Забор подкожной жировой клетчатки человека с использованием техники мини-липосакции
Summary
Рукопись и связанное с ней видео демонстрируют технику чрескожной биопсии для получения образцов подкожной жировой клетчатки из областей, окружающих пупок. Этот метод является низкорисковым и эффективным способом исследования ряда параметров (например, экспрессии генов или белка, активности ферментов, содержания липидов) в жировой ткани.
Abstract
Исследования жировой ткани полезны для понимания метаболических и других состояний. Подкожная жировая клетчатка человека доступна. При соответствующей подготовке и строгом соблюдении асептической техники подкожные жировые образцы могут быть безопасно и эффективно получены исследователями в неклинических условиях. После введения местного анестетика латерально к пупку, игла 14 г, прикрепленная к шприцу объемом 5 или 10 мл, вводится через кожу в подкожную клетчатку. Под всасыванием шприц перемещается поршневым, режущим движением для выделения фрагментов жировой ткани. Снятия поршня достаточно для того, чтобы фрагменты жировой ткани аспирировались через иглу в шприц. Одна биопсия может собрать около 200 мг ткани. Этот метод биопсии очень безопасен как для участников, так и для исследовательского персонала. После биопсии участники могут возобновить большинство повседневных действий, хотя им следует избегать плавания и чрезмерно напряженной деятельности в течение 48 часов, чтобы избежать чрезмерного кровотечения. Участники могут безопасно пройти 2 биопсии в течение одного дня, что означает, что метод может быть применен в исследованиях до-после острого вмешательства.
Introduction
Жировая ткань может предоставить полезную информацию о метаболической функции человека. Подкожная жировая клетчатка человека легко доступна. Методика экстракции подкожной жировойклетчатки была впервые описана в середине 80-х годов 1; с тех пор первоначальный протокол был улучшен для повышения урожайности и улучшения переносимости участников исследования. Подкожная жировая клетчатка может быть получена из многочисленных участков, чаще всего из ягодиц1 и брюшной области2. Образцы из последних могут быть более желательными, поскольку они предоставляют более ценную информацию в контекстах, связанных с метаболическими заболеваниями3.
Биопсия подкожной жировой клетчатки методом мини-липосакции может быть безопасно и эффективно выполнена в неклинических условиях. После соответствующей подготовки сертифицированного врача и использования строгой асептической техники исследователи могут регулярно выполнять эти биопсии с минимальным риском как для участников, так и для исследователей. Команда биопсии должна состоять как минимум из 2 человек: человека, который будет выполнять биопсию, и помощника.
Лицу, ответственному за биопсию, поручено подтвердить личность участника, проверить, может ли участник безопасно пройти процедуру (см. этапы протокола 2.1-2.4 ниже), обеспечить комфорт участника на протяжении всей процедуры, обеспечить стерильную технику на протяжении всей процедуры, провести процедуру и предоставить участнику устные и письменные процедуры последующего ухода. Роль помощника заключается в обработке и быстрой обработке полученной жировой ткани для последующего анализа и / или хранения. Помощник также помогает, будучи «нестерильными руками» и гарантируя, что участник чувствует себя непринужденно на протяжении всей процедуры. Целью данного видео и статьи является описание пошаговой процедуры биопсии для безопасного получения подкожной жировой клетчатки из области живота.
Protocol
Representative Results
Discussion
Описанный протокол и связанное с ним видео предоставляют пошаговый обзор метода мини-липосакции для получения образцов подкожной жировой клетчатки из брюшной области. Эта исследовательская группа выполнила в общей сложности 124 биопсии в течение 19 месяцев без каких-либо побочных эффе?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
У авторов нет финансирования для декларирования.
Materials
| Item: 14 G needle 14 G x 3 1/8" 210 mm x 80 mm |
B Braun | 4665473 | Per biopsy: 1 |
| Item: 21 G needle 21 G x 1 1/2" 0.8 mm x 38 mm |
Terumo | AN*2138R1 | Per biopsy: 2 |
| Item: 26 G needle 26 G x 1/2" microlance needle 0.45 mm x 13 mm |
BD | 303800 | Per biopsy: 2 |
| Item: 5 mL syringe 5 mL luer |
DB plastipak | 302187 | Per biopsy: 2 |
| Item: Adhesive wound dressing Opsite Post-Op Dressing 9.5 x 8.5 |
Smith & Nephew | 6600709 | Per biopsy: 1 |
| Item: Disposable sterile scalpel Disposable Scalpel Sterile Blade no. 10 |
Swann Morton | /0501 | Per biopsy: 1 |
| Item: Icepack BlueDot Reusable Hot/Cold Pack 26.5 cm x 13.0 cm |
NuCare | F711 | Per biopsy: 1 |
| Item: Iodine based antiseptic Videne antiseptic solution |
Ecolab Videne | 3030440 | Per biopsy: q.s |
| Item: Lidocaine 2% w/o epinephrine Lidocaine 2% injection 5 mL |
B Braun | 3558553 | Per biopsy: 5 mL |
| Item: Non-sterile gloves Starguard sensitive powder free nitrile gloves |
Starguard | SG-N-S | Per biopsy: pair |
| Item: Sodium chloride 0.9% Sodium chlride 0.9% w/v intravenous infusion BP |
BBraun | S8004-5384 | Per biopsy: q.s. |
| Item: Stabilization solution* RNAlater Stabilization Solution |
ThermoFisher Scientific | AM7020 | Per biopsy: q.s |
| Item: Sterile forceps Sterile forceps |
Rocialle | RML109-006 | Per biopsy: 1 |
| Item: Sterile gauze swabs Non woven swabs sterile 7.5 x 7.5 cm |
Prestige | 1860 | Per biopsy: 5 |
| Item: Sterile gloves Prestige soft vinyl sterile powder free medical gloves |
Prestige | S: P4301 M:P3302 L:P3301 |
Per biopsy: pair |
| Item: Sterile Microcentrifuge tubes 1.5 mL Sterile Microcentrifuge Tubes |
StarLab | I1415-5510 | Per biopsy: q.s |
| Item: Sterile sheet Paper plain white 90 x 90 cm |
Rocialle | RML 126-216 | Per biopsy: 1 |
| Item: Weighing boat Diamond shape weigh boats |
Heathrow Scientific | HS1427C | Per biopsy: 1 |
| * denotes optional materials |
References
- Beynen, A. C., Katan, M. B. Rapid sampling and long-term storage of subcutaneous adipose-tissue biopsies for determination of fatty acid composition. American Journal of Clinical Nutrition. 42 (2), 317-322 (1985).
- Moran, C. N., et al. Effects of diabetes family history and exercise training on the expression of adiponectin and leptin and their receptors. Metabolism. 60 (2), 206-214 (2011).
- Jialal, I., Devaraj, S. Subcutaneous adipose tissue biology in metabolic syndrome. Hormone Molecular Biology and Clinical Investigation. 33 (1), (2018).
- WHO Guidelines on hand hygiene in health care: a summary. World Health Organization Available from: https://www.who.int/gpsc/5may/tools/who_guidelines-handhygiene_summary.pdf (2009)
- Kettwich, L. G., et al. New device technologies for subcutaneous fat biopsy. Amyloid. 19 (2), 66-73 (2012).
- Preston, R. M. Aseptic technique: evidence-based approach for patient safety. British Journal of Nursing. 14 (10), 540-546 (2005).
- Handiyani, H., Meily Kurniawidjaja, L., Irawaty, D., Damayanti, R. The effective needle stick injury prevention strategies for nursing students in the clinical settings: a literature review. Enfermeria Clinica. 28, 167-171 (2018).
- Raggio, B. S., Barton, B. M., Kandil, E., Friedlander, P. L. Association of continued preoperative aspirin use and bleeding complications in patients undergoing thyroid surgery. JAMA Otolaryngology-Head & Neck Surgery. 144, 335 (2018).
- Cartwright, I. J., Pockley, A. G., Galloway, J. H., Greaves, M., Preston, F. E. The effects of dietary omega-3 polyunsaturated fatty acids on erythrocyte membrane phospholipids, erythrocyte deformability and blood viscosity in healthy volunteers. Atherosclerosis. 55 (3), 267-281 (1985).
- Hemmrich, K., Denecke, B., Paul, N. E., Hoffmeister, D., Pallua, N. RNA isolation from adipose tissue: an optimized procedure for high RNA yield and integrity. Laboratory Medicine. 41 (2), 104-106 (2010).
- Chachopoulos, V., et al. A technique for subcutaneous abdominal adipose tissue biopsy via a non-diathermy method. Journal of Visual Experiments: JoVE. (127), e55593 (2017).
- Civelek, M., et al. Genetic regulation of human adipose microRNA expression and its consequences for metabolic traits. Human Molecular Genetics. 22 (15), 3023-3037 (2013).
- Chen, Y. C., et al. Feeding influences adipose tissue responses to exercise in overweight men. American Journal of Physiology Endocrinology and Metabolism. 313 (1), 84-93 (2017).
- Mendham, A. E., et al. Exercise training results in depot-specific adaptations to adipose tissue mitochondrial function. Scientific Reports. 10 (1), 3785 (2020).
- Carswell, K. A., Lee, M. J., Fried, S. K. Culture of isolated human adipocytes and isolated adipose tissue. Methods in Molecular Biology. 806, 203-214 (2012).
- Arner, P., Andersson, D. P., Backdahl, J., Dahlman, I., Ryden, M. Weight gain and impaired glucose metabolism in women are predicted by inefficient subcutaneous fat cell lipolysis. Cell Metabolism. 28 (1), 45-54 (2018).
- Mutter, G., et al. Comparison of frozen and RNALater solid tissue storage methods for use in RNA expression microarrays. BMC genomics. 5, 88 (2004).
- Coleman, S. Structural fat grafting: more than a permanent filler. Plastic and Reconstructive Surgery. 118, 108-120 (2018).
