यह प्रोटोकॉल टेप विधि को रेखांकित करता है कि अलग-अलग गहराई के एफएफपीई दाता ब्लॉकों का उपयोग करके मैन्युअल रूप से एक ऊतक माइक्रोएरे का निर्माण कैसे किया जाए।
ऊतक माइक्रोएरे (टीएमए) एक महत्वपूर्ण शोध उपकरण है जिसमें कई फॉर्मेलिन फिक्स्ड पैराफिन एम्बेडेड (एफएफपीई) नमूनों को एक एकल पैराफिन ब्लॉक में दर्शाया जा सकता है। यह विभिन्न दाता एफएफपीई ब्लॉकों के हित के क्षेत्र से निकाले गए ऊतक कोर का उपयोग करके और उन्हें एक एकल टीएमए पैराफिन ब्लॉक में व्यवस्थित करके प्राप्त किया जाता है। एक बार निर्माण के बाद, पूर्ण टीएमए के वर्गों का उपयोग इम्युनोहिस्टोकेमिस्ट्री, क्रोमोजेनिक, प्रतिदीप्ति इन सीटू संकरण (फिश) और आरएनए आईएसएच अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है ताकि प्रोटीन अभिव्यक्ति के साथ-साथ कई नमूनों में जीनोमिक और ट्रांसक्रिप्शनल परिवर्तनों का आकलन किया जा सके, इस प्रकार ऊतक के उपयोग को कम किया जा सके और अभिकर्मक लागत को कम किया जा सके। कई अलग-अलग टीएमए निर्माण तकनीकें हैं। सबसे आम निर्माण विधियों में से एक प्राप्तकर्ता विधि है, जो उसी लंबाई के कोर के साथ सबसे अच्छा काम करती है जिसके लिए 4 मिमी की न्यूनतम लंबाई की सिफारिश की जाती है। दुर्भाग्य से, नैदानिक प्रक्रिया के दौरान ऊतक ब्लॉकों को भारी उच्छेदन किया जा सकता है, जिसके परिणामस्वरूप अक्सर 4 मिमी से कम की “गैर-आदर्श” दाता ब्लॉक मोटाई होती है। वर्तमान लेख और वीडियो डबल-साइडेड चिपकने वाला टेप विधि पर ध्यान केंद्रित करते हैं; एक वैकल्पिक मैनुअल, कम लागत, उपयोग करने में आसान, और कम घनत्व (<50 कोर) टीएमए का निर्माण करने के लिए तेजी से विधि जो इन गैर-आदर्श दाता ब्लॉकों के साथ अत्यधिक संगत है। यह प्रोटोकॉल इस विधि का उपयोग करके टीएमए का निर्माण करने के तरीके पर एक चरण-दर-चरण मार्गदर्शिका प्रदान करता है, जिसमें पैथोलॉजिकल समीक्षा और निर्माण के बाद सत्यापन के महत्वपूर्ण महत्व पर ध्यान केंद्रित किया जाता है।
फॉर्मेलिन फिक्स्ड पैराफिन एम्बेडेड (एफएफपीई) ऊतकों का उपयोग रूपात्मक और इम्यूनोहिस्टोकेमिकल प्रोटीन अभिव्यक्तिअध्ययनों में बड़े पैमाने पर किया जाता है। हालांकि, खोज अनुसंधान के लिए अक्सर बड़ी संख्या में ऊतकों पर कई मार्करों की परीक्षा की आवश्यकता होती है, जो कीमती ऊतकों को समाप्त कर सकते हैं। 1 9 80 के दशक में पेश किया गया, ऊतक माइक्रोएरे (टीएमए) एक महत्वपूर्ण शोध उपकरण है जो कई अलग-अलग एफएफपीई ऊतक ब्लॉकों से ब्याज के छोटे अनुकरणीय क्षेत्रों को एक ही पैराफिन ब्लॉक में इकट्ठा करता है, जिससे कई ऊतक नमूनों की एक साथ परीक्षा की अनुमति मिलतीहै। इस प्रकार, टीएमए अत्यधिक कीमती, और अक्सर दुर्लभ, ऊतक के नमूनों के अत्यधिक उपयोग से बचते हैं, जबकि कई व्यक्तिगत नमूनों पर डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों के प्रदर्शन से जुड़ी लागतों को भी कम करते हैं।
टीएमए 5 के निर्माण के लिए कई अलग-अलग तकनीकें मौजूदहैं, जिनमें स्वचालित और अर्ध-मैनुअल दृष्टिकोण 6,7 शामिल हैं। इनमें से अधिकांश बाद के दृष्टिकोण प्राप्तकर्ता विधि का उपयोग करते हैं, जिसमें दाता ब्लॉकों से छिद्रित ऊतक कोर को प्रीकास्ट मोल्ड में डाला जाता है। हालांकि, यह अनुशंसा की जाती है कि “आदर्श” दाता ब्लॉक जो कम से कम 4 मिमी मोटे होते हैं, उनका उपयोग इस विधि 6,7 के लिए किया जाता है। दुर्भाग्य से, दाता ब्लॉक, विशेष रूप से वे जो अनुसंधान के लिए उपलब्ध कराए जाने से पहले नैदानिक नैदानिक उद्देश्यों के लिए बड़े पैमाने पर विभाजित किए गए हैं, अक्सर 4 मिमी से कम मोटे होते हैं, जो उन्हें प्राप्तकर्ता विधि का उपयोग करके टीएमए निर्माण में उपयोग से बाहर कर सकते हैं, यदि 4 मिमी की गहराई प्राप्त करने के लिए फिर से एम्बेड करना संभव या वांछनीय नहीं है। इसके अलावा, ये प्रक्रियाएं अक्सर एक बेंचटॉप मैनुअल ऊतक माइक्रोएरेयर या महंगे स्वचालित उपकरणों का उपयोग कर सकती हैं जो औसत अनुसंधान प्रयोगशाला के लिए आसानी से सुलभ या सस्ती नहीं हैं। इसके विपरीत, डबल-साइडेड चिपकने वाला टेप विधि या टेप विधि, एक मैनुअल टीएमए निर्माण विधि है जो गैर-आदर्श दाता ब्लॉकों के साथ संगत है जो सस्ती, व्यापक रूप से उपलब्ध, पुन: प्रयोज्य या डिस्पोजेबल हाथ से आयोजित ऊतक माइक्रोएरेयर 8,9,10 का उपयोग करती है। यह विधि उल्टे सीधे कोर के चारों ओर ब्लॉक कास्टिंग द्वारा निर्माण प्रक्रिया को उलट देती है जो पूरा होने पर कोर लंबाई के बावजूद टीएमए के शीर्ष के साथ फ्लश होती है। नतीजतन, सभी नमूने टीएमए वर्गों में मौजूद होते हैं जब पहली बार विभाजित किया जाता है, जो कन्स्ट्रक्टर को शुरुआत से ही इन गैर-आदर्श ब्लॉकों में से सबसे अधिक प्राप्त करने की अनुमति देता है। इस प्रकार, टेप विधि गैर-विशेष अनुसंधान प्रयोगशालाओं के लिए एक लागत प्रभावी और व्यवहार्य विकल्प का प्रतिनिधित्व करती है।
टीएमए निर्माण इसकी चुनौतियों के बिना नहीं है, और कोर निकालने के लिए ऊतक क्षेत्रों का चयन करते समय सावधानी बरती जानी चाहिए, जिससे पैथोलॉजिकल समीक्षा टीएमए निर्माण प्रक्रिया11,12 का एक महत्वपूर्ण हिस्सा बन जाती है। इस प्रकार, इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य टीएमए निर्माण से जुड़े कुछ पैथोलॉजिकल नुकसानों को उजागर करके टीएमए निर्माण में पैथोलॉजिकल समीक्षा के गहन महत्व को रेखांकित करना है जो टीएमए का निर्माण और उपयोग करने वाले व्यक्तियों को पता होना चाहिए, और क्यों पैथोलॉजी समीक्षा को टीएमए ब्लॉक के जीवनकाल के माध्यम से जारी रखना चाहिए।
यह प्रोटोकॉल एड्स और कैंसर नमूना संसाधन (ACSR) तकनीकी कोर प्रयोगशाला में उठाए गए कदमों को रेखांकित करता है ताकि टेप विधि का उपयोग करके गैर-आदर्श दाता ब्लॉकों से टीएमए का निर्माण किया जा सके; जहां ACSR एक एनआईएच वित्त पोषित biorepository एचआईवी कैंसर के ऊतकों से biospecimens के संग्रह और न्यायसंगत वितरण के लिए समर्पित है ताकि एचआईवी दुर्दमता अनुसंधान को बढ़ावा देने के लिए।
टीएमए निर्माण प्रक्रिया के सबसे महत्वपूर्ण घटकों में से एक एफएफपीई दाता ब्लॉकों की पैथोलॉजी समीक्षा है जिसमें से टीएमएकोर प्राप्त किए जाएंगे। समीक्षा के दौरान, एक बोर्ड-प्रमाणित रोगविज्ञानी प्रत्येक दाता ब्लॉक से एक प्रतिनिधि एच एंड ई दाग ऊतक अनुभाग की जांच करता है। यह आवश्यक है कि एच एंड ई को एक ताजा कटे हुए ऊतक अनुभाग का उपयोग करके उत्पन्न किया जाए ताकि यह अपने संबंधित दाता ब्लॉक का सबसे अच्छा प्रतिनिधित्व हो। पुराने एच एंड ई के उपयोग की सिफारिश नहीं की जाती है कि एफएफपीई ऊतक 3-आयामी संरचनाएं हैं जिनके ऊतक प्रोफ़ाइल ब्लॉक गहराई और व्यापक सेक्शनिंग के साथ काफी बदल सकते हैं; यह तब से हो सकता है जब से एच एंड ई उत्पन्न किया गया था, संभावित रूप से एफएफपीई ब्लॉक के अपने प्रतिनिधित्व को गलत बना रहा है। समीक्षा प्रक्रिया उपयुक्त मामलों के चयन और ऊतक क्षेत्रों की पहचान के लिए आवश्यक है जहां से कोर प्राप्त किया जाना चाहिए, साथ ही उन क्षेत्रों की पहचान भी है जिन्हें कोर एकत्र करते समय टाला जाना चाहिए। पैथोलॉजिकल समीक्षा की अनुपस्थिति में, अनुपयुक्त ऊतकों को शामिल करने की संभावना काफी बढ़ जाती है। इस तरह के ऊतकों को शामिल करने से निर्मित टीएमए को अप्रभावी और अपने इच्छित उद्देश्य के लिए अनुपयुक्त बनाने की क्षमता होती है। महत्वपूर्ण रूप से, अनजाने में इस तरह के अप्रभावी टीएमए का उपयोग करने से झूठे और भ्रामक डेटा के परिणामस्वरूप भारी क्षमता होती है। यह ज्ञान के साथ संयुक्त है कि एफएफपीई ऊतकों की प्रोफ़ाइल, और इस प्रकार उनके व्युत्पन्न कोर, बढ़ती गहराई के साथ काफी बदल सकते हैं, एक निर्मित टीएमए ब्लॉक के जीवनकाल में निरंतर पैथोलॉजी समीक्षा के महत्व पर प्रकाश डाला गया है। आदर्श रूप से एच एंड ई को प्रत्येक 15वें या 20वें अनुभाग का उपयोग करके उत्पन्न किया जाना चाहिए ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि कोर के ऊतक प्रोफाइल में कोई भी परिवर्तन कैप्चर और रिकॉर्ड किया जाता है। कम से कम, एच एंड ई को इन संभावित परिवर्तनों की निगरानी के लिए एक परियोजना की शुरुआत और अंत में उत्पन्न और समीक्षा की जानी चाहिए। इन बिंदुओं और एक शोध उपकरण के रूप में टीएमए के महत्व के प्रकाश में, यह आवश्यक है कि पैथोलॉजिकल समीक्षा टीएमए निर्माण प्रक्रिया में और टीएमए ब्लॉक के पूरे जीवन में दृढ़ता से एम्बेडेड हो।
एफएफपीई ब्लॉकों को अक्सर अनुसंधान उद्देश्यों के लिए जारी किए जाने से पहले नियमित नैदानिक प्रसंस्करण के दौरान बड़े पैमाने पर विभाजित किया जाता है। नतीजतन, दाता ब्लॉक गहराई और इस प्रकार दाता ब्लॉक कोर लंबाई अक्सर 4 मिमी के प्राप्तकर्ता विधि आदर्श से कम होती है। यहां हमने दिखाया है कि टेप विधि निर्माण प्रोटोकॉल का उपयोग करके टीएमए का निर्माण कैसे किया जाए, जिसका मुख्य लाभ गैर-आदर्श एफएफपीई ऊतक ब्लॉकों से कोर के साथ इसकी संगतता है। यद्यपि टेप विधि महान अनुसंधान मूल्य की है और टीएमए ब्लॉकों के निर्माण के लिए एक सस्ती, सुविधाजनक और सुलभ विधि प्रदान करती है, यह इसकी चुनौतियों और सीमाओं के बिना नहीं है। स्वचालित और मैनुअल प्राप्तकर्ता दोनों विधियों की तुलना में, जो एकल टीएमए ब्लॉक में कोर के 100-1,000 को समायोजित कर सकते हैं, टेप विधि9 का उपयोग करके निर्मित टीएमए के लिए अधिकतम 40 कोर की सिफारिश की जाती है। एक और सीमा निर्माण में आसानी के संबंध में है। प्राप्तकर्ता विधि में, छिद्रित कोर को केवल एक प्रीकास्ट मोल्ड में डाला जाता है, जो प्रत्येक कोर को अपने स्वयं के व्यक्तिगत रूप से अच्छी तरह से एनकैस करके कोर स्थिरता प्रदान करता है, जिससे कोर माइग्रेशन को रोका जा सकता है और साथ ही अत्यधिक नियमित कोर प्लेसमेंट और अलगाव को बढ़ावा दियाजाता है। इसके अलावा, प्राप्तकर्ता विधि पूरी तरह से मैनुअल, अर्ध-मैनुअल और पूरी तरह से स्वचालित होने की वैकल्पिक सुविधा प्रदान करती है। इसके विपरीत, मैनुअल टेप विधि को सुई लेने का उपयोग करके हाथ से प्रत्येक कोर के सावधान, कोमल प्लेसमेंट की आवश्यकता होती है। यद्यपि टेप विधि में एक प्रीकास्ट मोल्ड की अनुपस्थिति प्राप्तकर्ता विधि के साथ अनुभव किए गए अत्यधिक नियमित प्लेसमेंट और अलगाव को रोकती है, इस कमी को एक चेकर्ड ग्रिड को शामिल करने के माध्यम से दूर किया जाता है। यह महत्वपूर्ण है कि चेकर्ड ग्रिड को ब्लॉक-एज प्लेसमेंट से बचने के लिए धातु ट्रे के केंद्र में चिपकाया जाता है, जो कोर को जगह में रखने वाले अपर्याप्त पैराफिन होने पर कोर हानि के जोखिम को बढ़ाता है। यह भी ध्यान दिया जाना चाहिए कि प्राप्तकर्ता विधि के साथ संभव छोटे कोर पृथक्करणों को मैनुअल कोर प्लेसमेंट के कारण टेप विधि के साथ प्राप्त नहीं किया जा सकता है और आसन्न कोर के बीच फिट होने के लिए सुई लेने की आवश्यकता है। कोर को सबसे छोटी सतह क्षेत्र या डीएसएसटी कवर ग्रिड से संपर्क करने वाले कोर के पदचिह्न के साथ एक फ्रीस्टैंडिंग खड़े फैशन में रखा जाता है। यह सेटअप प्राप्तकर्ता विधि की तुलना में काफी कम कोर स्थिरता प्रदान करता है और पिघले हुए पैराफिन डालते समय कोर टॉपलिंग और या माइग्रेशन के लिए एक बढ़ाया जोखिम प्रदान करता है। दरअसल, प्रोटोकॉल में सबसे महत्वपूर्ण चरणों में से एक पिघला हुआ पैराफिन डाल रहा है। यह आवश्यक है कि यह ओवन से हटाने पर जल्दी से किया जाता है ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि पैराफिन पूरी तरह से तरल है और यह कि डालने को कम से कम अशांति के साथ धीरे से किया जाता है। दिलचस्प बात यह है कि चेन एट अल ने एक अत्यधिक उपन्यास सहायक उपकरण विकसित किया, जो 7 x 11 समान रूप से वितरित 2 मिमी व्यास के छेद के साथ एक स्टेंसिल के समान है, जिसे प्राप्तकर्ता ब्लॉक बनाते समय सुइयों का मार्गदर्शन करने के लिए एक खाली पैराफिन ब्लॉक के शीर्ष पर रखा जाता है और जब दाता ब्लॉक कोर23 सम्मिलित किया जाता है। यद्यपि प्राप्तकर्ता ब्लॉक निर्माण में सहायता के लिए डिज़ाइन किया गया है, इस तरह के डिवाइस को आसानी से प्लेसमेंट का मार्गदर्शन करने, अलगाव को विनियमित करने और निर्माण प्रक्रिया के दौरान कोर स्थिरता बढ़ाने के लिए टेप विधि के लिए अनुकूलित किया जा सकता है।
कोर स्थिरता के सबसे महत्वपूर्ण प्रभावकों में से एक टेप विधि टीएमए में शामिल कोर की संख्या है। ऐसा इसलिए है क्योंकि जैसे-जैसे कोर की संख्या बढ़ती है, कोर का व्यास कोर की बढ़ती संख्या को समायोजित करने के लिए कम होना चाहिए, जो बदले में डीएसएसटी का पालन करने वाले कोर पदचिह्न को कम करता है। टेप विधि टीएमए निर्माण के लिए 1 मिमी के न्यूनतम कोर व्यास की सिफारिश की जाती है, क्योंकि हमने पाया है कि छोटे व्यास वाले कोर विशेष रूप से अस्थिर होते हैं और बहुत कोमल पैराफिन डालने के साथ भी टॉपलिंग के लिए प्रवण होते हैं। दो अलग-अलग इन-हाउस तरीकों की जांच करने वाले एक हालिया अध्ययन में 16 जी सुइयों (1.1 मिमी के कोर व्यास) और 4 मिमी व्यास के पंच का उपयोग किया गया था, जिसमें 1.1 मिमी (26.5%) के साथ पर्याप्त ऊतक नुकसान का अनुभव हुआ था, लेकिन 4 मिमी कोर24 नहीं। यह इंगित करने के लिए प्रतीत होता है कि छोटे कोर के साथ काम करने के लिए समस्याग्रस्त हो सकते हैं और न केवल निर्माण के दौरान। इसके अलावा, छोटे व्यास मूल दाता ब्लॉक के साथ-साथ बड़े कोर का प्रतिनिधित्व नहीं कर सकते हैं, जिससे पैथोलॉजिकल व्याख्या मुश्किल हो जाती है और गलत दाता ऊतक प्रतिनिधित्व की संभावना बढ़ जाती है।
अभिविन्यास ब्लॉकों को शामिल करना और प्लेसमेंट टीएमए निर्माण में गहरा महत्व का है। हालांकि, यह टेप विधि निर्मित टीएमए के लिए विशेष महत्व का है। यह इस तथ्य से उपजा है कि टेप विधि निर्माण प्रक्रिया को उलट देती है जिससे स्थानिक विचलन का खतरा बढ़ जाता है। हम प्रत्येक ब्लॉक में तीन ओरिएंटेशन कोर तक शामिल करने की सलाह देते हैं, और ब्लॉक को सर्वोत्तम उन्मुख करने के लिए उन्हें नमूना कोर से दूर रखा जाता है। अभिविन्यास कोर ऊतक ब्लॉकों से लिए गए कोर हो सकते हैं जिनमें निर्मित टीएमए या ऊतक-मुक्त-रंगीन अभिविन्यास उपकरण21 के विषय से स्पष्ट रूप से अलग-अलग ऊतक होते हैं, जहां उत्तरार्द्ध गैर-रोगविज्ञानियों के लिए विशेष रूप से सहायक होता है। गैर-नियमित मैट्रिक्स पैटर्न वाले कोर प्लेसमेंट के साथ संयुक्त, अभिविन्यास कोर विचलन के लिए जोखिम को कम करते हैं।
टेप और प्राप्तकर्ता विधियों का उपयोग करके निर्मित टीएमए के बीच कोर लंबाई में स्पष्ट अंतर निर्माण विधि का चयन करते समय निर्णय लेने की प्रक्रिया में दाता ब्लॉक गहराई को शामिल करने से उपजा है। यहां उल्लिखित प्रोटोकॉल एक थ्रेशोल्ड को नियोजित करता है जहां टीएमए का निर्माण टेप और प्राप्तकर्ता विधियों का उपयोग करके किया जाता है जब दाता ब्लॉकों में क्रमशः <4 मिमी और 4 मिमी की गहराई होती है। यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि निर्माण विधि विकल्प में दाता ब्लॉक गहराई को शामिल करना सार्वभौमिक नहीं है। यद्यपि टीएमए के लिए दाता ब्लॉक की गहराई के बावजूद या तो विधि का उपयोग करके निर्माण करना संभव है, लंबे कोर टेप विधि का उपयोग करके टीएमए निर्माण के दौरान प्लास्टिक के कैसेट के प्लेसमेंट के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं, और या गिरा या झुकाए जा सकते हैं। निर्णय लेने की प्रक्रिया में मानदंडों को शामिल करने या छोड़ने का विकल्प प्रयोगशाला, लागत और वांछित अंतिम उत्पाद के लिए उपलब्ध सुविधाओं पर निर्भर करता है। इस प्रोटोकॉल के मापदंडों के तहत, स्लाइड माउंटेड टीएमए अनुभागों की संख्या जो टेप विधि निर्मित टीएमए से प्राप्त की जा सकती है, प्राप्तकर्ता विधि निर्मित टीएमए से प्राप्त होने वाली तुलना में काफी कम है। यद्यपि दाता ब्लॉक की गहराई को बढ़ाने और उन्हें प्राप्तकर्ता विधि के साथ संगत बनाने के लिए एफएफपीई ऊतकों को फिर से ब्लॉक करना संभव है, फिर से ब्लॉक के भीतर एक ही ऊतक अभिविन्यास प्राप्त करने की संभावना कम है। बदले में, इसके लिए एक पूर्ण-चेहरा अनुभाग प्राप्त करने के लिए व्यापक ब्लॉक की आवश्यकता हो सकती है, जिसमें संभवतः महत्वपूर्ण ऊतक हानि शामिल होगी। ब्लॉक फेसिंग के बाद, एक टेप विधि का निर्माण किया गया टीएमए सभी कोर के साथ लगभग 50 स्लाइड माउंटेड टीएमए वर्गों की पैदावार करता है। हालांकि, सटीक संख्या ब्लॉक से ब्लॉक में भिन्न होगी और टीएमए के निर्माण के लिए उपयोग किए जाने वाले कोर की लंबाई और कटे हुए वर्गों की मोटाई (5 μm बनाम 4 μm) पर निर्भर करती है। इसके अलावा, यह भी ध्यान दिया जाना चाहिए कि उनकी अलग-अलग कोर लंबाई के कारण, कोर अलग-अलग समय पर समाप्त हो जाएंगे क्योंकि टीएमए को उत्तरोत्तर विभाजित किया गया है; एक विशेषता है कि निरंतर रोग की समीक्षा के लिए की आवश्यकता reemphasizes.
यद्यपि प्राप्तकर्ता विधि टेप विधि पर महत्वपूर्ण लाभ और लाभ प्रदान करती है, जिसमें कम थकाऊ और अधिक त्वरित निर्माण प्रक्रियाएं शामिल हैं, टेप विधि का उद्देश्य अनुभवी उच्च थ्रूपुट प्रयोगशालाओं के लिए नहीं है। इसका उद्देश्य औसत प्रयोगशाला है, विशेष रूप से संसाधन सीमित सेटिंग्स में, चर गहराई के दाता ब्लॉकों तक पहुंच के साथ, लेकिन टीएमए निर्माण सेवाओं के लिए नहीं। हालांकि, भविष्य के अनुप्रयोगों को उच्च थ्रूपुट प्रयोगशालाओं में पात्र नमूनों के पूल को बढ़ाने और दाता ब्लॉकों को फिर से अवरुद्ध करने की आवश्यकता को समाप्त करने के लिए इस विधि के स्वचालन को देखा जा सकता है। अंत में, वर्णित टीएमए टेप विधि निर्माण प्रोटोकॉल को महंगे उपकरणों की आवश्यकता के बिना गैर-विशेष प्रयोगशालाओं में आसानी से स्थापित किया जा सकता है। हालांकि, यह सलाह दी जाती है कि नए उपयोगकर्ताओं को बिना किसी मूल्य के एफएफपीई ऊतक ब्लॉकों को नियोजित करना चाहिए, ऊतक मुक्त रंगीन अभिविन्यास उपकरण21 या यहां तक कि रंगीन पैराफिन ब्लॉकों को बिना किसी ऊतक के पहले ऊतक के साथ पहले से ही उपयोग करने के लिए खुद को टीएमए निर्माण में आगे बढ़ने से पहले खुद को परिचित करने के लिए कीमती ऊतकों का उपयोग करके टीएमए निर्माण के लिए आगे बढ़ने से पहले। यद्यपि उनका निर्माण संभावित नुकसान के बिना नहीं है, जो टीएमए ब्लॉकों का निर्माण और उपयोग करने वाले दोनों लोगों को पता होना चाहिए, यह प्रतीत होता है कि अनपॉलिश्ड “होममेड” टीएमए निर्माण विधि अनुसंधान के लिए उच्च गुणवत्ता, जैविक रूप से प्रासंगिक टीएमए उत्पन्न कर सकती है। दरअसल, टेप विधि से उपजी टीएमए अनुभागों का निर्माण टीएमए एसीएसआर बायोरैपोसिटरी में सबसे अधिक अनुरोधित ऊतक नमूनों में से एक है।
The authors have nothing to disclose.
इस काम के लिए धन एनआईएच द्वारा वित्त पोषित एड्स और कैंसर नमूना संसाधन (एसीएसआर) बायोरैपोसिटरी (www.acsr1.com), यूएम 1सीए 181255 द्वारा प्रदान किया गया था।
BX51 microscope | Olympus | BX51 | |
cellSens imaging software | Olympus | x | |
Cotton Balls | FisherBrand | 22-456-880 | |
Double sided tape (removable) | Scotch | 383534 | |
DP72 camera | Olympus | DP72 | |
Economy Lab Oven | FisherBrand | 13246516GAQ | |
Forceps | Various | x | |
Formula "R" (paraffin) | Leica | 3801450 | |
Glass microscope slides | FisherBrand | 12-550-15 | |
Low Profile Micotome Blades | Accu-Edge | 4689 | |
Microtome | Leica | RM2265 | |
Permanent marker | Electron Microscope Sciences | 72109-12 | |
Quick Ray manual tissue microarrayer set | Unitma | UT06 | |
Stainless-Steel Base Molds | FisherBrand | 22-038-209 | |
Tissue Cassette Cooling Tray | Electron Microscope Sciences | 63314 | |
Tissue Processing/Embedding Cassette | FisherBrand | 15-182-701E | |
Waterbath | Triangle Biomedical Sciences | TFB-120 | |
Wooden stick | FisherBrand | 22363158 |