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Article de méthode

Méthodologie pour tester les agents de contrôle et les insecticides contre l’agrile du café Hypothenemus hampei

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DOI :

10.3791/63694

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23 mars 2022

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Dans cet article

Résumé

Une méthode utilisant des fruits de café vert (GF) a été développée pour tester la toxicité des insecticides contre l’agrile du café (CBB). Des insecticides ou des substances toxiques ont été appliqués sur des GF désinfectés avant ou après l’infestation de CBB. La mortalité, la répulsion et la capacité de reproduction des insectes, en plus d’autres paramètres, ont été évaluées.

Résumé

Avant de recommander des insecticides pour traiter l’agrile du café (CBB) Hypothenemus hampei, il est utile de connaître la mortalité et la répulsion de ces insecticides contre les insectes adultes ou leur impact sur la production reproductive. Cependant, les méthodes actuellement disponibles évaluent uniquement la mortalité adulte, ce qui limite la sélection de nouveaux insecticides ayant un mode d’action différent. Dans ce travail, différentes méthodes expérimentales ont été examinées pour identifier les divers effets sur le CBB dans des conditions de laboratoire. Pour cela, les fruits du café vert (GF) ont été collectés et désinfectés par immersion dans une solution d’hypochlorite de sodium suivie d’une irradiation par la lumière UV. En parallèle, les adultes CBB d’une colonie ont été désinfectés par immersion dans une solution d’hypochlorite de sodium. Pour évaluer la protection des fruits (préinfestation), les fruits ont été placés dans des boîtes en plastique et les insecticides ont été appliqués. Ensuite, les adultes CBB ont été libérés à un taux de deux CBC par GF. Les GF ont été laissés dans des conditions contrôlées pour évaluer l’infestation de CBB et la survie après 1, 7, 15 et 21 jours. Pour évaluer l’efficacité de l’insecticide après une infestation de CBB (post-infestation), des adultes de CBB ont été relâchés dans les GF dans un rapport de 2:1 pendant 3 h à 21 °C. Les fruits infestés montrant des adultes CBB avec leur abdomen partiellement exposé ont été sélectionnés et placés dans des grilles de 96 puits, et les CBC forant dans les fruits ont été traités directement. Après 20 jours, les fruits ont été disséqués et les étapes biologiques CBB à l’intérieur de chaque fruit ont été enregistrées. Les GF ont servi de substrats qui imitent les conditions naturelles pour évaluer les insecticides toxiques, chimiques et biologiques contre le CBB.

Introduction

L’agrile des baies de café (CBB), Hypothenemus hampei, a été détecté pour la première fois en 1988 en Colombie et est depuis devenu l’espèce de ravageur la plus importante de la culture du café. Les femelles CBB quittent le fruit natal déjà fécondé, à la recherche de nouveaux fruits guidés par les produits chimiques volatils qu’elles émettent 1,2. Un cycle complet est accompli dans les 23 jours3 à une température de 25 °C. Le cycle commence avec la femelle fondatrice pénétrant dans la graine et pondant des œufs dans l’endosperme du fruit. Les larves écloses mangent la graine. ....

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Protocole

REMARQUE: Ce protocole traite de différentes méthodes pour identifier différents effets sur le CBB dans des conditions de laboratoire.

1. Collecte de fruits

  1. Cueillez des GF avec un âge de développement d’environ 120 à 150 jours après la floraison des arbres dans une plantation de café tôt le matin.

2. Désinfection des fruits20

  1. Apportez environ 300 GF au laboratoire. Sélectionnez des GF de taille uniforme et saines et retirez les pédoncules.
  2. Trempez les GF dans une solution de savon (2 mL de savon à vaisselle liquide dans....

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Résultats

Les résultats ont montré que les femelles CBB reconnaissaient les fruits, et en fonction des caractéristiques de la surface du fruit et des odeurs émises, les femelles CBB ont commencé à pénétrer ou à porter les fruits dans les 3 h à 21 °C.

L’effet d’un insecticide sur le CBB lorsqu’il est appliqué sur les fruits du café (procédure de préinfestation) après 24 h et au fil du temps est illustré à la figure 4. Les deux insecticides (émulsion d’alcaloïdes à 5% et 6%) .......

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Discussion

Dans ce protocole, la désinfection des fruits ainsi que des insectes sont des étapes critiques. Lorsque les fruits des champs sont utilisés en laboratoire, ils présentent fréquemment une contamination et une déshydratation élevées, car des micro-organismes et des acariens sont présents dans l’épiderme 7,15,16. Par conséquent, l’utilisation de fruits ou d’insectes qui ne sont pas désinfectés entraînera la mort des insectes en rai.......

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Déclarations de divulgation

Aucun des auteurs n’a de conflit d’intérêts à déclarer.

Remerciements

Les auteurs expriment leurs remerciements à la Fédération nationale des producteurs de café de Colombie, aux assistants du Département d’entomologie (Diana Marcela Giraldo, Gloria Patricia Naranjo), à la station expérimentale Naranjal et à Jhon Félix Trejos.

....

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Bécher avec bec verseur, forme basse 500 mLMARQUE PP
Shaker de paillasseNew Brunswick Scientific Innova 4000 Incubator Shaker
Savon liquide à vaisselle-AXIONColgate-PalmoliveAXION
Hood ; Station de débit laminaire horizontaleTerra Universal  ; Acier thermolaqué, 1930 mm L x 1118 mm P x 1619 mm H, 120 V (https://www.terrauniversal.com/hood-horizontal-laminar-flow-station-9620-64a.html)
Insects CBBBIOCAFE(http://avispitas.blogspot.com/p/biocafe.html).
Essuie-tout blanc à plis multiplesFamilia73551
Unité de pulvérisation préval  ; Preval MerckZ365556-1KThttps://www.sigmaaldrich.com/CO/es/product/sigma/z365556?gclid=Cj0KCQiAweaNBhDEARIsAJ
5hwbfZOy1TWGj6huatFtRQt
AzOyHe5-oBiKnOUK2T1exuuk
WwJLdvxkvsaAjoYEALw_wcB
Reversible Racks 96-WellheathrowscientificHEA2345Ahttps://www.heathrowscientific.com/reversible-racks-96-well-i-hea2345a
Lames de scalpel N 11MerckS2771-100EA
Poignées de scalpel N3MerckS2896-1EA
Hypochlorure de sodiumLa société cloroxStéréomicroscope Clorox
ZeissStemi 508https://www.zeiss.com/microscopy/int/products/stereo-zoom-microscopes/stemi-508.html
BR87826

Références

  1. Mendesil, E., et al. Semiochemicals used in host location by the coffee berry borer, Hypothenemus hampei. Journal of Chemical Ecology. 35 (8), 944-950 (2009).
  2. Jaramillo, J., et al. Coffee berry borer joins bark beetles in coffee klatch. PLoS....

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Réimpressions et autorisations

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