该协议描述了如何创建精确的拉明切除术,在小鼠模型中诱导稳定的转节型脊髓损伤,为脊髓损伤研究提供最小的附带损伤。
脊髓损伤 (SCI) 在很大程度上导致不可逆转和永久性的功能丧失,最常见的是创伤的结果。正在研究一些治疗方案,如细胞移植方法,以克服SCI引起的使人衰弱的残疾。大多数临床前动物试验是在SCI的啮齿动物模型中进行的。虽然SCI的老鼠模型已经被广泛使用,但老鼠模型受到的关注较少,尽管老鼠模型比老鼠模型有显著的优势。老鼠体积小,比老鼠低动物维护成本,许多转基因小鼠模型的提供对许多类型的研究都有利。诱导动物的可重复和精确伤害是SCI研究的主要挑战,在小型啮齿动物中,需要高精度手术。过去十年来,转切型损伤模型一直是移植治疗研究中常用的损伤模型,但不存在诱导小鼠完全转切型损伤的标准化方法。我们开发了一种手术方案,用于诱导胸椎10级(T10)的C57BL/6小鼠出现完全转切型损伤。该程序使用小尖端钻头代替角膜来精确去除层,之后使用带圆切刃的薄刀片诱导脊髓转液。这种方法导致小啮齿动物的可重复转切型损伤,具有最小的附带肌肉和骨骼损伤,因此最大限度地减少混淆因素,特别是在行为功能结果分析的地方。
脊髓损伤 (SCI) 是一个复杂的医疗问题,导致健康和生活方式的急剧变化。SCI没有治愈的方法,SCI的病理生理学也没有被彻底理解。动物SCI模型,特别是啮齿动物模型,为试验新疗法提供了宝贵的工具,并已被用于探索SCI几十年。迄今为止,超过72%的临床前SCI研究采用了老鼠模型,而只有16%的人使用过小鼠1。虽然大鼠由于体型较大,而且倾向于形成类似于人类SCI的蛀牙,传统上是研究新疗法的首选模型动物,但老鼠(包括许多转基因小鼠模型)现在正更频繁地用于研究SCI 2的细胞和分子机制。小鼠模型在比大鼠更容易处理、更快的生殖速率和更低的成本方面提供了额外的好处;小鼠也表现出高度的基因组相似性与人类1,2,3。小鼠模型的主要缺点是尺寸明显缩小,这给创建和治疗脊髓损伤的外科手术带来了挑战。
现有文献中存在差距,突出表明需要一种坚固且可重复的手术方案,以在小鼠模型中诱导稳定的 SCI。因此,我们提供了一种新颖和精确的手术方法,以克服这些限制。该协议提供了深入的指南,以诱导小鼠的转切型损伤,因为这种损伤类型已被确认为最合适的研究再生和退行性的变化后,伤害6,以及神经可塑性,神经电路和组织工程方法7。我们选择诱导损伤在较低的胸腔区域,因为胸腔水平SCI是最常用的文献1。
这种方法在小鼠T10椎位诱发完全转切型损伤,导致动物完全截瘫,低于损伤水平。总体而言,此方法可导致最小出血、可忽略不计的附带损害和稳定的可重复伤害。与之前公布的无兰胺切除术10的转治方法相比,该方法在直接可视化方面提供了好处,无需操纵脊柱的曲率,更好地控制损伤的完成,增强了控制出血和实现止血的能力。这种方法的优点是,该协议可以修改,用于任?…
The authors have nothing to disclose.
这项工作得到了格里菲斯大学国际学生(PhD)津贴的R,佩里交叉基金会赠款JE和JSJ,克莱姆琼斯基金会赠款JSJ和JE,昆士兰州汽车事故保险委员会赠款JSJ和JE的支持。