הזרקת פיגומים ביו-חומרים הידרוג'ל למוח לאחר שבץ
Summary
שבץ מוחי הוא בעיה גלובלית עם אפשרויות טיפול מינימליות וללא טיפול קליני נוכחי לחידוש רקמת המוח האבודה. כאן אנו מתארים שיטות ליצירת שבץ פוטותרומבוטי מדויק בקליפת המוח המוטורית של מכרסמים והזרקה מאוחרת יותר של ביו-חומרים הידרוג’ל כדי לחקור את השפעתם על התחדשות רקמות לאחר שבץ.
Abstract
שבץ מוחי הוא הגורם המוביל לנכות וסיבת המוות החמישית המובילה בארצות הברית. כ -87% מכל השבץ הם שבץ איסכמי ומוגדרים כחסימה פתאומית של כלי המספק דם למוח. בתוך דקות מהחסימה, תאים מתחילים למות וכתוצאה מכך נזק בלתי הפיך לרקמות. הטיפולים הטיפוליים הנוכחיים מתמקדים בהסרת קרישי דם או תמה כדי לאפשר את הרפוי ולמנוע נזק מוחי חמור יותר. למרות פלסטיות מוחית חולפת עשויה להציל חלק מהרקמה הפגועה לאורך זמן, חלקים משמעותיים מהחולים נותרים עם ליקויים נוירולוגיים שלעולם לא ייפתרו. קיים מחסור באפשרויות טיפוליות לטיפול וגירעונות נוירולוגיים הנגרמים על ידי שבץ מוחי, תוך הדגשת הצורך לפתח אסטרטגיות חדשות לטיפול באוכלוסיית המטופלים הגדלה. ביו-חומרים להזרקה מתוכננים כעת כדי לשפר את פלסטיות המוח ולשפר את התיקון אנדוגני באמצעות משלוח של סוכנים פעילים או תאי גזע. שיטה אחת לבדיקת גישות אלה היא להשתמש במודל שבץ מכרסמים, להזריק את הביו-חומרים לליבת השבץ ולהעריך תיקון. לדעת את המיקום המדויק של ליבת השבץ הוא הכרחי לטיפול מדויק לאחר שבץ, ולכן, מודל שבץ התוצאה מיקום שבץ צפוי עדיף כדי למנוע את הצורך בהדמיה לפני הזרקה. הפרוטוקול הבא יכסה כיצד לגרום לשבץ פוטותרומבוטי, כיצד להזריק הידרוג’ל בצורה מבוקרת ומדויקת, וכיצד לחלץ ולהקרין את המוח תוך שמירה על שלמות הביו-חומרים. בנוסף, נוה להדגיש כיצד אותם חומרים הידרוג’ל יכולים לשמש לאספקה משותפת של תאי גזע. פרוטוקול זה יכול להיות כללי לשימוש של ביו-חומרים אחרים להזרקה לתוך ליבת השבץ.
Introduction
שבץ מוחי הוא הגורם המוביל לנכות וסיבת המוות החמישית המובילה בארצות הברית. כ -87% מכלל השבץ הם איסכמיים, בעוד שרוב 13% הנותרים הם דימומים2. שבץ איסכמי מוגדר כחסימת זרימת הדם בעורק לרקמה שמסביב. חסם זה גורם למחסור בחמצן ונמק לאחר מכן שמוביל לעתים קרובות לנכות קבועה בחולים ששרדו. אמנם חלה ירידה בשיעור התמותה משבץ3, שכיחותו צפויה לגדול ל -3.4 מיליון אנשים עד 20304. עלייה זו בניצולים נכים ונטל כלכלי כתוצאה מכך הובילו לדחיפה למחקר שבץ המתמקד במנגנונים של תיקון עצבי. לאחר שבץ יש תקופה דלקתית שמובילה להיווצרות צלקת המונעת את הרחבת האזור הנמקי. האזור המקיף את הליבה הנמקית מכונה “peri-infarct” ויש ראיות חזקות לכך שהפלסטיות באזור זה, הכוללת אנגיוגנזה מוגברת, נוירוגנזה ונבט אקסוני, קשורה ישירות להתאוששות הנצפית במודלים של בעלי חיים ובני אדם5. מכיוון שאין מודלים במבחנה שיכולים לשכפל כראוי את האינטראקציות המורכבות לאחר שבץ, מודלים של בעלי חיים חיוניים לחקר שבץ.
ישנם מספר דגמי vivo שניתן להשתמש בהם כדי לייצר שבץ איסכמי. אחד המודלים הנפוצים ביותר המשמשים בעכברים הוא חסימה בעורק המוחי האמצעי, או MCAo, באמצעות דיסטלי או פרוקסימלי (באמצעות חוט תוך עורקי) אוחסם. המודל הפרוקסימלי, הידוע גם בשם MCAo חוט (fMCAo), בדרך כלל גורם שבץ איסכמי גדול המקיפים בכל מקום בין 5% ל 50% של חצי הכדור המוחי, תלוי במספר גורמים6. בדגמים אלה, תפר או חוט מתקדם מעורק הראשי הפנימי לבסיס העורק המוחי האמצעי (MCA) ונשמר במקום לפרק זמן מסוים. שיטה זו לחסימה, אשר ניתן נעשה זמני או קבוע, מייצר אוטם כי הוא מרוכז בסטריאטום עשוי או לא יכול להיות כרוך יתר על המידה קליפת המוח6. גודל הקו המתקבל משתנה מאוד, וטכניקות הדמיה, כגון דופלר לייזר, נדרשות כדי לאשר את האפקטיביות של ההליך בכל עכבר. חסימת חוט תוך-עורקי או תוך-זוהר הנמשכת יותר מ-30 דקות מייצרת משיכות בקצה הגדול יותר של טווח הגודל. כמה חוקרים התמקדו בזמני החסימה קצרים יותר של חוטים, הדורשים מיקוד ניסיוני משמעותי ואימותמעבדה 7. מודלים של Filament MCAo בעכברים עוקבים אחר שלבים דומים של מוות תאי, התקדמות איסכמית, ויצירת אזור אוטם פרי כפי שניתן לראות במקרים של שבץ אנושי; עם זאת, השבץ הגדול יותר דומה יותר למצב המחלה של אוטם מוחי ממאיר, שהם פחות נפוצים, פחות ניתן לטיפול שבץ אנושי6. בינתיים, חסם MCA דיסטלי דורש ניתוח מעורב יותר וכת craniectomy. במודל זה, החלק הדיסטלי של MCA העובר לאורך פני השטח של המוח הוא חסם ישירות עם עניבת תפר או צרוב. בווריאציות מסוימות של הטכניקה, עורקי העורק הראשי חסומים באופן חד-צדדי או חולף-דו-צדדי. היתרון של MCAo דיסטלי הוא שהוא מייצר שבץ מבוסס קליפת המוח כי הוא פחות משתנה בגודל מאשר מודל חוט. עם זאת, המודל הדיסטלי מייצר תפוקה התנהגותית ירודה יותר עקב טרנספר של העורק הראשי החיצוני (ECA), שהוא גם דאגה עם fMCAo6.
מודל שבץ חלופי הידוע כפחות פולשני הוא מודל הפוטו-טרומבוטי (PT). מודל PT תוצאות מיקום מוגדר היטב של איסכמיה והוא קשור לשיעור הישרדות גבוה8. הטכניקה מסתמכת על צבע רגיש לאור מוזרק תוך-איפריטונית המאפשר חמצון פוטו-וסקולרי פשוט על ידי הקרנת הרקמה הרצויה עם אור או לייזר9. עם עירור, נוצרים רדיקלים חמצן הגורמים נזק אנדותל, אשר מפעיל צבירה טסיות דם היווצרות קריש באזור מוקרן8,9. השליטה ההדוקה על גודל ומיקום שבץ, כמו גם רבייה גבוהה של מודל PT, עושה את זה אידיאלי עבור לימוד ביו חומרים. בעוד דיוק מתאפשר באמצעות לייזר וקואורדינטות סטריאוטקסיות, ישנם כמה חסרונות שעשויים להפוך את המודל הזה פחות אידיאלי עבור מחקרים מעטים. שלא כמו דגם fMCAo, לא ניתן לשחזר את מודל קו ה-PT. לכן, חומרים לחקירת סוכנים neuroprotective ספציפיים לנזקים לאחר reperfusion או המנגנונים הבאים reperfusion לא יהיה שימושי כאן8. בנוסף, בשל העלבון המיקרווסקולרי של מודל PT, פנומברה איסכמית קטנה יחסית נראית. במקום זאת, בצקת vasogenic המקומי מתרחשת, וזה לא אופייני לשבץ אנושי, מה שהופך את המודל הזה לא רצוי עבור מחקרי סמים פרה קליניים התמקד באזור peri-אוטם6,8.
המטרה הכוללת של אסטרטגיות ביו-חומרים בשבץ היא לספק סוכנים ביו-אקטיביים או לשמש כמטריצה חוץ-תאית תחליף לצמיחת רקמת המוח. אסטרטגיה אחת שנחקור באמצעות השיטות שלנו היא לספק הידרוג’ל ישירות לתוך ליבת השבץ, בניגוד לרקמת peri-אוטם שבו טיפולים רבים בתא הנוכחי מועברים10. הרציונל לגישה זו הוא כי משלוח לתוך הרקמה הנמקית שנמצאה בליבה תימנע משיבוש הרקמה הבריאה או המתאוששת שמסביב. אנו מניחים דיפוזיה של כל סוכנים פעילים הכלולים בתוך biomaterial יוכל להגיע peri-אוטם מן הליבה, במיוחד מאז אנו מוצאים כי משלוח של biomaterials הידרוג’ל מפחית את עובי צלקת גליה11. זה חשוב מאז אזור אוטם פרי הוכח להפגין neuroplasticity לאחר שבץ, מה שהופך אותו למטרה אטרקטיבית. יתר על כן, משלוח של מטריצה פונדקאית לליבת השבץ יכול להיות טעון עם אנגיוגניים12 או neurogenic13 גורמים כדי להנחות את היווצרות של רקמה חדשה, כמו גם תאים עבור המסירה14. משלוח תאים משופר מאוד באמצעות מטריצה מכיוון שהוא מגן על תאים מפני כוחות ההזרקה הקשים והסביבה המקומית הקיימת במהלך המסירה, כמו גם מעודד בידול וחריטה15.
אלה biomaterials טיפולי להזרקה יש רלוונטיות קלינית ביישומי שבץ, כמו אין כרגע טיפולים רפואיים הממריצים התאוששות עצבית לאחר שבץ. המעגלים העצביים הבסיסיים המעורבים בהתאוששות נמצאים ברקמת המוח הסמוכה לליבת השבץ16, בעוד שליבת השבץ עצמה נטולת רקמה עצבית בת קיימא. אנו צופים כי אספקת biomaterial לתוך ליבת שבץ נמק יש פוטנציאל לעורר את הרקמה הסמוכה לקראת תהליכים רגנרטיביים באמצעות מספר מנגנונים שהוזכרו קודם לכן, כולל שחרור מחסן של גורמי גדילה13, גירוי של רקמה בצמיחה וקידום של התפתחות רקמת המוחמתאוששת 11,12, שינוי של תגובות חיסוניות17, ואספקה של טיפולים שמקורם בתאי גזע14, 18. עם זאת, כדי ללמוד ביעילות את האפשרות של יישומים אלה, שיטה עקבית לשחזור עבור גרימת שבץ והזרקת ביו חומרים. מודל קו PT משתמש בטכניקות המציעות שליטה מדויקת על הכיוון והמיקום של הקו. לייזר המחובר למכשיר הסטריאוטקסי מנחה כיוונים, ומשאבות המחוברות למכשירים הסטריאוטקסיים שולטות בקצב ההזרקה של החומר ללא צורך בצורות נוספות של הדמיה. לכן, בחרנו לתאר את השיטות לביצוע שבץ PT בקליפת המוח המוטורית של עכברים ולהזרקת ביו-חומרים לליבת השבץ. כאן, אנו משתמשים הידרוג’ל חלקיקים מיקרו-נקבוביים (MAP) כמו biomaterial להזרקה ללא תאים הוסיף או גורמי גדילה. בנוסף, אנו מסבירים כיצד לאחזר בהצלחה את המוח עם ביו-חומרים שלמים, ואנו דנים בתוצאות אימונוכימיה המשמשות לניתוח תוצאת השבץ עם ובלי הזרקה של ביו-חומרים.
Protocol
Representative Results
Discussion
כאן אנו מדגימים מודל שבץ קבוע שניתן לשחזור בקלות, זעיר פולשני ומתארים כיצד להזריק ביו-חומרים לאוטם חמישה ימים לאחר השבץ. השימוש בצבע פוטותרומבוטי רוז בנגל ולייזר קולימיציה של 520 ננומטר המחובר למכשיר הסטריאוטקסי מעניק לנו את היכולת למקם את השבץ בקליפת המוח המוטורית של העכבר בדיוק משופר. חמ…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו אוהבים להכיר המכונים הלאומיים לבריאות ואת המכון הלאומי להפרעות נוירולוגיות ושבץ למימון (R01NS079691).
Materials
| 10% Normal Goat Serum | VWR | 100504-028 | For blocking buffer |
| 2-ply alcohol pre pad, Sterile, Medium | Medline | MDS090735 | |
| 25uL Hamilton Syringe 702RN, no needle | Fishcer Scientific | 14824663 | Syringes used to inject biomaterials |
| 25uL Positive displacement pipette | Gilson | M-25 | |
| 2x Beam Expander, 400-650nm | Thorlabs | GBE02-A | Laser beam expander |
| Adjustable Stage Platform | Kopf Instruments | 901 | |
| Anti-Glucose Transporter GLUT1 antibody, rabbit | Abcam | ab113435 | |
| Anti-Iba1 Antibody, goat | abcam | ab5076 | |
| BD Vacutainer Safety-Lok Blood Collection Sets. 25G, 12" | Medsupply | 367294 | For perfusions |
| BKF12- Matte Black Aluminum Foil | Thorlabs | BKF12 | To cover anything that is reflective when using laser. |
| Bone Iris Mini Scissors – 3-1/2" | Sklar surgical instruments | 64-2035 | |
| C57BL/6 Mice | Jackson Laboratory | 000664 | 8-12 weeks of age |
| Cage Assembly Rob | Thorlabs | ER3-P4 | 3" Long, diameter 6mm, 4 pack – for attaching laser to sterotax |
| Carbon Steel Burrs -0.5mm Diameter | Fine Science Tools | 19007-05 | For creating burr hole |
| Chromium(III) potassium sulfate dodecahydrate | VWR | EM1.01036.0250 | |
| Compact Controller for pigtailed lasers | Thorlabs | CLD1010LP | |
| Cotton Swabs | VWR | 89031-288 | |
| CP 25 pipette tips | Gilson | F148012 | |
| Donkey anti-goat IgG H&L (488) | abcam | ab150129 | |
| Donkey Anti-rabbit IgG H&L (647) | abcam | ab150075 | |
| Donkey Anti-rat IgG H&L (555) | abcam | ab150154 | |
| EMS DPX Mountant | Elecron Microscopy Sciences | 13512 | Mounting solution for slides |
| EMS Gelatin Powder Type A 300 Bloom | Electron Microscopy Sciences | 16564 | For gelatin coating slides |
| EMS Paraformaldehyde, Granular | VWR | 100504-162 | For making 45 PFA |
| ESD Worstation kit | Elmstat | WSKK5324SB | Need for setting up the laser |
| Fiber Bench Wall Plate, unthreaded | Thorlabs | HCA3 | Need for connecting laser to Kopf shaft |
| FiberPort | Thorlabs | PAF-X-5-A | FC/APC& APC, f=4.6mm, 350-700nm, diameter 0.75mm |
| Fine Scissors – straight/sharp-blunt/10cm | Fine Science Tools | 14028-10 | |
| GFAP Antibody, rat | Thermo Fisher Scientific | 13-0300 | |
| Heating Plate | Kopf Instruments | HP-4M | |
| ImmEdge Hydrophobic Barrier Pen | Vector Laboratories | H-4000 | For staining slides |
| IMPAC 6-Integrated Multi Patient Anesthesia Center | VetEquip | 901808 | |
| Iodine Prep Pads | Medx Supple | MED MDS093917H | |
| Jewlers Forceps #5 | GFS chemicals | 46085 | |
| Laser Safety Glasses | Thorlabs | LG10B | Amber Lenses, 35% Visible light (googles versions available too) |
| M27-1084 Powerful LED Dual Goose-neck | United Scope | LED-11C | |
| Medical USP Grade Oxygen | Airgas | OX USP250 | |
| Miltex Adson Dressing Forceps, Disecting-grade | Intefra Miltex | V96-118 | |
| Mini Cord/Cordless Small Animal Trimmer | Harvard aparatus | 72-6110 | |
| Mini-pump variable flow | Thomas Scientific | 70730-064 | Pump for perfusions |
| Mouse Brain Matrices, Coronal Slices, 1mm | Kent Scientific | RBMA-200c | For TTC slices |
| Mouse Gas Anethesia Head Holder | Kopf Instruments | 923-B | |
| Nanojet Control Box | Chemyx | 10050 | |
| Nanojet pump header | Chemxy | 10051 | Attach to stereotaxic device for injecting biomaterial |
| Needle RN 30G PT STY 3, 0.5 inch | Fishcer Scientific | NC9459562 | |
| Non-rupture ear bars 60º | Kopf Instruments | 922 | |
| PBS buffer pH 7.4 | VWR | 97062 338 | |
| Pigtaled laser 520 nm, 100mW, 5G Pin | Thorlabs | LP520-MF100 | |
| Positive charge glass slides | Hareta | AHS90-WH | |
| Power engergy meter | Thorlabs | PM100D | Used to measure your mW laser output |
| Puralube Vet Ointment | Dr. Foster Smith | 9N-76855 | |
| Rectal Probe Mouse | kopf Instruments | Ret-3-ISO | |
| Rose Bengal Dye 95% | Sigma-Aldrich | 330000-5G | |
| Shaft Modified 8-32 threaded hole 1/2" depth | Kopf Instruments | 1770-02 | For connecting laser to sterotaxic device |
| Slim photodiode power sensor | Thorlabs | S130VC | Used with power energy meter |
| SM1-Threaed 30 mm Cage Plate 0.35" thick 2 Retaining | Thorlabs | CP02 | For connecting laser expander |
| Sol-M U-100 Insuline syringe with 1/2 unit markings 0.5 mL | VWR | 10002-726 | To inject rose bengal |
| StainTray Slide Staining System | Simport Scientific | M920-2 | For staining slides |
| Sterotaxic device | Kopf Instruments | 940 | Small Animal Stereotaxic Instrument |
| Student Adson Forceps -1×2 teeth | Fine Science Tools | 91127-12 | |
| Student Fine Forceps – straight/broad Shanks | Fine Science Tools | 91113-10 | |
| Temperature Controller | Kopf Instruments | TCAT-2LV | |
| Tissue-Tek OCT compound | VWR | 25608-930 | |
| Triton X-100 | VWR | 97063-864 | |
| Upper Bracket Clamp | Kopf Instruments | 1770-c | For connecting laser to sterotaxic device |
| Vetbond Tissue Adhessive 3mL | Santa Cruz Biotechnology | sc-361931 | |
| Vogue Professional My Manicurist | Bargin Source | 6400 | For Burrs |
| VWR Bead Sterilizers | VWR | 75999-328 | |
| Tissue Tek OCT compound | Sakura | 4583 | For tissue embeding |
References
- National Center for Health Statistics. . Health, United States, 2015: With Special Feature on Racial and Ethnic Health Disparities. , (2016).
- Benjamin, E. J., et al. Heart disease and stroke statistics-2017 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 135 (10), 229 (2017).
- Rosamond, W., et al. Heart Disease and Stroke Statistics-2007 update: a report from the American Heart Association Statistics Committee and Stroke Statistics Subcommittee. Circulation. 115 (5), 69 (2017).
- Ovbiagele, B., et al. Forecasting the future of stroke in the united states: A policy statement from the American heart association and American stroke association. Stroke. 44 (8), 2361-2375 (2013).
- Carmichael, S. T. Themes and strategies for studying the biology of stroke recovery in the poststroke epoch. Stroke. 39 (4), (2008).
- Carmichael, S. T. Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose. NeuroRx: the journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2 (3), (2005).
- Qin, L., et al. An adaptive role for BDNF Val66Met polymorphism in motor recovery in chronic stroke. Journal of Neuroscience. 34 (7), 2493-2502 (2014).
- Fluri, F., Schuhmann, M. K., Kleinshnitz, C. Animal models of ischemic stroke and their application in clinical research. Drug Design, Development and Therapy. 9, 3445-3454 (2015).
- Talley Watts, L., Zheng, W., Garling, R. J., Frohlich, V. C., Lechleiter, J. D. Rose Bengal Photothrombosis by Confocal Optical Imaging In Vivo: A Model of Single Vessel Stroke. Journal of Visualized Experiments. (100), e52794 (2015).
- Tuladhar, A., Payne, S. L., Scoichet, M. S. Harnessing the potential of biomaterials for brain repair after stroke. Frontiers. 5, 14 (2018).
- Nih, L. R., Sideris, E., Carmicahel, S. T., Segura, T. Injection of microporous annealing particle (MAP) hydrogels in the stoke cavity reduces gliosis and inflammation and promotes NPC migration to the lesion. Advance Materials. 29 (32), (2017).
- Nih, L. R., Gojgini, S., Carmichael, S. T., Segura, T. Duel-function injectable angiogenic biomaterial for the repair of brain tissue following stroke. Nature Materials. 17, 642-651 (2018).
- Cook, D. J., et al. Hydrogel-delivered brain-derived neurotrophic factor promotes tissue repair and recovery after stroke. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 37, 1030-1045 (2017).
- Lam, J., Lowry, W. E., Carmichael, S. T., Segura, T. Delivery of iPS-NPCs to the stroke cavity within a hyaluronic acid matrix promotes the differentiation of transplanted cells. Advance Functional Materials. 24, 7053-7062 (2015).
- Nih, L. R., et al. Engineered HA hydrogel for stem cell transplantation in the brain: Biocompatibility data using a design of experiment approach. Data in Brief. 10, 202-209 (2016).
- Carmichael, S. T. The 3 Rs of Stroke Biology: Radial, Relayed, and Regenerative. Neurotherapeutics. 13, 348-359 (2016).
- Caicco, M. J., Cooke, M. J., Wang, Y., Tuladhar, A., Morshead, C. M., Shoichet, M. S. A hydrogel composite system for sustained epi-cortical delivery of Cyclosporin A to the brain for treatment of stroke. Journal of Controlled Release. 166 (3), 197-202 (2013).
- Moshayedi, P., et al. Systematic optimization of an engineered hydrogel allows for selective control of human neural stem cell survival and differentiation after transplantation in the stroke brain. Biomaterials. 105, 145-155 (2016).
- Lu, H., et al. Hemodynamic effects of intraoperative anesthetics administration in photothrombotic stroke model: a study using laser speckle imaging. BMC Neuroscience. 18 (10), (2017).
- Wiersma, A. M., Winship, I. R. Induction of Photothrombotic Stroke in the Sensorimotor Cortex of Rats and Preparation of Tissue for Analysis of Stroke Volume and Topographical Cortical Localization of Ischemic Infarct. Bio-protocol. 8 (10), (2018).
- Liang, H., et al. Region-specific and activity-dependent regulation of SVZ neurogenesis and recovery after stroke. PNAS. 116 (27), 13621-13630 (2019).
- Payne, S. L., Anandakumaran, P. N., Varga, B. V., Morshead, C. M., Nagy, A., Shoichet, M. S. In vitro maturation of human iPSC-derived neuroepithelial cells influences transplant survival in the stroke-injured rat brain. Tissue Engineering Part A. 24, 351-360 (2018).
- Lee, I. H., et al. Delayed epidural transplantation of human induced pluripotent stem cell-derived neural progenitors enhances functional recovery after stroke. Science Reports. 7, 1943 (2017).
- Somaa, F. A., et al. Peptide-based scaffolds support human cortical progenitor graft integration to reduce atrophy and promote functional repair in a model of stroke. Cell Reports. 20, 1964-1977 (2017).
- Griffin, D. R., Weaver, W. M., Scumpia, P., Di Carlo, D., Segura, T. Accelerated wound healing by injectable microporous gel scaffolds assembled from annealed building blocks. Nature Materials. 14 (7), 737-744 (2016).
- Sideris, E. Y., Aaron, C. J., Carmichael, S. T., Segura, T. Hyaluronic acid particle hydrogels decrease cerebral atrophy and promote pro-reparative astrocyte/axonal infiltration in the core after ischemic stroke. bioRxiv. , (2019).
- Yu, H., et al. Combinated Transplantation of Neural Stem Cells and Collagen Type I Promote Functional Recovery After Cerebral Ischemia in Rats. The Anatomical Record. 293 (5), 911-917 (2010).
- Jin, K., et al. Transplantation of Human Neural Precursor Cells in Matrigel Scaffolding Improves Outcome from Focal Cerebral Ischemia after Delayed Postischemic Treatment in Rats. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 30 (3), 534-544 (2009).
- Gelderblom, M., et al. Temporal and spatial dynamics of cerebral immune cell accumulation in stroke. Stroke. 40 (5), 1849-1857 (2009).
- Wei, L., Erinjeri, J. P., Rovainen, C. M., Woolsey, T. A. Collateral growth and angiogenesis around cortical stroke. Stroke. 32 (9), 2179-2184 (2001).
- Zhang, R., et al. Activated Neural Stem Cells Contribute to Stroke-Induced Neurogenesis and Neuroblast Migration toward the Infarct Boundary in Adult Rats. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 24 (4), 441-448 (2004).
