Denne publikation beskriver designet af laboratoriefotobioreaktorer (PBR’er) med tilpassede lysregimer. Væksten af cyanobakterier eller mikroalger, der bruger bicarbonat som deres kulstofkilde, overvåges kontinuerligt ved at måle volumetrisk iltproduktion. Disse PBR’er letter hurtige, replikerede laboratorievækstsammenligninger med lidt brugerintervention under eksperimenter.
Laboratorieundersøgelsen af mikroalger kan være eksperimentelt udfordrende. Ud over dyrkningskravene til ikke-fotosyntetiske mikroorganismer kræver fototrofer også belysning. Rutinemæssigt søger forskere at levere brugerdefinerede lysforsyninger, dvs. variere lysintensiteten og tiden, hvormed den leveres. En sådan fleksibilitet er vanskelig med standard bordlamper. Normalt kræver dyrkningsundersøgelser også vækstsammenligninger mellem eksperimentelle behandlinger. Ofte vurderes væksten over en længere varighed, f.eks. flere gange om dagen i løbet af en uges prøveperiode. Manuelle målinger kan være tidskrævende og mangle dataopløsning. Derfor er fotobioreaktorer (PBR’er) med automatisk vækstovervågning og tilpasselig lysforsyning nyttige til replikerede eksperimenter med flere behandlinger. Det nuværende arbejde præsenterer design, konstruktion og drift af laboratorie PBR’er. Materialerne er let fremskaffede og relativt billige. Designet kunne duplikeres med moderat dygtighed. Hver struktur har et fodaftryk på ~ 40 cm2 og er vært for tre 1 L glasflasker til tredobbelt replikation. Flasker hviler på platforme, der indeholder magnetiske omrørere og er anbragt lodret inden for et 1 m højt og 15 cm diameter polyvinylchlorid (PVC) rør. Rørinteriøret er foret med lysemitterende dioder (lysdioder). Disse lysdioder producerer kontinuerlige lysintensiteter fra 0-2400 μmol fotoner m-2 s-1 af fotosyntetisk aktiv stråling (PAR). Brugere designer et brugerdefineret belysningsprogram. Lysintensiteten kan justeres hvert sekund eller holdes konstant i længere tid. Oxygen produceret fra fotosyntese forlader hver flaske via en envejs volumetrisk gassensor. Software bruges til at registrere gassensordata. Mængden af produceret ilt kan korreleres med biomassevækst. Hvis der kræves biomasseprøver, kan en sprøjte bruges til at ekstrahere kultur. Metoden er velegnet til mikroalger dyrket med bicarbonat som kulstofkilde. Disse PBR’er er værdifulde for et laboratorium, der kræver replikerede eksperimenter, let regimefleksibilitet og kontinuerlige vækstdata i høj opløsning.
Mikroalger og cyanobakterier, samlet kaldet mikroalger for enkelhed, er forkæmper for deres potentiale inden for bæredygtig bioteknologi. De er attraktive kandidater på grund af deres hurtige vækst, evne til at blive dyrket på ikke-agerjord og for deres brug af sollys til at drive omdannelsen af kuldioxid til biomasse 1,2,3. Mikroalgebiomasse kan omdannes til produkter som bioenergi i form af olie eller gas, fødevarefarvestoffer og kosttilskud og materialer som biopolymerer 1,4,5,6,7. Derudover kan de bruges til at behandle spildevand eller afhjælpe vandområder ved at forbruge overskydende næringsstoffer 8,9. I betragtning af dette er mikroalgeforskning udbredt og etableret. Feltet vokser, efterhånden som samfundet genovervejer kulstofintensiteten og den miljømæssige bæredygtighed af de nuværende fremstillings- og energiproduktionsmetoder.
Tre grundlæggende krav til laboratoriebaserede mikroalgeundersøgelser er en kulturbeholder, lyskilde og metode til kvantificering af vækst. Udtrykket fotobioreaktor (PBR) beskriver en opsætning, hvor kulturkar er belyst10. Almindeligvis sigter undersøgelser af mikroalger mod at sammenligne vækst mellem to eller flere behandlinger, fx forskellige vækstmedier, lysregimer eller arter 11,12,13. Af hensyn til statistisk relevans bør hver tilstand, f.eks. behandling og kontrol, replikeres. Hvis kontrol og behandling gennemføres samtidigt, betyder det, at mange PBR-stoffer skal overvåges og udtages i løbet af et forsøg. Udfordringen med at betjene flere PBR’er er todelt. For det første er det vigtigt for reproducerbarheden at levere en ensartet lysintensitet til hver PBR, men det kan være vanskeligt. Mængden af lysindfald på fartøjets overflade påvirkes af dens afstand fra lyskilden, skygge fra tilstødende fartøjer og baggrundslysudsving14. For det andet skal der vælges en metode til nøjagtig kvantificering af væksten.
Vækst måles almindeligvis ved celletal, optisk densitet (OD), klorofyl A-indhold, tørvægt (DW) densitet og askefri tørvægt (AFDW) densitet15. Celletællinger, klorofyl A-indhold og gravimetriske metoder er manuelle processer, der producerer diskrete datapunkter. OD kan måles kontinuerligt og ikke-invasivt med et spektrofotometer, forudsat at det er godt kalibreret mod en anden metode såsom AFDW-densitet15. OD-målinger og klorofyl A-indhold kan dog være upålidelige, da resultaterne varierer under forskellige dyrkningsforhold, f.eks. mellem arter og gennem hele vækstcyklussen 15,16. For klorofyl A kan ekstraktionsmetoden også påvirke pigmentudbyttet17. Klorofyl A-indhold er særligt nyttigt til sporing af væksten af mikroalger inden for mikrobielle samfund, som også indeholder ikke-fotosyntetiske organismer17,18. Når man vælger en metode til bestemmelse af vækst, er det vigtigt at overveje suspensionens morfologi. Når organismer klumper sig sammen og ikke blandes godt, er OD og celletal ikke mulige15. En enkelt metode er ikke egnet til alle eksperimentelle anvendelser – forskere skal beslutte, hvilke metoder der er praktiske og relevante for deres eksperimentelle mål.
AFDW er en pålidelig metode, der muliggør vækstsammenligninger mellem forskellige kulturforhold, især mellem arter og kulturmedier 15,19,20. For at beregne AFDW koncentreres en prøve af mikroalgekultur først, enten ved filtrering eller centrifugering, og tørres. På dette stadium kan DW bestemmes. Normalt indeholder DW-prøven mindst 8-10% aske-uorganisk materiale såsom salte og partikler15. DW sporer væksttendenser, men kan skæves, hvis uorganiske stoffers bidrag varierer. For at bestemme AFDW-densitet forbrændes tør biomasse ved høj temperatur; dette fordamper den organiske eller nyttige del, mens aske (uorganiske stoffer) efterlades19. For at beregne AFDW trækkes vægten af askefraktionen fra vægten af DW-fraktionen. I mikroalge suspensioner varierer AFDW typisk fra 0,1-3 g / L 12,21,22. Små mængder fortyndede suspensioner giver lidt tør biomasse, <10 mg. Efter forbrænding må aske kun veje 1 mg. Afhængigt af kulturtætheden kræver denne metode derfor volumener mellem 5-100 ml og analytiske skalaer nøjagtige til 0,1 mg 12,15,19,22. Laboratorie PBR’er er typisk små, højst et par liter, hvorfor hver flydende prøve udtømmer kulturvolumen. Endvidere er AFDW-metoden manuel og tager 2-3 dage. For replikerede og gentagne eksperimenter foretrækkes en automatiseret og kontinuerlig proces.
For mikroalger, der bruger bicarbonat som kulstofkilde, kan to yderligere vækstmålinger måles kontinuerligt. Fotosyntese forbruger bicarbonat og producerer ilt. Forbruget af bikarbonat øger middelpH-værdien 23. En nedsænket pH-sonde kan måle denne ændring. Fotosyntetisk iltproduktion øger mediets koncentration af opløst ilt (DO), indtil mediet er mættet. Ud over mætning eksisterer ilt som bobler. Iltproduktion måles ved hjælp af mange forskellige teknikker: sonder måler DO-koncentration, manometriske enheder vurderer headspace-tryk, gaskromatografi måler headspace-sammensætning, og volumetriske sensorer registrerer gasudstrømning 24,25,26,27. Når ilt anvendes som vækstproxy, skal kulturbeholdere være fuldt forseglede eller kun tillade gasudstrømning. Til pH- og iltmålinger skal kulstof tilføres i form af bicarbonat, ikke ved CO2 -sparging. CO2 -sparging reducerer medium pH23 og kan som gas forstyrre iltmålinger. En fordel ved pH og ilt i forhold til optisk densitet er, at metoden ikke kompromitteres, hvis mikroalger danner klumper. Selvom det er indirekte, er både pH og ilt effektive til at sammenligne vækst mellem behandlinger.
PBR’er, der er i brug i dag, varierer i kompleksitet. Laboratorier kan bruge enkle bordkolber, brugerdefinerede prototyper eller kommercielt tilgængelige produkter. For forskergrupper, der søger at opgradere fra kolber, kan omkostningerne ved kommercielle PBR’er eller teknisk færdighed og delfremstilling, der kræves for at bygge mange prototyper, være en barriere. Dette manuskript har til formål at beskrive det trinvise design, konstruktion og drift af laboratorie-PBR’er, der bygger bro over dette hul. Disse PBR’er har et tilpasseligt lysregime og overvåger væksten kontinuerligt ved at registrere volumetrisk iltproduktion. Dette design huser tre kulturfartøjer til tredobbelt replikation og kan bygges med moderat dygtighed og let tilgængelige materialer. Denne PBR er en værdifuld tilføjelse til et laboratorium, der ønsker at udvide sin kapacitet til mikroalgeforskning uden at investere i meget tekniske eller dyre produkter. Når forskere vælger at erhverve eller bygge en PBR, skal de overveje et designs egnethed til deres kulturforhold, økonomiske stilling og forskningsspørgsmål.
Inden for denne protokol øger fokus på følgende trin sandsynligheden for at generere reproducerbare data af høj kvalitet. Ved konstruktion af reaktorstativet (trin 1) skal basen være robust med veljusterede lodrette understøtninger. Slidset stål har skarpe kanter, så tilføjelsen af sikkerhedshætter er afgørende. Flaskeplatformens overflader skal være helt flade, magnetomrøreren og bolthovederne skal begge sidde under det øverste lags overflade (trin 3.2-3.6). I henhold til producentens anvisninger skal gassensorens emballagevæske fyldes til “sporingsskruen for væskeniveau” for nøjagtige iltmålinger. Dette væskeniveau bør kontrolleres regelmæssigt, da fordampning af emballagevæsken kan kortslutte målecellen. Alle tre gasledninger lavet i trin 5.2 skal have samme længde; dette sikrer, at replikater har identiske headspace-volumener. Før et forsøg påbegyndes, anbefales det at teste det programmerede lysregime ved at registrere lysintensiteten over en periode på 24 timer (trin 6.11). Hvis stigninger i væsketemperaturen giver anledning til bekymring, skal denne test også omfatte en forseglet flaske med en indvendig temperatursonde (trin 6.11). Når du logger, skal du ikke afslutte softwarevinduet til dataindsamling; dette vil afslutte logning. Hvis der udtages kulturprøver, skal du passe på ikke at frigive headspace-gas ved at åbne ventiler i den forkerte rækkefølge (trin 8.2-8.8). Når du gennemgår eksperimentelle data, skal du være opmærksom på, at dataindsamlingssoftwaren automatisk genererer et glidende gennemsnit af strømningshastigheden. Dette oppuster værdien af en eller to strømningshastighedsaflæsninger, der genereres natten over. Organiser gassensorlogfiler manuelt for at rette op på dette.
Det mest almindelige tilbageslag med denne metode er potentialet til at kortslutte gassensoren, hvis væskepakningsniveauet falder. Der er to måder, dette kan ske på. For det første kan fordampning langsomt reducere væskeniveauet. Dette er dog usandsynligt over et kortvarigt (<7 dage) eksperiment29. For det andet kan høje respirationshastigheder trække ilt ind i opløsningen og generere et headspace-undertryk. Når lysenergi ikke er tilgængelig, bruger mikroalger aerob respiration til at levere den energi, der kræves til cellulær vedligeholdelse og reparation28. Derfor kan iltforbruget og det resulterende undertryk i tætte kulturer i ikke-belyste timer være betydeligt. Dette suger emballagevæske fra gassensorerne ind i gasledningen. Den afstand, som pakkevæsken bevæger sig, er proportional med mængden af respiration om natten. Hvis pakningsvæsken kommer ind i flaskerne, genererer dette en olieglat på væskeoverfladen.
Hvis der forventes høje respirationshastigheder om natten, kan der foretages ændringer i protokollen. Den enkleste måde at undgå undertryk på er at lade flaskehovedrummet være åbent natten over. Dette har også den fordel, at det letter DO-niveauerne ved at reducere det delvise headspace-tryk påO2. Høje DO-koncentrationer menes at være skadelige for væksten, daO2 kan hæmme aktiviteten af Rubisco og kan udløse oxidativ stress30,31. Det er ikke ualmindeligt, at dyrkningssuspensioner når 4x overmætning, selv når de er i kontakt med atmosfæren25,32. For at åbne headspace skal du frakoble gasledningen fra nålen, der spænder over gummiproppen. Nattetimer kan tjene som et vindue til at fylde gassensorens pakningsvæske eller manipulere kontinuerlige eksperimenter med ringe indflydelse på dataindsamlingen. For eksempel kan man ændre kulturtætheden, opdatere næringsstoffer, tilføje en ændring eller introducere et patogen. Flasker skal forsegles igen, og gassensorledningen tilsluttes igen, før lysene tændes igen. Iltmålingerne indsamlet fra forsøg med lukkede versus åbne natlige headspaces vil variere.
Når flasker forbliver forseglede, reducerer iltforbruget om natten antallet af molO2 i headspace. Dette får pakningsvæske til at krybe op ad gassensorledningen for at opretholde headspace-trykket. Når lyset tændes, genoptages iltproduktionen. Emballagevæske skal skubbes tilbage i gassensoren, før strømningshastighedsaflæsninger påbegyndes. Denne forsinkelse er derfor proportional med graden af respiration om natten. På denne måde, når headspace forbliver lukket, repræsenterer O 2-aflæsninger netto O2-produktion (fotosyntetisk produktion – respirationsforbrug). Omvendt, når headspace er åbent om natten, erstatter atmosfærisk gas, hvad headspace O2 forbruges, og ingen pakningsvæske kommer ind i gasledningen. Resultatet er, at respiratoriskO2-forbrug ikke tages i betragtning i O2-produktionsdata. Dette kan reducere nøjagtigheden af AFDW-biomassevækstestimater. Det bør dog ikke påvirke nytten af at brugeO2-produktion i dagtimerne som en måling til at sammenligne vækst mellem behandlinger.
Alle PBR-laboratorier er omfattet af den samme begrænsning. kunstige lys kan ikke replikere solspektret. Mikroalger bruger bølgelængder af lys mellem 400-700 nm til fotosyntese. Denne region kaldes fotosyntetisk aktiv stråling (PAR)33. Sollys og kunstigt lys varierer i deres relative bidrag af bølgelængder inden for dette område. Dette sammen med gunstige temperaturer og en konstant lysforsyning betyder, at laboratorievækstdata ofte ikke kan ekstrapoleres pålideligt til udendørs forhold. Disse PBR’er kan dog løse en af begrænsningerne ved laboratoriets PBR-lysforsyning. Sollysintensiteten er meget variabel hele dagen, hvor skydækket genererer forbigående udsving i hændelse PAR. Lysstyringssoftwaren og DMX-lysstyringen kan give lysintensiteter fra 0 til 2400 μmolfotoner m-2 s-1 og derover. Lysregimer kan opdeles i individuelle trin så korte som 1 s. Justerbar lysintensitet giver brugeren mulighed for at efterligne udendørs lysmønstre tættere end standard PBR-opsætninger. Her falmer simulerede 30 minutters daggry- og skumringsintervaller dag og nat cyklusser sammen (supplerende tabel 1).
Selvom AFDW-tæthed er blevet standardmålet for vækst, kan denne metode kræve betydelige kulturvolumener, en 2-3-dages behandlingsperiode og genererer et datapunkt ad gangen. Yderligere, hvis forholdene bliver ugunstige, og celler dør, skelner AFDW-densitet ikke mellem aktivt fotosyntetiserende celler og dem, der nedbrydes. Kvantificering af hastigheden af fotosyntetisk iltproduktion tjener som en alternativ vækstproxy. Dette PBR-design kan registrere iltproduktion kontinuerligt med lidt brugerintervention, samtidig med at kulturvolumen bevares. Dataopløsningen kan forbedres ved at vælge en gassensor med et lavere målecellevolumen, f.eks. 1 ml. Hvis kulturer er godt blandede, kan brugerne desuden beslutte at installere et spektrofotometer til kontinuerlig optisk densitetsaflæsninger. Hvis temperaturregulering af mediet ønskes, kan der tilsættes en recirkulerende køler. Disse PBR’er er en værdifuld tilføjelse til et laboratorium, der ønsker at udvide sin mikroalgeforskningskapacitet uden store økonomiske investeringer. De er særligt velegnede til dem, der arbejder med høj alkalinitet, høj pH-art som Spirulina. Disse PBR’er tilbyder let regimefleksibilitet og er gyldige til hurtige, replikerede laboratorievækstsammenligninger.
The authors have nothing to disclose.
Denne undersøgelse blev støttet af Natural Sciences and Engineering Research Council (NSERC), Canada Foundation for Innovation (CFI), Canada First Research Excellence Fund (CFREF), Alberta Innovates, General Sir John Monash Foundation, Albertas regering og University of Calgary. Tak til Mark Toonen for det elektriske arbejde og William Richardson for opløselighedsberegninger.
Aluminum channels Imperial: 0.90” x 39.37” Metric: 2.3 cm x 100 cm Quantity: 4 |
LED World | AC-AR1-1M | Required as a heat sink |
Bungee cords, small Quantity: 5 |
– | – | To secure bottles |
Computer – desktop/laptop Quantity: 1 |
– | – | – |
Data Logger, HOBO U30 USB Weather Station Quantity: 1 |
HOBO, Hoskin | U30-NRC-VIA-10-S100-000 | Records light sensor information |
Digital interface module, Rigamo, 4-channel Quantity: 1 |
Ritter | N/A | This is to transmit gas sensor data to the computer |
DMX decoder, 12~24 VDC, DMX-CV-4X5A Quantity: 1 |
LITECH, LED World | LT-840-6A | Transmit messages which alter the light pattern |
DMX lighting controller, SUSHI-RB-RJ Quantity: 1 |
Arcolis, Nicolaudie America Inc. | SUSHI-RB-RJ DMX | Encodes the lighting program |
Gas sensor packing liquid (Silox) Quantity: 1 L |
Ritter | https://www.ritter.de/en/data-sheets/silox | |
Gas sensor, volumetric Quantity: 3 |
Ritter | MGC-1 V3.4 PMMA (https://www.ritter.de/downloads/mgc-milligascounter-en) | Measures oxygen production |
Glass bottles, round 1 L with GL45 neck Quantity: 3 |
Corning, Capitol Scientific | 1395-1L | Culture vessels |
Hardware – end caps for slotted steel Quantity: 10 |
Paulin, Home Depot | 142-612 | To cover sharp edges of slotted steel |
Hardware – eye hooks Quantity: 6 |
– | – | To secure bottles |
Hardware – metal corner braces (large) Imperial: 4" x 4" Metric: 10 cm x 10 cm Quantity: 8 |
– | – | Larger brackets to construct metal stand |
Hardware – metal corner braces (small) Imperial: 2 1/2" x 2 1/2" Metric: 6.4 cm x 6.4 cm Quantity: 6 |
– | – | Small brackets to connect bottle platforms to PVC pipe |
Hardware – metal corner gussets Imperial: 3" x 3" Metric: 7.6 cm x 7.6 cm Quantity: 6 |
Paulin, Home Depot | 142-616 | Flat brackets to construct metal stand |
Hardware – piano hinge Imperial: 36" Metric: 91 cm Quantity: 1 |
– | – | Connects two halves of PVC pipe |
Hardware – rivets Quantity: 40 |
– | – | To attach piano hinge to PVC tubing |
Hardware – set of bolts, nuts, washers Quantity: 60 |
– | – | Long thin bolts are required to secure bottle platforms around magentic stirrers |
Hardware – set of bolts, nuts, washers Quantity: 30 |
– | – | Larger shorter bolts are required to build the metal stand |
LED driver, constant voltage, 96W 24VDC UL Listed IP65 Driver Class 2 regulated power supply Quantity: 1 |
Magnitude Lighting, LED World | CVN96L24DC | Regulates power to the lights |
LED lights, Cinco Bright LED Flex Strip Quantity: 4 m roll |
EvenBright, LED World | FA128M57-4M-24V-X | Roll is trimmed into 4 x 1 m lengths and secured inside the PVC tube |
Light meter, handheld with submersible sperical probe Quantity: 1 |
LI-COR | LA-250A | Calibrate the reactors light intensity |
Light sensors Photosynthetic Light (PAR) Smart Sensor Quantity: 2 |
HOBO, Hoskin | S-LIA-M003 | Only one is required however two would be good practice in case one malfunctioned |
Magnetic stirrers (MIXdrive 1 XS) with external control units and power supply (MIXcontrol eco) Quantity: 3 |
2Mag, 2MAG USA | MF 40300 | Stirrers sit sandwiched in bottle platforms |
Metal plate Imperial: 24" x 8" Metric: 61 cm x 20.3 cm Quantity: 1 |
– | – | This is a surface on which to secure electronics, it is attached to the back of the reactor |
Pipe, white PVC Imperial: 6" diameter x 42" high Metric: 15.2 cm x 106.7 cm Quantity: 1 |
– | – | Cut lengthwise in two halves, used to house lights and bottles |
Plastic (HDPE) sheets Imperial: 4" x 4" x 1/4" Metric: 10 cm x 10 cm x 1 cm Quantity: 6 |
Inventables | 30291-01 | For bottle platforms which house magentic stirrers |
Rubber stoppers – GL45 size Quantity: 3 |
Duran, VWR | 76289-760 | Seals culture vessels |
Screw caps – with aperture and GL45 neck Quantity: 3 |
Corning, Capitol Scientific | 1395-45HTSC | Generates seal of culture vessels |
Slotted angle steel lengths Imperial: 1-1/2" X 48" x 0.074" Metric: 3.8 cm x 122 cm x 0.19 cm Quantity: 6 |
Paulin, Home Depot | 142-202 | Makes up the body of the metal stand |
Slotted flat steel lenghts Imperial: 1-3/8" x 48" x 0.074" Metric: 3.5 cm x 122 cm x 0.19 cm Quantity: 3 |
Paulin, Home Depot | 142-222 | Makes up the body of the metal stand |
Software – Easy Stand Alone (ESA) | https://www.dmxsoft.com/#apps | AKA LED control software | |
Software – Rigamo v3.1 | AKA data acquisition software | ||
Software – Storage Upgrade Tools (SUT) | https://store.dmxsoft.com// | ||
Stir bar Imperial: 1" x 5/16" Metric: 2.5 cm x 0.8 cm Quantity: 3 |
Fisherbrand | 14-513-59 | Stirs culture |
Switch box Quantity: 1 |
– | – | Turns power on/off to reactor |
Syringe, 10 mL Quantity: Multiple |
– | – | Optional if you wish to extract culture |
Tube adaptor fittings, plastic – Stopcock 1-way Quantity: 6 |
Masterflex, Cole Palmer | RK-12023-33 | Close/open culture vessel line |
Tube adaptor fittings, plastic – variety of male and female luer lock fittings Imperial: to fit 1/16" and 1/8" ID tubing Metric: to fit 1.59 mm and 3.18 mm tubing Quantity: Multiple packets |
Masterflex, Cole Palmer | RK-30800-16; RK-30800-18; RK-45518-26; RK-45501-00; RK-45501-04 | Many different combinations can achieve the same end result, best to order a variety of fittings |
Tube adaptor fittings, plastic – variety of straight connectors Imperial: to fit 1/16" and 1/8" ID tubing Metric: to fit 1.59 mm and 3.18 mm tubing Quantity: Multiple packets |
Masterflex, Cole Palmer | RK-40616-04 | Many different combinations can achieve the same end result, best to order a variety of fittings |
Tubing, flexible, transparent Imperial: ID=1/16", OD=1/8" Metric: ID = 1.59 mm, 0D = 3.18 mm Quantity: 4 m |
Masterflex, Cole Palmer | RK-06422-02 | Line from culture vessel to gas sensor |
Tubing, flexible, transparent Imperial: ID=1/8", OD=1/4" Metric: ID = 3.18 mm, 0D = 6.35 mm Quantity: 2 m |
Masterflex, Cole Palmer | RK-06422-05 | Gas sensor standard tubing size |
Tubing, rigid, transparent Imperial: ID=1/16", OD=1/8" Metric: ID = 1.59 mm, 0D = 3.18 mm Quantiy: 1 m |
Masterflex, Cole Palmer | RK-06605-27 | Spans rubber stopper allowing gas to exit |
Tubing, rigid, transparent Imperial: ID=1/8", OD=1/4" Metric: ID = 3.18 mm, 0D = 6.35 mm Quantity: 1 m |
Masterflex, Cole Palmer | RK-06605-30 | Spans rubber stopper allowing gas to exit |
Zip ties, small Quantity: 1 packet |
Secure tube fittings |