نموذج الفئران 6-هيدروكسي دوبامين لمرض باركنسون
Summary
تم استخدام نموذج 6-hydroxydopamine (6-OHDA) لعقود لتعزيز فهم مرض باركنسون. في هذا البروتوكول ، نوضح كيفية إجراء آفات nigrostriatal أحادية الجانب في الفئران عن طريق حقن 6-OHDA في حزمة الدماغ الأمامي الإنسي ، وتقييم العجز الحركي ، والتنبؤ بالآفات باستخدام اختبار الخطوة.
Abstract
الأعراض الحركية لمرض باركنسون (PD) – بطء الحركة ، و akinesia ، والهزة أثناء الراحة – هي عواقب التنكس العصبي للخلايا العصبية الدوبامينية في المادة السوداء pars compacta (SNc) والعجز الشرطي الدوباميني. وقد استخدمت النماذج الحيوانية على نطاق واسع لمحاكاة علم الأمراض البشرية في المختبر. القوارض هي النماذج الحيوانية الأكثر استخداما ل PD بسبب سهولة التعامل معها وصيانتها. علاوة على ذلك ، فإن التشريح والآليات الجزيئية والخلوية والدوائية ل PD متشابهة في القوارض والبشر. إن ضخ السم العصبي ، 6-هيدروكسي دوبامين (6-OHDA) ، في حزمة الدماغ الأمامي الإنسي (MFB) من الفئران يعيد إنتاج التدمير الشديد للخلايا العصبية الدوبامينية ويحاكي أعراض PD. يوضح هذا البروتوكول كيفية إجراء الحقن المجهري من جانب واحد ل 6-OHDA في MFB في نموذج الفئران من PD ويظهر العجز الحركي الناجم عن 6-OHDA والآفات الدوبامينية المتوقعة من خلال اختبار الخطوة. يسبب 6-OHDA ضعفا كبيرا في عدد الخطوات التي يتم تنفيذها باستخدام الطرف الأمامي المقابل للطرف.
Introduction
الخصائص العصبية المرضية الرئيسية ل PD هي التنكس العصبي التدريجي المزمن للخلايا العصبية الدوبامينية في المادة السوداء pars compacta (SNc) ووجود أجسام ليوي التي تحتوي على بروتين α-synuclein 1. بينما تقوم الخلايا العصبية الدوبامينية SNc بإسقاط محاورها العصبية في المخطط من خلال المسار nigrostriatal ، يؤدي التنكس العصبي للخلايا العصبية في SNc إلى عجز الدوبامين في المخطط 2. يؤدي غياب الدوبامين في المخطط إلى اختلال التوازن في أنشطة مسارات التحكم الحركي المباشرة وغير المباشرة ، المسؤولة عن الأعراض الحركية الرئيسية ل PD: akinesia (الحركة البطيئة) ، بطء الحركة (صعوبة في بدء الحركات) ، تصلب العضلات ، والهزة عند الراحة3،4،5.
نظرا لأن الآليات الجزيئية والفسيولوجية المشاركة في ظهور مرض باركنسون لا تزال غير مفهومة تماما ، فإن العلاجات الرئيسية المتاحة حاليا تسعى إلى تخفيف الأعراض الحركية من خلال العلاجات الدوائية والتحفيز العميق للدماغ 6,7 والعلاجات الوراثية8 وزرع الخلايا9. لذلك ، يعد البحث قبل السريري أمرا أساسيا لتوضيح الآليات المشاركة في ظهور مرض باركنسون واكتشاف منهجيات جديدة للتشخيص المبكر والعلاجات الجديدة لمنع أو إيقاف انحطاط الخلايا العصبية المتأثرة ب PD10.
وقد استخدمت النماذج الحيوانية على نطاق واسع لمحاكاة علم الأمراض البشرية في المختبر، مما ساهم في تقدم الطب والعلوم11،12،13،14. ومع ذلك ، من الضروري التأكيد على أن الاختيار الصحيح للنموذج الحيواني أمر أساسي لنجاح الدراسة. لذلك ، يجب التحقق من صحة النموذج الحيواني في ثلاثة جوانب رئيسية: أ) صلاحية الوجه ، حيث يجب أن يكون للنموذج الحيواني خصائص علم الأمراض البشري. ب) الصلاحية البناءة ، حيث يجب أن يكون للنموذج الحيواني أساس نظري متين ؛ ج) الصلاحية التنبؤية ، حيث يجب أن تستجيب النماذج الحيوانية للعلاجات بطريقة مماثلة للعلاج السريري.
حاليا ، يتم استخدام العديد من الحيوانات كنماذج حيوانية ل PD. وتشمل المجموعات الرئيسية الثدييات، مثل القوارض والرئيسيات والخنازير الصغيرة والكلاب والقطط، ومجموعات أخرى مثل ذبابة الفاكهة وأسماك الزرد. القوارض هي النموذج الحيواني الأكثر كلاسيكية ل PD والأكثر استخداما بسبب سهولة التعامل معها وصيانتها. بالإضافة إلى ذلك ، فإن آليات التشريح والآليات الجزيئية والخلوية والدوائية ل PD متشابهة في القوارض والبشر15.
قامت مراجعة نشرها كين وزملاؤه في عام 2019 بتحليل منهجيات النموذج الحيواني الرئيسية المستخدمة في PD في 2000s ووجدت أن النموذج الحيواني الأكثر استخداما ينطوي على السموم العصبية مثل 6-hydroxydopamine (6-OHDA) و 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP). تسبب كل من السموم العصبية خلل تنظيم الميتوكوندريا في الخلايا العصبية الدوبامينية في المسار الزنجي ، مما يؤدي إلى موت الخلايا16. وهناك نموذج آخر يستخدم على نطاق واسع ينطوي على التلاعب الجيني من خلال طفرة في جينات محددة تشارك في ظهور مرض باركنسوندريا، مما يسبب خلل تنظيم الميتوكوندريا17. تستخدم نماذج السموم العصبية بشكل شائع لتقييم ومقارنة العلاجات ، في حين تستخدم النماذج الجينية لدراسة تطوير العلاجات الوقائية و PD15 مجهول السبب.
تم اكتشاف السم العصبي MPTP ليسبب باركنسون في منتصف 1980s بعد أن استخدم سبعة مرضى المادة وأظهرت أعراض PD شديدة. بالإضافة إلى الأعراض ، استجاب المرضى للعلاج باستخدام L-DOPA ، مما جعل الباحثين يربطون الجزيء مباشرة ب PD. بعد نشر الحالة في عام 1986 ، بدأ العديد من الباحثين في استخدام MPTP في أبحاث PD قبل السريرية 18. وجد الباحثون أنه كونه جزيئا محبة للدهون ، يمكن ل MPTP عبور الحاجز الدموي الدماغي (BBB) وتحويله إلى MPP + 19. تتراكم هذه المادة السامة داخل الخلايا العصبية وتسبب أضرارا للمجمع 1 من السلسلة التنفسية للميتوكوندريا ، مما يؤدي إلى وفاة الخلايا العصبية الدوبامينية20.
تم استخدام نموذج السموم العصبية 6-OHDA لأول مرة للحث على انحطاط الخلايا العصبية أحادية الأمين في المسار nigrostriatal في عام 196821. يستخدم نموذج 6-OHDA بشكل شائع للتسبب في التنكس العصبي في المسار nigrostriatal لأنه تناظري الدوبامين وسام للخلايا المحتوية على الكاتيكولامين. بعد دخول 6-OHDA إلى الدماغ ، قد يتم تناوله بواسطة ناقل الدوبامين (DAT) في الخلايا العصبية الدوبامينية ، مما يؤدي إلى انحطاط المسار nigrostriatal22. نظرا لأن 6-OHDA لا يخترق BBB ، فيجب إعطاؤه مباشرة من خلال الحقن المجسمة داخل المخ 23. غالبا ما يتم الجمع بين مثبط امتصاص النورادرينالين والحقن المجهري 6-OHDA للحفاظ على ألياف النورادرينالية وتوفير تنكس أكثر انتقائية للخلايا العصبية الدوبامينية24.
بعد أن يأخذ DAT 6-OHDA ، سوف يتراكم في سيتوسول الخلايا العصبية ، مما ينتج عنه أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) ويؤدي إلى موت الخلايا 15. وكثيرا ما تستخدم ثلاثة نماذج مختلفة من الآفات من 6-OHDA: أ) الآفات إلى SNc25,26; ب) آفات في المخطط 27،28 ؛ ج) الآفات إلى MFB29,30. الآفات الناجمة في المخطط تؤدي إلى تنكس بطيء ورجعي للخلايا العصبية الدوبامينية في SNpc. وعلى النقيض من ذلك، تؤدي الآفات الناجمة في SNpc وMFB إلى انحطاط سريع وكامل للخلايا العصبية، مما يؤدي إلى أعراض باركنسون أكثر تقدما31.
الحقن الأحادي أو الثنائي ل 6-OHDA يمكن أن يسبب التنكس العصبي في الخلايا العصبية الدوبامينية. 6-OHDA لا يسبب دائما أضرارا جسيمة للخلايا العصبية. في بعض الأحيان ، يؤدي الحقن إلى تلف جزئي ، والذي يستخدم أيضا لمحاكاة المراحل المبكرة من PD32. يستخدم الحقن من جانب واحد بشكل أكثر شيوعا بسبب قدرة النموذج على تقييم العجز الحركي للحيوان والتنبؤ بفقدان الخلايا من خلال اختبارات مثل الدوران الناجم عن الأمفيتامين / الأبومورفين واختبار الخطوة29. تستخدم الحقن الثنائية بشكل أكبر لتقييم الذاكرة المكانية والإدراك33.
اختبار الدوران الناجم عن الأمفيتامين/الأبومورفين هو اختبار سلوكي يستخدم عادة للتنبؤ بفقدان الخلايا في المسار الزنجي. يتم تعريفه على أنه عملية تؤدي فيها الإدارة المتكررة لناهضات الدوبامين إلى تكثيف السلوك الدوراني في الحيوانات المصابة ب 6-OHDA34. يتكون السلوك الدوراني من تحديد مقدار الدوران الجانبي الناجم عن الأمفيتامين أو المنعطفات المعاكسة التي يسببها الأبومورفين في القوارض المصابة من جانب واحد. تم انتقاد السلوك الدوراني الناجم عن المخدرات لأن الدوران لا يتوافق مع أعراض PD لدى البشر ويمكن أن يتأثر بمتغيرات مثل التسامح والتوعية و “التحضير”35.
التمهيد هو واحد من أهم العوامل في هذه الاختبارات السلوكية. تم الإبلاغ عن بعض الحالات التي أدت فيها جرعة واحدة من L-DOPA إلى فشل في السلوكيات الدورانية36. وبالإضافة إلى ذلك، هناك عامل حاسم آخر يتصل بالتطبيق المشترك للاختبار الناجم عن الأمفيتامين والاختبار الناجم عن الأبومورفين للاستخدام المتوازي وهو أنهما يقيسان نقاط نهاية مختلفة بسبب آليات العمل المختلفة، مما يعكس تعطيل آليات ومسارات مختلفة للتشوير. وعلاوة على ذلك، فإن الاختبار الناجم عن الأمفيتامين أكثر دقة لقياس الآفات النجمية فوق 50-60 في المائة، في حين أن الاختبار الناجم عن الأبوكومورفين أكثر دقة بالنسبة للآفات التي تزيد عن 80 في المائة 37.
ظهر اختبار الخطوة كاختبار سلوكي يشير إلى العجز المرتبط بتنكس الخلايا العصبية الدوبامينية والآثار العلاجية. وهو يتيح تحليل akinesia الناجمة عن آفة 6-OHDA في الخلايا العصبية الدوبامين دون إجراء يسببه الدواء. وعلاوة على ذلك، فإن الاختبار راسخ وشائع الاستخدام منذ عام 1995، عندما وصفه أولسون وآخرون لأول مرة(35). في عام 1999 ، قام Chang et al.38 أيضا بتحليل ومقارنة أداء الفئران في اختبار الخطوة مع مستوى التنكس الناجم عن 6-OHDA ووجدوا أن الحيوانات التي كان أداؤها أسوأ في اختبار الخطوة كان لديها أيضا انحطاط أكثر أهمية من الخلايا العصبية الدوبامينية.
اختبار التخطي هو طريقة ممتازة للتنبؤ بالضرر النغروي الحاد للدوبامين في الفئران المصابة ب 6-OHDA. تشير الأدلة إلى أن العجز الحركي يظهر في الطرف الأمامي المقابل لضخ 6-OHDA أثناء اختبار الخطوة عندما تكون درجة فقدان الدوبامين في SNc >90٪ 39. تصف هذه الورقة البروتوكولات والمنهجيات والمواد المستخدمة لإجراء الجراحة المجسمة للضخ الأحادي الجانب ل 6-OHDA في MFB من الفئران وكيفية التنبؤ بآفات الدوبامين التي يسببها السم من خلال اختبار الخطوة.
Protocol
Representative Results
Discussion
تصف هذه الورقة بروتوكولا لإجراء عملية جراحية للتسريب المجهري من جانب واحد من 6-OHDA في MFB ، قادر على التسبب في آفات قوية في الخلايا العصبية في المسار nigrostriatal وتوليد akinesia في الحيوان. كما تم وصف بروتوكول إجراء اختبار الخطوة، وهو اختبار سهل التطبيق وغير جراحي يمكن استخدامه لإثبات نجاح الآفات وتق…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
تم دعم هذا العمل من قبل مؤسسة ساو باولو للأبحاث (FAPESP ، منحة 2017/00003-0). نحن ممتنون لتنسيق تحسين موظفي التعليم العالي (CAPES). نشكر الدكتور أنتوني ر. ويست والدكتور هاينز شتاينر والدكتور كوي ي. تسنغ على الدعم والتوجيه.
Materials
| 6-OHDA | Sigma Aldrich | H4381 | https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/h4381?lang=pt®ion=BR&cm_sp=Insite-_-caSrpResults_srpRecs_srpModel _6-ohda-_-srpRecs3-1 |
| 70% Alcohol | |||
| Ascorbic acid | Sigma Aldrich | 795437 | https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sial/795437?lang=pt®ion=BR&gclid= Cj0KCQjw4cOEBhDMARIsAA3XD RipyOnxOxkKAm3J1PxvIsvw09 _kfaS2jYcD9E5OyuHYr4n89kO 6yicaAot6EALw_wcB |
| Cotton | |||
| Drill or tap | |||
| Gauze | |||
| Hamilton syringe 50 uL | Hamilton | 80539 | https://www.hamiltoncompany.com/laboratory-products/syringes/80539 |
| Imipramine | Alfa Aeser | J63723 | https://www.alfa.com/pt/catalog/J63723/ |
| Infusion pump | Insight | EFF-311 | https://insightltda.com.br/produto/eff-311-bomba-de-infusao-2-seringas/ |
| Ketamine (Dopalen) | Ceva | https://www.ceva.com.br/Produtos/Lista-de-Produtos/DOPALEN | |
| Machine for trichotomy | |||
| Meloxicam (Maxicam 2% Ourofino) | Ourofino | https://terrazoo.com.br/produto/maxicam-injetavel-2-50ml-ouro-fino/ | |
| Metal Disposal | |||
| Paper towels | |||
| Pentabiotic | Zoetis | https://www.zoetis.com.br/pentabiotico-veterinario.aspx | |
| Plastic waste garbage can | |||
| Poly-antibiotic | Pentabiotic (Wealth) | ||
| Povidone-iodine | |||
| Scalpel and blades | |||
| Scissors | |||
| Scraper | |||
| Stereotaxic apparatus | Insight | EFF-331 | https://insightltda.com.br/produto/eff-331-estereotaxico-1-torre/ |
| Sterile saline solution | |||
| Swabs | |||
| Temperature probe | |||
| Timer | |||
| Tweezers | |||
| Xylazine (Anasedan) | Ceva | https://www.ceva.com.br/Produtos/Lista-de-Produtos/ANASEDAN |
References
- Gibb, W. R., Lees, A. J. The relevance of the Lewy body to the pathogenesis of idiopathic Parkinson’s disease. Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 51 (6), 745-752 (1988).
- Albin, R. L., Young, A. B., Penney, J. B. The functional anatomy of basal ganglia disorders. Trends in Neurosciences. 12 (10), 366-375 (1989).
- Dexter, D. T., Jenner, P. Parkinson disease: from pathology to molecular disease mechanisms. Free Radical Biology & Medicine. 62, 132-144 (2013).
- Obeso, J. A., et al. Functional organization of the basal ganglia: therapeutic implications for Parkinson’s disease. Movement Disorders. 23, 548-559 (2008).
- Tysnes, O. -. B., Storstein, A. Epidemiology of Parkinson’s disease. Journal of Neural Transmission. 124 (8), 901-905 (2017).
- Karachi, C., et al. Clinical and anatomical predictors for freezing of gait and falls after subthalamic deep brain stimulation in Parkinson’s disease patients. Parkinsonism & Related Disorders. 62, 91-97 (2019).
- Sudhakar, V., Richardson, R. M. Gene therapy for Parkinson’s disease. Progress in Neurological Surgery. 33, 253-264 (2018).
- Baizabal-Carvallo, J. F., et al. Combined pallidal and subthalamic nucleus deep brain stimulation in secondary dystonia-parkinsonism. Parkinsonism & Related Disorders. 19 (5), 566-568 (2013).
- Morizane, A. Cell therapy for Parkinson’s disease with induced pluripotent stem cells. Clinical Neurology. 59 (3), 119-124 (2019).
- Jankovic, J., Tan, E. K. Parkinson’s disease: etiopathogenesis and treatment. Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. 91 (8), 795-808 (2020).
- Cenci, M. A., Whishaw, I. Q., Schallert, T. Animal models of neurological deficits: how relevant is the rat. Nature Reviws. Neuroscience. 3 (7), 574-579 (2002).
- Tronci, E., Francardo, V. Animal models of l-DOPA-induced dyskinesia: the 6-OHDA-lesioned rat and mouse. Journal of Neural Transmission. 125 (8), 1137-1144 (2018).
- Lane, E., Dunnett, S. Animal models of Parkinson’s disease and L-dopa induced dyskinesia: How close are we to the clinic. Psychopharmacology. 199 (3), 303-312 (2008).
- Meredith, G. E., Sonsalla, P. K., Chesselet, M. -. F. Animal models of Parkinson’s disease progression. Acta Neuropathologica. 115 (4), 385-398 (2008).
- Kin, K., Yasuhara, T., Kameda, M., Date, I. Animal models for Parkinson’s disease research: trends in the 2000s. International Journal of Molecular Sciences. 20 (21), 5402 (2019).
- Schober, A. Classic toxin-induced animal models of Parkinson’s disease: 6-OHDA and MPTP. Cell and Tissue Research. 318 (1), 215-224 (2004).
- Smith, G. A., Isacson, O., Dunnett, S. B. The search for genetic mouse models of prodromal Parkinson’s disease. Experimental Neurology. 237 (2), 267-273 (2012).
- Langston, J. W., Ballard, P., Tetrud, J. W., Irwin, I. Chronic Parkinsonism in humans due to a product of meperidine-analog synthesis. Science. 219 (4587), 979-980 (1983).
- Langston, J. W., Irwin, I., Langston, E. B., Forno, L. S. 1-Methyl-4-phenylpyridinium ion (MPP+): identification of a metabolite of MPTP, a toxin selective to the substantia nigra. Neuroscience Letters. 48 (1), 87-92 (1984).
- Ramsay, R. R., Salach, J. I., Singer, T. P. Uptake of the neurotoxin 1-methyl-4-phenylpyridine (MPP+) by mitochondria and its relation to the inhibition of the mitochondrial oxidation of NAD+-linked substrates by MPP+. Biochemical and Biophysical Research Communications. 134 (2), 743-748 (1986).
- Ungerstedt, U. 6-Hydroxy-dopamine induced degeneration of central monoamine neurons. European Journal of Pharmacology. 5 (1), 107-110 (1968).
- Blandini, F., Armentero, M. -. T. Animal models of Parkinson’s disease. FEBS Journal. 279 (7), 1156-1166 (2012).
- McDowell, K., Chesselet, M. -. F. Animal models of the non-motor features of Parkinson’s disease. Neurobiology of Disease. 46 (3), 597-606 (2012).
- Luthman, J., Fredriksson, A., Sundström, E., Jonsson, G., Archer, T. Selective lesion of central dopamine or noradrenaline neuron systems in the neonatal rat: motor behavior and monoamine alterations at adult stage. Behavioural Brain Research. 33 (3), 267-277 (1989).
- Casarrubea, M., et al. Effects of Substantia Nigra pars compacta lesion on the behavioral sequencing in the 6-OHDA model of Parkinson’s disease. Behavioural Brain Research. 362, 28-35 (2019).
- Wang, R., Shao, M. L-DOPA-elicited abnormal involuntary movements in the rats damaged severely in substantia nigra by 6-hydroxydopamine. Annals of Palliative Medicine. 9 (3), 947-956 (2020).
- Hernandez-Baltazar, D., Mendoza-Garrido, M. E., Martinez-Fong, D. Activation of GSK-3β and caspase-3 occurs in Nigral dopamine neurons during the development of apoptosis activated by a striatal injection of 6-hydroxydopamine. PLoS One. 8 (8), 70951 (2013).
- Bagga, V., Dunnett, S. B., Fricker, R. A. The 6-OHDA mouse model of Parkinson’s disease – Terminal striatal lesions provide a superior measure of neuronal loss and replacement than median forebrain bundle lesions. Behavioural Brain Research. 288, 107-117 (2015).
- Iancu, R., Mohapel, P., Brundin, P., Paul, G. Behavioral characterization of a unilateral 6-OHDA-lesion model of Parkinson’s disease in mice. Behavioural Brain Research. 162 (1), 1-10 (2005).
- Boix, J., Padel, T., Paul, G. A partial lesion model of Parkinson’s disease in mice – Characterization of a 6-OHDA-induced medial forebrain bundle lesion. Behavioural Brain Research. 284, 196-206 (2015).
- Blesa, J., Phani, S., Jackson-Lewis, V., Przedborski, S. Classic and new animal models of Parkinson’s disease. Journal of Biomedicine & Biotechnology. 2012, 845618 (2012).
- Breit, S., et al. Effects of 6-hydroxydopamine-induced severe or partial lesion of the nigrostriatal pathway on the neuronal activity of pallido-subthalamic network in the rat. Experimental Neurology. 205 (1), 36-47 (2007).
- More, S. V., Kumar, H., Cho, D. -. Y., Yun, Y. -. S., Choi, D. -. K. Toxin-induced experimental models of learning and memory impairment. International Journal of Molecular Sciences. 17 (9), 1447 (2016).
- Schwarting, R. K. W., Huston, J. P. The unilateral 6-hydroxydopamine lesion model in behavioral brain research. Analysis of functional deficits, recovery and treatments. Progress in Neurobiology. 50 (2-3), 275-331 (1996).
- Olsson, M., Nikkhah, G., Bentlage, C., Björklund, A. Forelimb akinesia in the rat Parkinson model: differential effects of dopamine agonists and nigral transplants as assessed by a new stepping test. Journal of Neuroscience. 15 (5), 3863-3875 (1995).
- Lindgren, H. S., Rylander, D., Ohlin, K. E., Lundblad, M., Cenci, M. A. The ‘motor complication syndrome’ in rats with 6-OHDA lesions treated chronically with l-DOPA: Relation to dose and route of administration. Behavioural Brain Research. 177 (1), 150-159 (2007).
- Björklund, A., Dunnett, S. B. The amphetamine induced rotation test: A re-assessment of its use as a tool to monitor motor impairment and functional recovery in rodent models of Parkinson’s disease. Journal of Parkinson’s Disease. 9 (1), 17-29 (2019).
- Chang, J. W., Wachtel, S. R., Young, D., Kang, U. J. Biochemical and anatomical characterization of forepaw adjusting steps in rat models of Parkinson’s disease: studies on medial forebrain bundle and striatal lesions. Neurosciences. 88 (2), 617-628 (1999).
- Jayasinghe, V. R., Flores-Barrera, E., West, A. R., Tseng, K. Y. Frequency-dependent corticostriatal disinhibition resulting from chronic dopamine depletion: role of local striatal cGMP and GABA-AR signaling. Cerebral Cortex. 27 (1), 625-634 (2017).
- Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury. Neuropharmacology. 39 (5), 777-787 (2000).
- Paxinos, G., Watson, C. . The rat brain in stereotaxic coordinates. , (2006).
- Padovan-Neto, F. E., et al. Selective regulation of 5-HT1B serotonin receptor expression in the striatum by dopamine depletion and repeated L-DOPA treatment: relationship to L-DOPA-induced dyskinesias. Molecular Neurobiology. 57 (2), 736-751 (2020).
- Prasad, E. M., Hung, S. -. Y. Behavioral tests in neurotoxin-induced aAnimal models of Parkinson’s disease. Antioxidants. 9 (10), 1007 (2020).
- Lundblad, M., Picconi, B., Lindgren, H., Cenci, M. A. A model of L-DOPA-induced dyskinesia in 6-hydroxydopamine lesioned mice: Relation to motor and cellular parameters of nigrostriatal function. Neurobiology of Disease. 16 (1), 110-123 (2004).
- Masini, D., et al. A guide to the generation of a 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson’s disease for the study of non-motor symptoms. Biomedicines. 9 (6), 598 (2021).
- Francardo, V., et al. Impact of the lesion procedure on the profiles of motor impairment and molecular responsiveness to L-DOPA in the 6-hydroxydopamine mouse model of Parkinson’s disease. Neurobiology of Disease. 42 (3), 327-340 (2011).
- Thiele, S. L., Warre, R., Nash, J. E. Development of a unilaterally-lesioned 6-OHDA mouse model of Parkinson’s disease. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (60), e3234 (2012).
- Fish, R., Danneman, P., Brown, M., Karas, A. . Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals. , (2008).
- Buitrago, S., Martin, T. E., Tetens-Woodring, J., Belicha-Villanueva, A., Wilding, G. E. Safety and efficacy of various combinations of injectable anesthetics in BALB/c mice. Journal of the American Association for Laboratory Animal Sciences. 47 (1), 11-17 (2008).
- Struck, M. B., Andrutis, K. A., Ramirez, H. E., Battles, A. H. Effect of a short-term fast on ketamine-xylazine anesthesia in rats. Journal of the American Association for Laboratory Animal Sciences. 50 (3), 344-348 (2011).
- Jiron, J. M., et al. Comparison of isoflurane, ketamine-dexmedetomidine, and ketamine-xylazine for general anesthesia during oral procedures in rice rats (Oryzomys palustris). Journal of the American Association for Laboratory Animal Sciences. 58 (1), 40-49 (2019).
