जापानी बेर-प्रकार के संकरों में परागण आवश्यकताओं के निर्धारण के लिए एक पद्धति का वर्णन किया गया है, जो पीसीआर द्वारा एस-जीनोटाइप की पहचान और परागकाइजर के चयन के लिए फूलों की निगरानी के साथ फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी के तहत क्षेत्र और प्रयोगशाला-परागण और पराग ट्यूबों की टिप्पणियों को जोड़ती है।
जापानी बेर की खेती आमतौर पर उगाई जाने वाली अन्य प्रूनस सैलिसिना के साथ मूल प्रूनस सैलिसिना के बीच क्रॉस से प्राप्त इंटरप्रीस हाइब्रिड हैं। अधिकांश संकर गेमटोफाइटिक आत्म-असंगति प्रदर्शित करते हैं, जो एकल और अत्यधिक बहुरूपी एस-लोकस द्वारा नियंत्रित होता है जिसमें कई एलील्स होते हैं। अधिकांश खेती किए गए संकर स्वयं असंगत हैं और अपने फूलों को उपजाऊ बनाने के लिए एक संगत दाता से पराग की आवश्यकता होती है। जापानी बेर में परागण आवश्यकताओं की स्थापना तेजी से अज्ञात परागण आवश्यकताओं के साथ नई खेती की उच्च संख्या के कारण महत्वपूर्ण होता जा रहा है । इस काम में, जापानी बेर-प्रकार के संकर में परागण आवश्यकताओं के निर्धारण के लिए एक पद्धति का वर्णन किया गया है। स्व-(में) अनुकूलता दोनों क्षेत्र और प्रयोगशाला में हाथ से परागण द्वारा निर्धारित की जाती है, जिसके बाद फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी के साथ पराग ट्यूब विस्तार की निगरानी की जाती है, और क्षेत्र में फल परिपक्वता की निगरानी भी की जाती है। परागणक खेती के चयन का आकलन क्षेत्र में फूलों के समय की निगरानी के साथ पीसीआर विश्लेषण द्वारा एस-जीनोटाइप की पहचान को मिलाकर किया जाता है । खेती की परागण आवश्यकताओं को जानने से नए बगीचों के डिजाइन के लिए खेती के चयन की सुविधा होती है और स्थापित बगीचों में परागण की कमी से संबंधित उत्पादकता समस्याओं का शीघ्र पता लगाने की अनुमति देता है ।
जापानी बेर(प्रूनस सालिकिना लिंडल.) चीन1के मूल निवासी है । 19वीं शताब्दी में, इस फसल को जापान से संयुक्त राज्य अमेरिका में पेश किया गया था, जहां इसे अन्य उत्तरी अमेरिकी डिप्लॉयड प्लम2के साथ इंटरक्रॉस किया गया था। 20 वीं शताब्दी में,इनमें से कुछ संकर दुनिया भर के शीतोष्ण क्षेत्रों में फैले हुए थे। आजकल, “जापानी बेर” शब्द मूल पी सेलिकिना के बीच पार से प्राप्त अंतरप्रजातिक संकरों की एक विस्तृत श्रृंखला को संदर्भित करता है, जिसमें 15 अन्य डिप्लॉयड प्रूनस एसपीपी3,4, 5हैं।
रोसासी परिवार की अन्य प्रजातियों की तरह जापानी बेर, गेमोफाइटिक सेल्फ-इनकंकेटिबिलिटी (जीएसआई) को प्रदर्शित करता है, जिसे एकल और अत्यधिक बहुरूपी एस-टिड्डीद्वारा नियंत्रित किया जाता है जिसमें कई एलील्स6होते हैं। एस-लोकसमें दो जीन होते हैं जो पिस्टिल में व्यक्त किए गए एक रिबोन्यूलीज(एस-आरएनएएस)को एन्कोड करते हैं, और पराग कण7में व्यक्त एक एफ-बॉक्स प्रोटीन (एसएफबी)। आत्म-असंगति प्रतिक्रिया में, जब पराग कण (हैप्लॉयड) में व्यक्त एस-एलील पिस्टिल (डिप्लॉयड) में व्यक्त किए गए दो में से एक के समान है, तो शैली में पराग ट्यूब की वृद्धि को एस-आरएनएसई8 की कार्रवाई द्वारा पराग ट्यूब आरएनए के क्षरण के कारण गिरफ्तार कियाजाताहै। चूंकि यह प्रक्रिया ओव्यूल में मादा गेमोफाइट के निषेचन को रोकती है, इसलिए जीएसआई खेती के बीच आउटक्रॉसिंग को बढ़ावा देता है।
हालांकि कुछ जापानी बेर खेती आत्म संगत कर रहे हैं, सबसे खेती वर्तमान में उगाया आत्म असंगत हैं, और अंतर संगत दाताओं से पराग की जरूरत है उनके फूल3निषेचित । पत्थर के फलों मेंबादाम9,खुबानी10, 12और मीठी चेरी13जैसे जीनस प्रूनस की प्रजातियों में, विभिन्न दृष्टिकोणों द्वारा खेती की परागण आवश्यकताओं को स्थापित किया जा सकता है। स्व-(में) अनुकूलता क्षेत्र में फूलों के आत्म-परागण और फल सेट की बाद की निगरानी, या प्रयोगशालामें नियंत्रित स्थितियों पर अर्ध-इन वीवो आत्म-परागण और माइक्रोस्कोप14, 15, 16,17, 18के तहत पराग ट्यूबों के अवलोकन द्वारा निर्धारित किया जा सकता है . खेती के बीच असंगति संबंधों को क्षेत्र में क्रॉस परागण या प्रयोगशाला द्वारा संभावित परागणक खेती के पराग का उपयोग करके और पीसीआरविश्लेषण14, 15, 16, 19,20,21, 22द्वारा प्रत्येक खेती के एस-एलील्सकी पहचान द्वारा निर्धारित किया जा सकताहै। . मीठी चेरी या बादाम जैसी प्रजातियों में, आत्म-अनुकूलता का आकलन स्वयं-अनुकूलता से जुड़े विशेष एस एलील्स की पहचान द्वारा भी किया जा सकता है,जैसे एस4‘ मीठी चेरी13 में या बादाम23में एसएफ ।
मुख्य उत्पादक देशों के कई बेर प्रजनन कार्यक्रम अज्ञात परागण आवश्यकताओं के साथ कई नई खेती2,14,उनमें से कई जारी कर रहे हैं। इस काम में, जापानी बेर-प्रकार के संकर में परागण आवश्यकताओं के निर्धारण के लिए एक पद्धति का वर्णन किया गया है। स्व-(में) अनुकूलता क्षेत्र और प्रयोगशाला दोनों में आत्म-परागण द्वारा निर्धारित की जाती है, जिसके बाद फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी के तहत पराग ट्यूबों की टिप्पणियों का पालन किया जाता है। परागणक खेती का चयन क्षेत्र में फूल समय की निगरानी के साथ पीसीआर विश्लेषण द्वारा एसजीनोटाइप की पहचान को जोड़ती है।
जापानी प्लम खेती की परागण आवश्यकताओं के लिए यहां वर्णित पद्धति के लिए क्षेत्र या प्रयोगशाला में नियंत्रित परागण द्वारा प्रत्येक खेती की आत्म-(में) अनुकूलता का निर्धारण करने की आवश्यकता होती है, और फ्ल…
The authors have nothing to disclose.
इस शोध को इंस्टीट्यूटो नैसिनल डी इन्वेस्टिगासिओन वाई टेक्नोलोगिया आगरािया वाई एलिमेंटेरिया (आरएफपी2015-00015-000-00 और RTA2017-00003-00) द्वारा वित्त पोषित किया गया था; गोबिएर्नो डी अरगोन-यूरोपीय सामाजिक कोष, यूरोपीय संघ (ग्रुपो Consolidado A12-17R), और जंटा डी एक्सट्रेमेमदुरा-फोडो यूरोपो डी डेसारलरो क्षेत्रीय (फेडरर), प्लान रीजनल डी Investigación (IB16181), ग्रुपो डी Investigación (AGA001, GR18196)। बीआई ग्युरेरो को मैक्सीको (कॉनएसवाईटी, 471839) के कोंसेजो नैसिनल डी सिएंसिया वाई टेक्नोलोगिया की फैलोशिप द्वारा समर्थित किया गया था।
Acetic Acid Glacial | Panreac | 131008.1611 | |
Agar | iNtRON Biotechnology | 25999 | |
Aniline blue | Difco | 8504-88 | |
Boric Acid (H3BO4) | Panreac | 131015.1210 | |
Calcium Nitrate 4-hydrate (Ca(NO3)2·4H2O) | Panreac | 131231.1211 | |
Coverglass | Deltalab | D102460 | 24 mm x 60 mm |
Digital Camera | Imaging Developmet Systems | UI-1490SE | |
Digital Camera Software Suite | Imaging Developmet Systems | 4.93.0. | |
DNA Oligos | ThermoFisher Scientific | ||
dNTP Mix, 10 mM each | ThermoSischer Scientific | R0193 | |
DreamTaq Green DNA polymerase | ThermoFisher Scientific | EP0713 | |
Ethanol 96° | VWR-Chemicals | 83804.360 | |
1Kb DNA Ladder (U.S. Patent No. 4.403.036) (500pb-12Kb) | Invitrogen | 15615-016 | Size: 250µg; Conc: 1.0 µg/µl |
Gel Documentation System | Bio-Rad | 1708195 | |
Hand Counter | Tamaco | TM-4 | |
Image Lab Software | Bio-Rad | Image Analyse System for Gel Documentation System | |
MetaPhor Agarose | Lonza | 50180 | |
Microcentrifuge 5415 R | Eppendorf | Z605212 | |
Microscope with UV epiflurescence | Leica | DM2500 | Exciter filter BP340-390, Barrier filter LP425 |
Microslides | Deltalab | D100004 | 26 mm x 76 mm |
Mini Electrophoresis System | Fisherbrand | 14955170 | |
Minicentrifuge | ThermoFisher Scientific | 15334204 | |
NanoDrop 1000 Spectrophotometer | ThermoFisher Scientific | ND1000 | |
Petri Dishes | Deltalab | 200201 | 55 mm x 14 mm |
Potassium Phosphate Tribasic (K3PO4·1.5H2O) | Panreac | 141513 | |
Primer forward 'Pru C2' | ThermoFisher Scientific | ||
Primer forward Pru T2' | ThermoFisher Scientific | ||
Primer reverse 'PCER' | ThermoFisher Scientific | ||
RedSafe Nucleic Acid Staining Solution | iNtRON Biotechnology | 21141 | |
Saccharose | Panreac | 131621.1211 | |
Sodium sulphite anhydrous (Na2SO3) | Panreac | 131717.1211 | |
Speedtools plant DNA extraction Kit | Biotools | 21272 | |
TBE Buffer (10X) | Panreac | A0972,5000PE | |
Thermal Cycler T100 | Bio-Rad | 1861096 | |
Thermomixer comfort | Eppendorf | T1317 | |
Vertical Autoclave Presoclave II | JP Selecta | 4001725 | |
Vortex | Fisherbrand | 11746744 |