA2050	0.2-mm tip
Micro scissors	Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory	WA1050	Straight, blade length: 10 mm
Micro straight forceps	Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory	WA3060	0.15-mm tip without a hook
Scanlan Vascu-Statt Bulldog Clamps	Scanlan International Inc	1001-531	Clamping pressure 20–25 grams
Vein cuff	Self-made		Polyamide tube. diameter: 0.9 mm,length: 1.2 mm
Vein inner tube	Self-made		Polyamide tube. Diameter: 0.6 mm