מתואר הוא פרוטוקול כדי להקים דוקסורוביצין המושרה קרדיומיופתיה המושרה (DCM) מודל בעכברים באמצעות הזרקה תוך-פטרייתונית לטווח ארוך של Doxorubicin.
קרדיומיופתיה מורחבת (DCM) מתייחסת לספקטרום של הפרעות שריר הלב הטרוגניות המאופיינת בהרחבת חדרי הלב וביצועי לב מדוכאים בהיעדר יתר לחץ דם, valvular, מולד, או איסכמי מחלות לב, אשר עשוי להיות קשור לזיהום, הפרעות אוטואימוניות או מטבוליות, או ירושה משפחתית. זה יכול להתקדם לתוך אי ספיקת לב עם פרוגנוזה גרועה. Doxorubicin (Dox) מועסק באופן נרחב כסם כימותרפי, אך השימוש בו מוגבל מכיוון שהוא גורם לשינויים דמויי DCM של שריר הלב. רעילות שריר הלב שלה מיוחסת עקה חמצונית, דלקת כרונית, אפופטוזיס cardiomyocyte. מודל של DCM ניצול אלה סימפטומים DCM הנגרמת Dox לא הוקם.
אחד הגורמים הנפוצים ביותר לאי ספיקת לב, DCM מאופיין בהרחבת חדרית וירידה בתפקוד הלב והיא הסיבה הנפוצה ביותר להשתלת לב ברחבי העולם1. על מנת להמשיך לחקור את הפתוגנזה שלה ולמצוא טיפולים יעילים, גישה למודלים בעלי חיים בוגרים חשובה במיוחד. מטרת הניסויים המתוארים היא ליצור מודל עכבר יציב של DCM הדומה ל- DCM אנושי.
בשל הפתוגנזה המורכבת של DCM, ישנן שיטות רבות ושונות כדי להפוך מודלים בעלי חיים מתאימים. דגמי DCM ספונטניים2 יציבים יחסית, אך הם יקרים ולא זמינים בקלות. מודלים בעלי חיים מהונדסים גנטית3 אינם מבוססים היטב ודורשים שימוש ניסיוני יותר. מודלים בעלי חיים DCM המושרה על ידי זיהום ויראלי4 או פגמים אוטואימוניות5 קל להשיג, אבל הם לא מייצגים לחלוטין של DCM. מודלים הקשורים רעילות שריר הלב כוללים מודלים DCM הנגרמים מאלכוהול ומודלים בעלי חיים DCM המושרה Dox.
מודל קרדיומיופתיה המושרה דוקס מתקבל על ידי הזרקה תוך-איפריטונית של Dox6. המודל מנצל את תופעת הלוואי הכרונית החמורה ביותר של Dox: לאחר חשיפה של Dox, חולים לפתח סימפטומים DCM 12et מאוחר עם אחידות קלינית7. דוקס-המושרה סטרס חמצוני8 ונזק מיטוכונדריאלי9, אשר מובילים אפופטוזיס cardiomyocyte, הם סימפטומים בפתוגנזה של DCM. ישנם מודלים טיפול דוק אקוטי וכרוני: מינון גבוה יחיד של Dox (15 מ”ג/ק”ג) מעורר מודל לטווח קצר עבור קרדיומיופתיה10, בעוד זריקות דוקס במינון נמוך חוזרות ונשנות (שש שבועיות, 3 מ”ג/ קילוגרם) לגרום מודל לטווח ארוך עבור קרדיומיופתיה11. בהתבסס על המחקר שהוצג, עכברי סוג בר מוזרק תוך אלפיציונלי פעם בשבוע במשך חודש במינון של 5 מ”ג / קילוגרם תצוגה מורפולוגיה והיסתולוגיה של הלב עולה בקנה אחד עם המאפיינים של DCM עד סוף הטיפול, מתן דרך אידיאלית להקים מודל DCM.
Dox היא תרופה אנטי-טמורית תקופתית לא-מדעית הנפוצה בפרקטיקה קלינית12. תופעת הלוואי העיקרית שלה היא cardiotoxicity, המאופיינת על ידי קרדיומיופתיה ואי ספיקת לב לאחר מכן13. המנגנון הבסיסי כולל נזק של peroxidation השומנים שריר הלב, עיכוב של רשתית סרקופלסמית שריר הלב Ca2 +– ATPase, והפ…
The authors have nothing to disclose.
עבודה זו נתמכה על ידי הקרן לפיתוח מדע וטכנולוגיה של פרויקט מפתח, מחלקת הבריאות של נאנג’ינג (No.YKK16098).
4% paraformaldehyde | servicebio | CAS30525-89-4 | |
C57BL/6 mice | Model Animal Research Center of Nanjing University | ||
Doxorubicin hydrochloride | Pfizer | CAS25316-40-9 | |
echocardiography | Visualsonics | ||
Hematoxylin and Eosin staining kit | Solarbio | G1120 | |
Masson staining kit | Solarbio | G1343 | |
phosphate buffer solution | Sigma | P5368 | |
potassium chloride | Sigma | CAS7447-40-7 | |
sterilized syringe | Millipore | SLGP033RB |