Esta publicação descreve o desenho de fotobioreatores laboratoriais (PBRs) com regimes de luz personalizáveis. O crescimento de cianobactérias ou microalgas, usando bicarbonato como fonte de carbono, é monitorado continuamente pela medição da produção volumétrica de oxigênio. Esses PBRs facilitam comparações rápidas e replicadas de crescimento laboratorial com pouca intervenção do usuário durante os experimentos.
O estudo laboratorial das microalgas pode ser experimentalmente desafiador. Além dos requisitos de cultivo de microrganismos não fotossintéticos, fototróficos também requerem iluminação. Rotineiramente, os pesquisadores buscam fornecer suprimentos de luz personalizados, ou seja, variar a intensidade da luz e o tempo sobre o qual é entregue. Essa flexibilidade é difícil com as luzes padrão do bancada. Geralmente, estudos de cultivo também requerem comparações de crescimento entre tratamentos experimentais. Frequentemente, o crescimento é avaliado ao longo de uma duração prolongada, por exemplo, várias vezes por dia durante um teste de uma semana. As medições manuais podem ser demoradas e falta de resolução de dados. Portanto, fotobioreatores (PBRs) com monitoramento automático de crescimento e fornecimento de luz personalizável são úteis para experimentos replicados com múltiplos tratamentos. A obra atual apresenta o projeto, construção e operação de PBRs laboratoriais. Os materiais são de origem fácil e relativamente baratos. O projeto pode ser duplicado com habilidade moderada. Cada estrutura tem uma pegada de ~40 cm2 e hospeda três garrafas de vidro 1 L para replicação triplicada. As garrafas repousam sobre plataformas que contêm agitadores magnéticos e são dispostas verticalmente dentro de um tubo de cloreto de polivinil de 1 m de altura e 15 cm de diâmetro (PVC). O interior da tubulação é forrado com diodos emissores de luz (LEDs). Estes LEDs produzem intensidades contínuas de luz de 0-2400 fótons μmol m-2 s-1 de radiação fotossintética ativa (PAR). Os usuários projetam um programa de iluminação personalizado. A intensidade da luz pode ser ajustada a cada segundo ou mantida constante por durações mais longas. O oxigênio produzido a partir da fotossíntese sai de cada garrafa através de um sensor gás volutrico unidirecionário. O software é usado para gravar dados de sensores de gás. A quantidade de oxigênio produzida pode estar correlacionada com o crescimento da biomassa. Se forem necessárias amostras de biomassa, uma seringa pode ser usada para extrair cultura. O método é adequado para microalgas cultivadas com bicarbonato como fonte de carbono. Esses PBRs são valiosos para um laboratório que requer experimentos replicados, flexibilidade de regime leve e dados contínuos de crescimento de alta resolução.
Microalgas e cianobactérias, coletivamente chamadas de microalgas para a simplicidade, são defendidas por seu potencial em biotecnologia sustentável. Eles são candidatos atraentes devido ao seu rápido crescimento, capacidade de serem cultivados em terras não aráveis, e pelo uso da luz solar para impulsionar a conversão de dióxido de carbono em biomassa 1,2,3. A biomassa microalgal pode ser convertida em produtos como bioenergia na forma de óleo ou gás, corantes alimentares e suplementos nutricionais, e materiais como biopolímeros 1,4,5,6,7. Além disso, podem ser usados para tratar águas residuais ou remediar corpos d’água, consumindo nutrientes em excesso 8,9. Diante disso, a pesquisa microalgal é generalizada e estabelecida. O campo cresce à medida que a sociedade reconsidera a intensidade de carbono e a sustentabilidade ambiental das abordagens atuais de fabricação e geração de energia.
Três requisitos fundamentais de estudos microánguicos baseados em laboratório são um vaso cultural, fonte de luz e método para quantificar o crescimento. O termo fotobioreator (PBR) descreve uma configuração na qual os vasos culturais são iluminados10. Comumente, estudos de microalgas visam comparar o crescimento entre dois ou mais tratamentos, por exemplo, diferentes mídias de crescimento, regimes leves ou espécies 11,12,13. Para relevância estatística, cada condição, por exemplo, tratamento e controle, deve ser replicada. Se o controle e o tratamento forem executados simultaneamente, isso significa que muitos PBRs devem ser monitorados e amostrados durante a duração de um experimento. O desafio com a operação de vários PBRs é duas vezes. Em primeiro lugar, fornecer uma intensidade de luz uniforme a cada PBR é essencial para a reprodutibilidade, mas pode ser difícil. A quantidade de incidente de luz na superfície do vaso é influenciada por sua distância da fonte de luz, sombreamento de vasos adjacentes e flutuações de luz de fundo14. Em segundo lugar, deve ser selecionado um método para quantificar com precisão o crescimento.
O crescimento é comumente medido pela contagem de células, densidade óptica (OD), teor de clorofila A, densidade de peso seco (DW) e densidade de peso seco livre de cinzas (AFDW)15. Contagem de células, teor de clorofila A e métodos gravimétricos são processos manuais que produzem pontos de dados discretos. OD pode ser medido continuamente e não invasivamente com um espectrofotômetro, desde que seja bem calibrado contra outro método, como a densidade AFDW15. No entanto, as medidas de OD e o teor de Clorofila A podem não ser confiáveis, pois os resultados variam em diferentes condições culturais, por exemplo, entre espécies e ao longo do ciclode crescimento 15,16. Para clorofila A, o método de extração também pode impactar o rendimento do pigmento17. Clorofila O conteúdo é particularmente útil no acompanhamento do crescimento de microalgas dentro de comunidades microbianas que também contêm organismos não fotossintéticos17,18. Ao escolher um método para determinar o crescimento, é essencial considerar a morfologia da suspensão. Quando os organismos se aglomeram e não são bem misturados, a OD e a contagem de células não são possíveis15. Um único método não é adequado para todas as aplicações experimentais — os pesquisadores devem decidir quais métodos são práticos e relevantes para seus objetivos experimentais.
O AFDW é um método confiável que permite comparações de crescimento entre várias condições culturais, notadamente, entre espécies e meios culturais 15,19,20. Para calcular afdw, uma amostra de cultura microálga é primeiro concentrada, seja por filtração ou centrifugação, e seca. Nesta fase, a DW pode ser determinada. Normalmente, a amostra DW contém pelo menos 8-10% de material inorgânico de cinzas, como sais e material particulado15. A DW acompanha as tendências de crescimento, mas pode ser distorcida se a contribuição dos inorgânicos variar. Para determinar a densidade de AFDW, a biomassa seca é queimada a altas temperaturas; isso vaporiza a porção orgânica ou útil, deixando as cinzas (inorgânicas) para trás19. Para calcular o AFDW, o peso da fração de cinzas é subtraído do da fração DW. Normalmente, em suspensões microánguas, o AFDW varia de 0,1 a 3 g/L 12,21,22. Pequenos volumes de suspensões diluídos produzem pouca biomassa seca, <10 mgs. Após a combustão, as cinzas podem pesar apenas 1 mg. Portanto, dependendo da densidade cultural, este método requer volumes entre 5-100 mL e escalas analíticas precisas de 0,1 mg 12,15,19,22. Os PBRs de laboratório são tipicamente pequenos, um par de litros no máximo, portanto, cada amostra líquida esgota o volume cultural. Além disso, o método AFDW é manual e leva de 2 a 3 dias. Para experimentos replicados e repetitivos, é preferível um processo automatizado e contínuo.
Para microalgas que usam bicarbonato como fonte de carbono, duas métricas adicionais de crescimento podem ser medidas continuamente. A fotossíntese consome bicarbonato e produz oxigênio. O consumo de bicarbonato aumenta o pH médio23. Uma sonda pH imersa pode medir essa mudança. A produção de oxigênio fotossintético aumenta a concentração de oxigênio dissolvido (DO) do meio até que o meio esteja saturado. Além da saturação, o oxigênio existe como bolhas. A produção de oxigênio é medida por muitas técnicas diferentes: sondas medem a concentração do DO, dispositivos manométricos avaliam a pressão do espaço na cabeça, a cromatografia gasosa mede a composição do headspace e sensores volumétricos registram saída de gás 24,25,26,27. Quando o oxigênio é usado como um proxy de crescimento, os vasos de cultura devem ser totalmente selados ou permitir apenas o fluxo de gás. Para medições de pH e oxigênio, o carbono deve ser fornecido sob a forma de bicarbonato, não por co2 sparging. O escoamento de CO2 diminui o pHmédio 23 e, como gás, pode perturbar as medições de oxigênio. Uma vantagem do pH e do oxigênio sobre a densidade óptica é que o método não é comprometido se microalgas formarem aglomerados. Embora indiretos, tanto o pH quanto o oxigênio são eficazes na comparação do crescimento entre os tratamentos.
Os PBRs em uso hoje variam em complexidade. Os laboratórios podem usar frascos simples de bancada, protótipos personalizados ou produtos disponíveis comercialmente. Para grupos de pesquisa que buscam atualizar a partir de frascos, o custo de PBRs comerciais ou habilidade técnica e fabricação de peças necessárias para construir muitos protótipos pode ser uma barreira. Este manuscrito tem como objetivo descrever o projeto passo a passo, a construção e a operação de PBRs de laboratório que fazem a ponte dessa lacuna. Estes PBRs têm um regime de luz personalizável e monitoram o crescimento continuamente registrando a produção volumostrica de oxigênio. Este projeto abriga três vasos culturais para replicação triplicada e pode ser construído com habilidade moderada e materiais de fácil acesso. Este PBR é uma adição valiosa a um laboratório que busca expandir sua capacidade de pesquisa microálgica sem investir em produtos muito técnicos ou caros. Ao optar por adquirir ou construir um PBR, os pesquisadores devem considerar a adequação de um projeto às suas condições culturais, posição financeira e questões de pesquisa.
Dentro deste protocolo, o foco nas etapas a seguir aumenta a probabilidade de gerar dados reprodutíveis e de alta qualidade. Ao construir o suporte do reator (passo 1), a base deve ser resistente com suportes verticais bem alinhados. O aço ranhuado tem bordas afiadas, por isso a adição de tampas de segurança é essencial. As superfícies da plataforma da garrafa precisam ser completamente planas, o agitador magnético e as cabeças de parafuso devem sentar-se abaixo da superfície da camada superior (passos 3.2-3.6). De acordo com a instrução do fabricante, o líquido de embalagem do sensor de gás deve ser preenchido ao “parafuso de rastreamento para nível líquido” para medições precisas de oxigênio. Este nível líquido deve ser verificado regularmente, pois a evaporação do líquido de embalagem pode fazer um curto-circuito na célula de medição. Todas as três linhas de gás feitas na etapa 5.2 devem ter o mesmo comprimento; este enures que replica têm volumes de espaço para a cabeça idênticos. Antes de iniciar um experimento, é aconselhável testar o regime de luz programado registrando intensidade de luz durante um período de 24 horas (etapa 6.11). Se o aumento da temperatura líquida for preocupante, este teste também deve incluir uma garrafa selada com uma sonda de temperatura interna (passo 6.11). Ao fazer o registro, não saia da janela do software de aquisição de dados; isso vai acabar com o registro. Se colher amostras de cultura, tenha cuidado para não liberar gás headspace abrindo válvulas na sequência errada (passos 8.2-8.8). Ao revisar dados experimentais, é informado que o software de aquisição de dados gera automaticamente uma média móvel da taxa de fluxo. Isso infla o valor das leituras de uma ou duas taxas de fluxo geradas durante a noite. Faça a curadoria de registros de sensores de gás manualmente para corrigir isso.
O revés mais comum com este método é o potencial de curto-circuito no sensor de gás se o nível de embalagem líquida diminuir. Há duas maneiras de isso ocorrer. Em primeiro lugar, a evaporação pode reduzir lentamente o nível líquido. No entanto, isso é improvável emum experimento de curto prazo (<7 dias). Em segundo lugar, altas taxas de respiração podem puxar oxigênio para a solução e gerar um espaço de cabeça sob pressão. Quando a energia da luz não está disponível, as microalgas usam a respiração aeróbica para fornecer a energia necessária para manutenção e reparo celular28. Assim, em culturas densas durante horas não iluminadas, o consumo de oxigênio e a consequente sub-pressão podem ser substanciais. Isso suga o líquido dos sensores de gás para a linha de gás. A distância que o líquido de embalagem percorre é proporcional à quantidade de respiração noturna. Se o líquido de embalagem entrar nas garrafas, isso gera uma mancha de óleo na superfície líquida.
Se forem esperadas altas taxas de respiração noturna, podem ser feitas modificações no protocolo. A maneira mais simples de evitar a sub-pressão é deixar os faróis da garrafa abertos durante a noite. Isso também tem a vantagem de aliviar os níveis do DO, diminuindo a pressão parcial do headspace de O2. Acredita-se que altas concentrações de DO sejam prejudiciais ao crescimento, pois o O2 pode impedir a atividade de Rubisco e pode desencadear estresse oxidativo30,31. Não é incomum que as suspensões culturais atinjam 4x de supersaturação mesmo quando em contato com a atmosfera25,32. Para abrir o espaço da cabeça, desconecte a linha de gás da agulha que abrange a rolha de borracha. As horas noturnas podem servir como uma janela para retoque o líquido de embalagem de sensores de gás ou manipular experimentos contínuos com pouco impacto na coleta de dados. Por exemplo, pode-se alterar a densidade da cultura, atualizar nutrientes, adicionar uma emenda ou introduzir um patógeno. As garrafas devem ser reeladas, e a linha do sensor de gás reconectada antes que as luzes se acendam. As medidas de oxigênio coletadas a partir de experimentos com espaços noturnos fechados versus abertos diferem.
Quando as garrafas permanecem seladas, o consumo noturno de oxigênio reduz o número de mols de O2 no headspace. Isso faz com que o líquido de embalagem suba a linha do sensor de gás para manter a pressão do espaço da cabeça. Quando as luzes se acendem, a produção de oxigênio recomeça. O líquido de embalagem deve ser empurrado de volta para o sensor de gás antes do início das leituras da taxa de fluxo. Esta defasagem é, portanto, proporcional ao grau de respiração noturna. Desta forma, quando o headspace permanece fechado, as leituras de O2 representam a produção líquida O2 (produção fotossintética – consumo respiratório). Por outro lado, quando o espaço para a cabeça é aberto à noite, o gás atmosférico substitui o espaço de cabeça O2 consumido, e nenhum líquido de embalagem entra na linha de gás. O resultado é que o consumo de O2 respiratório não é contabilizado nos dados de produção de O2 . Isso pode reduzir a precisão das estimativas de crescimento da biomassa AFDW. No entanto, não deve impactar a utilidade do uso da produção diurna O2 como métrica para comparar o crescimento entre os tratamentos.
Todos os PBRs laboratoriais são afetados pela mesma limitação; luzes artificiais não podem replicar o espectro solar. Microalgas usam comprimentos de onda de luz entre 400 e 700 nm para fotossíntese. Esta região é referida como radiação fotossintética ativa (PAR)33. A luz solar e a luz artificial variam em sua contribuição relativa de comprimentos de onda dentro desta faixa. Isso, ao lado de temperaturas favoráveis e uma oferta constante de luz, significa que os dados de crescimento laboratorial muitas vezes não podem ser adequadamente extrapolados para condições externas. Esses PBRs podem, no entanto, abordar uma das limitações do fornecimento de luz de PBR laboratorial. A intensidade da luz solar é altamente variável ao longo do dia, com a cobertura de nuvens gerando flutuações transitórias no PAR incidente. O software de controle de iluminação e o controlador de iluminação DMX podem fornecer intensidades de luz de 0 a 2400 μmolfótons m-2 s-1 e além. Regimes leves podem ser divididos em incrementos individuais tão curtos quanto 1 s. A intensidade de luz tunable permite que o usuário imite padrões de luz ao ar livre mais de perto do que as configurações padrão de PBR. Aqui, intervalos simulados de 30 min de madrugada e crepúsculo desaparecem ciclos diurnos e noturnos juntos (Tabela Suplementar 1).
Embora a densidade afdw tenha se tornado a medida padrão de crescimento, este método pode exigir volumes de cultura substanciais, um período de processamento de 2 a 3 dias, e gera um ponto de dados por vez. Além disso, se as condições se tornarem desfavoráveis e as células morrerem, a densidade de AFDW não discrimina entre células ativamente fotossintestares e aquelas que estão se decompondo. Quantificar a taxa de produção de oxigênio fotossintético serve como um proxy de crescimento alternativo. Este projeto PBR pode registrar a produção de oxigênio continuamente com pouca intervenção do usuário enquanto conserva o volume da cultura. A resolução dos dados poderia ser melhorada selecionando um sensor de gás com menor volume de célula de medição, por exemplo, 1 mL. Além disso, se as culturas forem bem misturadas, os usuários podem decidir instalar um espectrômetro para leituras contínuas de densidade óptica. Se o controle de temperatura do meio for desejado, um resfriador recirculador pode ser adicionado. Esses PBRs são uma adição valiosa a um laboratório que busca expandir sua capacidade de pesquisa microángua sem investimento financeiro pesado. Eles são particularmente adequados para aqueles que trabalham com alta alcalinidade, espécies de pH altas como Spirulina. Estes PBRs oferecem flexibilidade de regime leve e são válidos para comparações rápidas, replicadas e de crescimento laboratorial.
The authors have nothing to disclose.
Este estudo foi apoiado pelo Conselho de Ciências Naturais e Pesquisa em Engenharia (NSERC), Fundação do Canadá para Inovação (CFI), Canada First Research Excellence Fund (CFREF), Alberta Innovates, General Sir John Monash Foundation, Government of Alberta e University of Calgary. Graças é estendido a Mark Toonen para o trabalho elétrico e William Richardson para cálculos de solubilidade.
Aluminum channels Imperial: 0.90” x 39.37” Metric: 2.3 cm x 100 cm Quantity: 4 |
LED World | AC-AR1-1M | Required as a heat sink |
Bungee cords, small Quantity: 5 |
– | – | To secure bottles |
Computer – desktop/laptop Quantity: 1 |
– | – | – |
Data Logger, HOBO U30 USB Weather Station Quantity: 1 |
HOBO, Hoskin | U30-NRC-VIA-10-S100-000 | Records light sensor information |
Digital interface module, Rigamo, 4-channel Quantity: 1 |
Ritter | N/A | This is to transmit gas sensor data to the computer |
DMX decoder, 12~24 VDC, DMX-CV-4X5A Quantity: 1 |
LITECH, LED World | LT-840-6A | Transmit messages which alter the light pattern |
DMX lighting controller, SUSHI-RB-RJ Quantity: 1 |
Arcolis, Nicolaudie America Inc. | SUSHI-RB-RJ DMX | Encodes the lighting program |
Gas sensor packing liquid (Silox) Quantity: 1 L |
Ritter | https://www.ritter.de/en/data-sheets/silox | |
Gas sensor, volumetric Quantity: 3 |
Ritter | MGC-1 V3.4 PMMA (https://www.ritter.de/downloads/mgc-milligascounter-en) | Measures oxygen production |
Glass bottles, round 1 L with GL45 neck Quantity: 3 |
Corning, Capitol Scientific | 1395-1L | Culture vessels |
Hardware – end caps for slotted steel Quantity: 10 |
Paulin, Home Depot | 142-612 | To cover sharp edges of slotted steel |
Hardware – eye hooks Quantity: 6 |
– | – | To secure bottles |
Hardware – metal corner braces (large) Imperial: 4" x 4" Metric: 10 cm x 10 cm Quantity: 8 |
– | – | Larger brackets to construct metal stand |
Hardware – metal corner braces (small) Imperial: 2 1/2" x 2 1/2" Metric: 6.4 cm x 6.4 cm Quantity: 6 |
– | – | Small brackets to connect bottle platforms to PVC pipe |
Hardware – metal corner gussets Imperial: 3" x 3" Metric: 7.6 cm x 7.6 cm Quantity: 6 |
Paulin, Home Depot | 142-616 | Flat brackets to construct metal stand |
Hardware – piano hinge Imperial: 36" Metric: 91 cm Quantity: 1 |
– | – | Connects two halves of PVC pipe |
Hardware – rivets Quantity: 40 |
– | – | To attach piano hinge to PVC tubing |
Hardware – set of bolts, nuts, washers Quantity: 60 |
– | – | Long thin bolts are required to secure bottle platforms around magentic stirrers |
Hardware – set of bolts, nuts, washers Quantity: 30 |
– | – | Larger shorter bolts are required to build the metal stand |
LED driver, constant voltage, 96W 24VDC UL Listed IP65 Driver Class 2 regulated power supply Quantity: 1 |
Magnitude Lighting, LED World | CVN96L24DC | Regulates power to the lights |
LED lights, Cinco Bright LED Flex Strip Quantity: 4 m roll |
EvenBright, LED World | FA128M57-4M-24V-X | Roll is trimmed into 4 x 1 m lengths and secured inside the PVC tube |
Light meter, handheld with submersible sperical probe Quantity: 1 |
LI-COR | LA-250A | Calibrate the reactors light intensity |
Light sensors Photosynthetic Light (PAR) Smart Sensor Quantity: 2 |
HOBO, Hoskin | S-LIA-M003 | Only one is required however two would be good practice in case one malfunctioned |
Magnetic stirrers (MIXdrive 1 XS) with external control units and power supply (MIXcontrol eco) Quantity: 3 |
2Mag, 2MAG USA | MF 40300 | Stirrers sit sandwiched in bottle platforms |
Metal plate Imperial: 24" x 8" Metric: 61 cm x 20.3 cm Quantity: 1 |
– | – | This is a surface on which to secure electronics, it is attached to the back of the reactor |
Pipe, white PVC Imperial: 6" diameter x 42" high Metric: 15.2 cm x 106.7 cm Quantity: 1 |
– | – | Cut lengthwise in two halves, used to house lights and bottles |
Plastic (HDPE) sheets Imperial: 4" x 4" x 1/4" Metric: 10 cm x 10 cm x 1 cm Quantity: 6 |
Inventables | 30291-01 | For bottle platforms which house magentic stirrers |
Rubber stoppers – GL45 size Quantity: 3 |
Duran, VWR | 76289-760 | Seals culture vessels |
Screw caps – with aperture and GL45 neck Quantity: 3 |
Corning, Capitol Scientific | 1395-45HTSC | Generates seal of culture vessels |
Slotted angle steel lengths Imperial: 1-1/2" X 48" x 0.074" Metric: 3.8 cm x 122 cm x 0.19 cm Quantity: 6 |
Paulin, Home Depot | 142-202 | Makes up the body of the metal stand |
Slotted flat steel lenghts Imperial: 1-3/8" x 48" x 0.074" Metric: 3.5 cm x 122 cm x 0.19 cm Quantity: 3 |
Paulin, Home Depot | 142-222 | Makes up the body of the metal stand |
Software – Easy Stand Alone (ESA) | https://www.dmxsoft.com/#apps | AKA LED control software | |
Software – Rigamo v3.1 | AKA data acquisition software | ||
Software – Storage Upgrade Tools (SUT) | https://store.dmxsoft.com// | ||
Stir bar Imperial: 1" x 5/16" Metric: 2.5 cm x 0.8 cm Quantity: 3 |
Fisherbrand | 14-513-59 | Stirs culture |
Switch box Quantity: 1 |
– | – | Turns power on/off to reactor |
Syringe, 10 mL Quantity: Multiple |
– | – | Optional if you wish to extract culture |
Tube adaptor fittings, plastic – Stopcock 1-way Quantity: 6 |
Masterflex, Cole Palmer | RK-12023-33 | Close/open culture vessel line |
Tube adaptor fittings, plastic – variety of male and female luer lock fittings Imperial: to fit 1/16" and 1/8" ID tubing Metric: to fit 1.59 mm and 3.18 mm tubing Quantity: Multiple packets |
Masterflex, Cole Palmer | RK-30800-16; RK-30800-18; RK-45518-26; RK-45501-00; RK-45501-04 | Many different combinations can achieve the same end result, best to order a variety of fittings |
Tube adaptor fittings, plastic – variety of straight connectors Imperial: to fit 1/16" and 1/8" ID tubing Metric: to fit 1.59 mm and 3.18 mm tubing Quantity: Multiple packets |
Masterflex, Cole Palmer | RK-40616-04 | Many different combinations can achieve the same end result, best to order a variety of fittings |
Tubing, flexible, transparent Imperial: ID=1/16", OD=1/8" Metric: ID = 1.59 mm, 0D = 3.18 mm Quantity: 4 m |
Masterflex, Cole Palmer | RK-06422-02 | Line from culture vessel to gas sensor |
Tubing, flexible, transparent Imperial: ID=1/8", OD=1/4" Metric: ID = 3.18 mm, 0D = 6.35 mm Quantity: 2 m |
Masterflex, Cole Palmer | RK-06422-05 | Gas sensor standard tubing size |
Tubing, rigid, transparent Imperial: ID=1/16", OD=1/8" Metric: ID = 1.59 mm, 0D = 3.18 mm Quantiy: 1 m |
Masterflex, Cole Palmer | RK-06605-27 | Spans rubber stopper allowing gas to exit |
Tubing, rigid, transparent Imperial: ID=1/8", OD=1/4" Metric: ID = 3.18 mm, 0D = 6.35 mm Quantity: 1 m |
Masterflex, Cole Palmer | RK-06605-30 | Spans rubber stopper allowing gas to exit |
Zip ties, small Quantity: 1 packet |
Secure tube fittings |