Summary

Un kit polyvalent basé sur l’actionnement numérique de gouttelette de microfluidique pour l’éducation scientifique

Published: April 26, 2021
doi:

Summary

Nous décrivons un kit éducatif qui permet aux utilisateurs d’exécuter plusieurs expériences et d’acquérir une expérience pratique sur les microfluidiques numériques.

Abstract

Cet article décrit un kit éducatif basé sur les microfluidiques numériques. Un protocole pour l’expérience de chemiluminescence basée sur le luminol est rapporté comme exemple spécifique. Il a également la capacité d’imagerie fluorescente et l’enceinte humidifiée fermée basée sur un atomiseur ultrasonique pour empêcher l’évaporation. Le kit peut être assemblé dans un court laps de temps et avec une formation minimale en électronique et soudure. La trousse permet aux étudiants de premier cycle et aux cycles supérieurs et aux amateurs d’acquérir une expérience pratique en microfluidique de façon intuitive et d’être formé pour se familiariser avec la microfluidique numérique.

Introduction

La microfluidique est un domaine très interdisciplinaire peignant la physique, la chimie, la biologie et l’ingénierie pour la manipulation d’un petit volume de liquides allant du femtoliter aux microlitres1. La microfluidique est également un domaine très vaste et actif; une recherche sur le Web of Science renvoie près de 20 000 publications et pourtant il n’y a pas suffisamment de documentation et d’articles d’examen sur l’utilisation des microfluidiques comme outiléducatif 2. Il y a deux articles de revue perspicaces, quoique dépassés par Legge et Fintschenko3,4. Legge présente aux éducateurs l’idée d’un laboratoire sur une puce3. Fintschenko a souligné le rôle du laboratoire d’enseignement des microfluidiques dans l’enseignement des mathématiques en génie technologique des sciences (STEM) et a simplifié les philosophies en « enseigner la microfluidique » et « utiliser les microfluidiques »4. Un examen plus récent de Rackus, Ridel-Kruse et Pamme en 2019 souligne qu’en plus d’être de nature interdisciplinaire, la microfluidique est aussi un sujet très pratique2. L’activité pratique liée à la pratique de la microfluidique prête aux élèves à l’apprentissage axé sur la recherche et en fait un outil attrayant pour la communication scientifique et la sensibilisation. La microfluidique offre en effet beaucoup de potentiel pour l’enseignement des sciences dans les milieux formels et informels et est également un « outil » idéal pour enthousiasmer et éduquer le grand public sur l’aspect interdisciplinaire des sciences modernes.

Des exemples tels que les microcanaux à faible coût, les microfluidiques papier et les microfluidiques numériques sont des outils idéaux à des fins éducatives. Parmi ces plateformes, la microfluidique numérique reste ésotérique et les rapports évalués par des pairs basés sur les microfluidiques numériques fontdéfaut 2. Nous proposons ici d’utiliser la microfluidique numérique comme outil éducatif pour plusieurs raisons. Tout d’abord, la microfluidique numérique est très distincte du paradigme à base de microcanal parce qu’elle est basée sur la manipulation des gouttelettes et l’utilisation des gouttelettes comme microvéssels discrets. Deuxièmement, les gouttelettes sont manipulées sur des plateformes d’électrode-réseau relativement génériques afin que les microfluidiques numériques puissent être intimement couplés à la microélectronique. Les utilisateurs peuvent tirer parti d’un ensemble étendu de composants électroniques, désormais très accessibles aux applications de faire soi-même pour interagir électroniquement avec des gouttelettes. Par conséquent, nous soutenons que les microfluidiques numériques peuvent laisser les étudiants faire l’expérience de ces aspects uniques et être ouverts d’esprit et ne pas trop s’en tenir à microcanal à faible nombre reynold microfluidique1.

En bref, le domaine de la microfluidique numérique est largement basé sur les phénomènes d’électrowetting, qui a d’abord été décrit par Gabriel Lippmann5,6. Les développements récents ont été initiés par Berge au début des années 19907. Sa contribution clé est l’idée d’introduire un isolant mince pour séparer le liquide conductrice des électrodes métalliques afin d’éliminer le problème de l’électrolyse. Cette idée a été appelé électrowetting sur diélectrique (EWOD). Par la suite, la microfluidique numérique a été popularisée par plusieurs chercheurspionniers 8,9. Maintenant, une liste complète des applications par exemple, dans le diagnostic clinique, la chimie et la biologie, a été prouvée sur les microfluidiquesnumériques 10,11,12 et, par conséquent, beaucoup d’exemples sont disponibles pour un cadre éducatif. En particulier, sur la ligne des microfluidiques numériques à faible coût et à faire soi-même, Abdelgawad et Wheeler ont déjà signalé un prototypage rapide et peu coûteux des microfluidiquesnumériques 13,14. Fobel et coll., a également signalé DropBot comme un système de contrôle microfluidique numérique open source15. Yafia et coll., ont également signalé une microfluidique numérique portative basée sur des pièces imprimées 3D et un téléphone plus petit16. Alistar et Gaudenz ont également développé la plate-forme OpenDrop alimentée par batterie, qui est basée sur le tableau transistor effet de champ et dcactionnement 17.

Ici, nous présentons un kit éducatif microfluidique numérique basé sur un circuit imprimé commercial (PCB) qui permet à l’utilisateur de se réunir et d’obtenir une expérience pratique avec les microfluidiques numériques (Figure 1). Fee-for-service pour créer pcb à partir de fichiers de conception numérique est largement disponible, et donc nous pensons qu’il s’agit d’une solution viable à faible coût pour l’éducation à condition que les fichiers de conception numérique peuvent être partagés. Le choix méticuleux des composants et de la conception du système est fait pour simplifier le processus d’assemblage et faire une interface avec l’intuitif de l’utilisateur. Par conséquent, une configuration d’une plaque est utilisée au lieu d’une configuration à deux plaques pour éviter la nécessité d’une plaque supérieure. Les composants et les produits chimiques d’essai doivent être facilement disponibles. Par exemple, l’emballage des aliments du supermarché est utilisé comme isolant dans notre trousse.

Pour prouver la faisabilité de notre kit, nous proposons une expérience de chimie spécifique basée sur la chimioluminescence du luminol et fournissons le protocole. L’espoir est que l’observation visuelle de la chimioluminescence puisse enthousiasmer et exciter les élèves. Luminol est un produit chimique qui montre une lueur bleue lorsqu’il est mélangé avec un agent oxydant comme H2O2 et est généralement utilisé en médecine légale pour détecter le sang18. Dans notre laboratoire, le ferricyanure de potassium sert de catalyseur. Luminol réagit avec l’ion hydroxyde et forme un dianion. Le dianion réagit plus tard avec l’oxygène du peroxyde d’hydrogène pour former l’acide 5-aminophtalic avec des électrons dans un état excité, et la relaxation des électrons de l’état excité à l’état de sol a comme conséquence des photons visibles comme éclat de lumière bleue.

Nous rapportons également une expérience d’imagerie fluorescente avec un téléphone intelligent pour démontrer l’intégration d’une diode électroluminescente (LED) comme source de lumière d’excitation. Enfin, l’évaporation des gouttelettes est un problème en microfluidique, mais elle est rarement abordée. (Une gouttelette d’eau de 1 μL est perdue à moins de 1 h à partir d’un substratouvert 3.) Nous utilisons un atomiseur à base d’un transducteur piezo à haute fréquence pour convertir l’eau en brume fine. Ceci crée un environnement humidifié pour empêcher l’évaporation de gouttelette et démontre l’actionnement à long terme (~1 h) de gouttelette.

Figure 1
Figure 1: Schémas d’EWOD mis en place. (a) Un microcontrôleur est utilisé pour fournir une séquence de contrôle à l’électrode EWOD. En outre, l’humidité est contrôlée. b) Schémas de mise en page PCB. Les électrodes, la LED pour l’imagerie fluorescente, la résistance et les transistors d’effet de champ (FET) sont étiquetées. Une barre d’échelle de 1 cm est également indiquée. S’il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.

Figure 2
Figure 2: Vue supérieure du kit. La planche de microcontrôleur, le tableau d’alimentation à haute tension, le BPC EWOD, le capteur d’humidité et l’atomiseur sont étiquetés. S’il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.

Protocol

1) Assemblage du kit microfluidique numérique Soudeur les résistances de montage de surface, transistors, et diodes électroluminescentes sur le tableau de PCB selon les schémas dans la figure 1b. Connectez la sortie de la planche d’alimentation à haute tension à la carte PCB avec des composantssoudés (figure 2 et figure supplémentaire 1). Connectez la batterie à la planche d’appoint de tension pour augm…

Representative Results

L’actionnement gouttelette est enregistré avec un téléphone intelligent. Les résultats représentatifs de la chimioluminescence et de l’imagerie fluorescente sont affichés à la figure 3 et à la figure 4. Pour l’expérience de chimioluminescence, la gouttelette de ferricyanure de 10 μL est actionnée pour se déplacer et se mélanger avec une gouttelette pré-déposée de 2 μL sur l’électrode cible, comme le mont…

Discussion

La procédure décrite ici permet au lecteur d’assembler et de tester un système EWOD de travail pour l’actionnement des gouttelettes et d’acquérir une expérience pratique avec les microfluidiques. Nous évitons intentionnellement les composants coûteux et les échantillons chimiques. Actuellement, un kit peut être construit pour ~$130 avec le composant le plus cher étant le verre optique de couleur pour l’imagerie fluorescente et le microcontrôleur excluant l’enceinte acrylique faite sur commande<strong…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Y. T. Y. tiens à souligner le soutien financier du ministère des Sciences et de la Technologie en vertu des numéros de subvention MOST 107-2621-M-007-001-MY3 et national Tsing Hua University sous le numéro de subvention 109Q2702E1. Mark Kurban du Groupe Edanz (https://en-author-services.edanzgroup.com/ac) a édité une ébauche de ce manuscrit.

Materials

Acrylic enclosure LOCAL vendor 23cm x 20.5 cm x 6cm
Ardunion Uno Arduino UNO microcontroller board
acetic acid Sigma Alrich 695092-100ML
Breadboard MCIGICM 400tie 4 cm x 7 cm, 400 Points Solderless Breadboard, a pack of 4
BSP89 H6327 Infineon MOSFET  Mouser 726-BSP89H6327 drain soure breakdown voltage 240V,on resistance 4.2 ohm
citrid acid sigma Alrich 251275-100G
Color glass filter  Thorlabs FGL 530 color glass filter for fluorescent imaging
DHT11 temperature & humidity sensor adafruit
Digital multimeter  Fluke 17B
Fluorescein isothiocyanate isomer I sigma Alrich F7250-50MG 50 mg price, fluorescent imaging
Glycerol Sigma Alrich G9012-500ML
High voltage power supply for Nixe tube Vaorwne NCH6100HV High voltage power max dc 235V
LM2596 voltage booster circuit boost voltage from 5V to 12 V
Luminol Sigma Alrich 123072-5G 5 g for $110
Pippet Thermal Fisher 1- 10 ul
Printed circuit board  Local vender 10 piece for $60
Plastic food wrap Kirkland Stretch-tite  food wrap Plastic food wrap
Potassium ferricynide Merck 104982 1 kg
1N Potassium hydroxide solution (1 mol/l)  Scharlau  1 Liter
Clear Office tape 3mm 3M Scotch semi-transparent, used as diffuser for illumination
salt Great Value Iodized Salt 6 oz for $7 salt from supermarket
Silicone oil (5Cst) Sigma Alrich 317667-250ML top hydrophobic layer & filling layer between electrode and insulator
sucrose table sugar  from any supermarket, 6 dollar per pound
Surface mount blue LED oznium 3528 Oznium 20 Pieces of PLCC-2 Surface Mount LEDs, 3528 Size SMD SMT LED – Blue
Surface mount resistor 180k Ohm Balance World Inc 3mm x 6 mm 1watt
Surface mount resistor 510Ohm Balance World Inc bias resistor for LED, 3mmx6mm 1watt
Water atomizer Grove  operating frequency 100 kHz  supply votage 5V max 2W  The kit comes with ultrasonic transducer
high voltage transistor

References

  1. Convery, N., Gadegaard, N. 30 years of microfluidics. Micro and Nano Engineering. 2, 76-91 (2019).
  2. Rackus, D. G., Ridel-Kruse, I. H., Pamme, N. Learning on a chip: Microfluidics for formal and informal science education. Biomicrofluidics. 13, 041501 (2019).
  3. Legge, C. H. Chemistry under the microscope-Lab on a chip technologies. Journal of Chemical Education. 79, 173 (2002).
  4. Fintschenko, Y. Education: a modular approach to microfluidics in the teaching laboratory. Lab On A Chip. 11, 3394 (2011).
  5. Mugele, F., Baret, J. -. C. Electrowetting: from basics to applications. Journal of Physics: Condensed Matter. 17, 705-774 (2005).
  6. Lippmann, G. Relations entre les phenomenes electriques et capillary. Ann. Chim. Phys. 6, 494 (1875).
  7. Berge, B. Electrocapillarite et mouillge de films isolant par l’eau. C. R. Acad. Sci. II. 317, 157 (1993).
  8. Pollack, M. G., Fair, R. B., Shenderov, A. D. Electrowetting-based actuation of liquid droplets for microfluidics applications. Applied Physics Letters. 77, 1725 (2000).
  9. Lee, J., Kim, C. J. Surface-tension-driven microactuation based on continuous electrowetting. Journal of Microelectromechanical Systems. 9 (2), 171 (2000).
  10. Choi, K., Ng, A. H. C., Fobel, R., Wheeler, A. R. Digital Microfluidics. Annual Review of Analalytical Chemistry. 5, 413-440 (2012).
  11. Jebrail, M. J., Wheeler, A. R. Let’s get digital: digitizing chemical biology with microfluidics. Current Opinion in Chemical Biology. 14, 574-581 (2000).
  12. Pollack, M. G., Pamula, V. K., Srinivasan, V., Eckhardt, A. E. 2011. Applications of electrowetting-based digital microfluidics in clinical diagnostics. Expert Review of Molecular Diagnostics. 11, 393-407 (2011).
  13. Abdelgawad, M., Wheeler, A. R. Rapid prototyping in copper substrates for digital microfluidics. Advanced Materials. 19 (1), 133-137 (2007).
  14. Abdelgawad, M., Wheeler, A. R. Low-cost, rapid-prototyping of digital microfluidics devices. Microfluidics and Nanofluidics. 4, 349-355 (2008).
  15. Fobel, R., Fobel, C., Wheeler, A. R. DropBot: an open-source digital microfluidic control system with precise control of electrostatic driving force and instantaneous drop velocity measurement. Applied Physics Letters. 102, 193513 (2013).
  16. Yafia, M., Ahmadi, A., Hoorfar, M., Najjaran, H. Ultra-portable smartphone controlled integrated digital microfluidic system in a 3D-printed modular assembly. Micromachines. 6 (9), 1289-1305 (2015).
  17. Alistar, M., Gaudenz, U. OpenDrop: an integrated do-it-yourself platform for personal use of biochips. Bio-ingénierie. 4 (2), 45 (2017).
  18. Khan, P., et al. Luminol-based chemiluminescent signals: clinical and non-clinical application and future uses. Applied Biochemistry and Biotechnology. 173 (2), 333-355 (2014).
  19. Agresti, J. J., et al. Ultrahigh-throughput screening in drop-based microfluidics for directed evolution. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (9), 4004-4009 (2010).
  20. . Microfluidics Available from: https://microfluidics.utoronto.ca/dropbot/ (2020)
  21. Busnel, J. M., et al. Evaluation of capillary isoelectric focusing in glycerol-water media with a view to hydrophobic protein applications. Electrophoresis. 26, 3369-3379 (2005).
  22. Chatterjee, D., Shepherd, H., Garrell, R. L. Electromechanical model for actuating liquids in a two plate droplet microfluidic device. Lab On A Chip. 9, 1219-1229 (2009).
check_url/fr/61978?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Guo, Y., Lee, C., Yang, Y. A Versatile Kit Based on Digital Microfluidics Droplet Actuation for Science Education. J. Vis. Exp. (170), e61978, doi:10.3791/61978 (2021).

View Video