Moulage vasculaire des poumons de souris postnatales adultes et précoces pour l’imagerie micro-CT

Russell H. Knutsen; Leah  M. Gober; Joseph  R. Sukinik; Danielle  R. Donahue; Elise  K. Kronquist; Mark  D. Levin; Sean  E. McLean; Beth  A. Kozel

doi:10.3791/61242

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Article de méthode

Moulage vasculaire des poumons de souris postnatales adultes et précoces pour l’imagerie micro-CT

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DOI :

10.3791/61242

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20 juin 2020

Russell H. Knutsen¹ , Leah M. Gober¹ , Joseph R. Sukinik¹ , Danielle R. Donahue² , Elise K. Kronquist¹ , Mark D. Levin¹ , Sean E. McLean³ , Beth A. Kozel¹

¹Translational Vascular Medicine Branch, National Heart Lung and Blood Institute, National Institutes of Health, ²Mouse Imaging Facility, National Institute of Neurological Disorders and Stroke, National Institutes of Health, ³Division of Pediatric Surgery, Department of Surgery, University of North Carolina at Chapel Hill

Dans cet article

Résumé

Le but de cette technique est la visualisation ex vivo des réseaux artériels pulmonaires des souris postnatales et adultes précoces par l’inflation pulmonaire et l’injection d’un composé à base de polymère radio-opaque par l’intermédiaire de l’artère pulmonaire. Les applications potentielles pour les tissus moulés sont également discutées.

Résumé

Les vaisseaux sanguins forment des réseaux complexes dans l’espace tridimensionnel. Par conséquent, il est difficile d’apprécier visuellement comment les réseaux vasculaires interagissent et se comportent en observant la surface d’un tissu. Cette méthode fournit un moyen de visualiser l’architecture vasculaire tridimensionnelle complexe du poumon.

Pour ce faire, un cathéter est inséré dans l’artère pulmonaire et la vascularisation est simultanément rincée de sang et chimiquement dilatée pour limiter la résistance. Les poumons sont ensuite gonflés par la trachée à une pression standard et le composé polymère est infusé dans le lit vasculaire à un débit standard. Une fois que l’ensemble du réseau artériel est rempli et autorisé à guérir, la vascularisation pulmonaire peut être visualisée directement ou image sur un scanner micro-CT (μCT).

Lorsqu’on les effectue avec succès, on peut apprécier le réseau artériel pulmonaire chez des souris allant de l’âge postnatal précoce aux adultes. En outre, bien que démontré dans le lit artériel pulmonaire, cette méthode peut être appliquée à n’importe quel lit vasculaire avec le placement optimisé de cathéter et les extrémités.

Introduction

L’objectif de cette technique est la visualisation de l’architecture artérielle pulmonaire à l’aide d’un composé à base de polymère chez la souris. Tandis que des travaux étendus ont été exécutés sur les lits vasculaires systémiques tels que le cerveau, le coeur, et le rein¹^,²^,^3,⁴^,^,⁵, moins d’information est disponible concernant la préparation et le remplissage du réseau artériel pulmonaire. Le but de cette étude, par conséquent, est d’élargir les travaux précédents⁶^,