Techniques de manipulation pour réduire le stress chez la souris

Résumé

Cet article décrit une technique de manipulation chez la souris, la technique de manipulation 3D, qui facilite la manipulation de routine en réduisant les comportements anxieux et présente des détails sur deux techniques connexes existantes (manipulation en tunnel et en queue).

Résumé

Les animaux de laboratoire sont soumis à de multiples manipulations par des scientifiques ou des fournisseurs de soins aux animaux. Le stress que cela provoque peut avoir des effets profonds sur le bien-être des animaux et peut également être un facteur de confusion pour des variables expérimentales telles que les mesures de l’anxiété. Au fil des ans, des techniques de manipulation qui minimisent le stress lié à la manipulation ont été développées en mettant l’accent sur les rats et en prêtant peu d’attention aux souris. Cependant, il a été démontré que les souris peuvent être habituées à des manipulations à l’aide de techniques de manipulation. Habituer les souris à la manipulation réduit le stress, facilite la manipulation de routine, améliore le bien-être des animaux, diminue la variabilité des données et améliore la fiabilité expérimentale. Malgré les effets bénéfiques de la manipulation, l’approche tail-pick-up, particulièrement stressante, est encore largement utilisée. Cet article fournit une description détaillée et une démonstration d’une nouvelle technique de manipulation de la souris destinée à minimiser le stress subi par l’animal lors de l’interaction humaine. Cette technique manuelle est réalisée sur 3 jours (technique de manipulation 3D) et se concentre sur la capacité de l’animal à s’habituer à l’expérimentateur. Cette étude montre également l’effet des techniques de manutention des tunnels précédemment établies (à l’aide d’un tunnel en polycarbonate) et de la technique de ramassage de la queue. Leurs effets sur les comportements anxieux sont spécifiquement étudiés, en utilisant des tests comportementaux (Elevated-Plus Maze et Novelty Suppressed Feeding), l’interaction volontaire avec les expérimentateurs et la mesure physiologique (niveaux de corticostérone). La technique de manipulation 3D et la technique de manipulation en tunnel ont réduit les phénotypes anxieux. Dans la première expérience, utilisant des souris mâles âgées de 6 mois, la technique de manipulation 3D a considérablement amélioré l’interaction avec l’expérimentateur. Dans la deuxième expérience, en utilisant une femme de 2,5 mois, il a réduit les niveaux de corticostérone. En tant que tel, la manipulation 3D est une approche utile dans les scénarios où l’interaction avec l’expérimentateur est requise ou préférée, ou où la manipulation de tunnel peut ne pas être possible pendant l’expérience.

Introduction

Les souris et les rats sont des atouts essentiels aux études précliniques^1,2 à des fins multiples, y compris les études endocriminales, physiologiques, pharmacologiques ou comportementales^2. Du nombre croissant d’études impliquant des animaux, il est apparu que des variables environnementales incontrôlées, y compris l’interaction humaine, influencent divers résultats dans la recherche biomédicale^3,4,5. Ceci est responsable de la variabilité significative observée entre les expériences et les la....

Protocole

Les procédures impliquant des sujets animaux ont été approuvées par le comité des soins aux animaux de CAMH et menées conformément aux lignes directrices du Conseil canadien sur les soins aux animaux.

REMARQUE: La méthode de manipulation décrite ici peut être utilisée dans diverses souches de souris, y compris les lignées non transgéniques (C57/BL6, BalbC, CD1, SV129, etc.) et transgéniques. Il peut également être utilisé avec des souris jeunes ou âgées, notant que les jeunes adultes (4-6 semaines) ont tendance à être légèrement plus actives que les souris adultes ou âgées, en particulier le jour 1.

1. Préparation ....

Résultats

Deux études distinctes ont été réalisées avec des souris C57BL/6. Les #1 de l’étude incluaient des mâles de 6 mois et l’étude #2 incluait des femelles de 2,5 mois (N = 36 / étude) de Jackson Laboratories (Cat #000664). Les souris sont arrivées dans l’établissement à l’âge de 2 mois. Alors que l’étude #2 les femmes ont été manipulées et testées deux semaines après leur arrivée, l’étude #1 les hommes n’ont été manipulés et testés qu’à l’âge de 6 mois (retard dû à l’arrêt de la pandémie mondiale). Pendant ce temps, une sour.......

Discussion

Cette étude et le développement de méthodes sont basés sur l’observation que les techniques de manipulation chez la souris sont encore négligées par la communauté scientifique, et que certains laboratoires sont encore réticents à mettre en œuvre des techniques d’accoutumant ou de manipulation pour réduire le stress et la réactivité de leurs animaux avant les expériences. Tout en représentant un engagement de temps, la manipulation des animaux fournit des effets bénéfiques aux animaux qui peuvent contribuer au succès des .......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
23 g x 1 po Aiguille hypodermique stérile BD PrecisionGlide à usage général. Type de paroi régulière et biseau régulier.	BD	2546-CABD305145	Aiguilles pour prélèvement sanguin
BD Vacutainer® ; Tubes EDTA de prélèvement de sang veineux avec lavande BD Hemogard&trade ; bouchon, 2,0 ml (13x75mm), 100/pqt	BD	367841	EDTA Tubes revêtus pour le prélèvement sanguin
Lit o épis ¼ ; ” Litière pour animaux de laboratoire	Bed-O-Cobs	BEDO1/4	Nouvelle litière pour l’alimentation supprimée
Centrifugeuse	Eppendorf	Centrifuge 5424 R	Pour la centrifugation du sang.
Corticostérone Kit ELISA	Arbres Dosages	K003-H1W
Appareil photo numérique	Panasonic	HC-V770	Appareil photo pour enregistrer les interactions EPM/Expérimentateur
Elevated Plus Maze	Home Made	n/a	Labyrinthe personnalisé composé de quatre bras en plexiglas noir (deux bras ouverts (29 cm de long sur 7 cm de large) et deux bras fermés (29 cm de long x 7 cm de large avec des murs de 16 cm de haut)) qui forment une forme en croix avec les deux bras ouverts opposés l’un à l’autre maintenu à 55 cm au-dessus du sol
Éthanol	Medstore Maison Marque	39753-P016-EA95	Diluer à 70 % avec de l’eau distillée, pour le nettoyage
Ethovision XT 15	Noldus	n/a	Logiciel automatisé de suivi des animaux
Laboratoire Rongeurs Diet	LabDiet	Rongeurs Diet 5001	Régime standard pour rongeurs
Carte mémoire	Kingstone Technology	SDA3/64GB	Pour l’enregistrement vidéo et transfert de fichiers
Nouveauté Chambre d’alimentation supprimée	Fait maison n	/a	Chambre d’essai en plexiglas d’essai sur mesure avec sols et murs transparents de 62 cm de long, 31 cm de large sur 40 cm de haut.
Tubes en parlycarbonate	Fait maison	n/a	13 cm de longueur et 5cm de diamètre
Purina Yesterday' s news literie de journaux recyclés	Purina	n/a	Standard
Bedding Spectrophotomètre	Biotek	Epoch Microplate Reader

en épis de maïs