本方案描述了用于测量大鼠冠状动脉血管反应性的线肌图技术。
冠状动脉疾病(CAD)作为心血管系统疾病的重要事件,被广泛认为是动脉粥样硬化、心肌梗塞、心绞痛等严重威胁全世界人民生命和健康的罪魁祸首。然而,如何记录孤立血管的动态生物力学特征,长期以来一直困扰着人们。同时,精确定位和分离冠状动脉以测量 体外 动态血管张力变化已成为CAD药物开发的趋势。本方案描述了大鼠冠状动脉的宏观鉴定和微观分离。使用已建立的多肌图系统监测冠状动脉环沿血管直径的收缩和扩张功能。冠状动脉环张力测量的标准化和编程方案,从采样到数据采集,极大地提高了实验数据的可重复性,保证了生理、病理和药物干预后血管张力记录的真实性。
冠状动脉疾病(CAD)已被广泛认为和关注为一种典型和具有代表性的心血管疾病,是发达国家和发展中国家的主要死因1,2。作为正常心脏生理功能的血液和氧气供应途径,循环血液通过心肌表面的两个主要冠状动脉和血血管网络3,4进入并滋养心脏。冠状动脉中的胆固醇和脂肪沉积物切断了心脏的血液供应和血管系统的剧烈炎症反应,导致动脉粥样硬化,稳定型心绞痛,不稳定型心绞痛,心肌梗塞或心源性猝死5,6。响应冠状动脉的病理性狭窄,代偿性加速生理心跳通过增加左心室7的输出来满足心脏本身或身体重要器官的血液供应。如果长时间的冠状动脉狭窄不能及时缓解,心脏的某些区域可能会出现广泛的新血管8。目前,CAD的临床治疗往往采用药物溶栓或手术机械溶栓和外源性仿生血管旁路,用药频繁,手术残疾很大9.因此,冠状动脉功能研究生理活动仍是心血管疾病10项的急需突破口。
除了无线遥测系统,没有可用的技术手段来检测冠状动脉生理活动,它可以动态记录 体内 冠状动脉压力,血管张力,血氧饱和度和pH值11。因此,考虑到冠状动脉的质地隐秘性和复杂性,冠状动脉的准确识别和分离无疑是探索CAD 体外4多种机制的最佳选择。
一系列多肌图系统,特别是线材显微照片微血管张力检测仪(见 材料表),是一种非常成熟的市场化设备,用于记录小血管、淋巴管和支气管的 体外 组织张力变化,具有高精度和连续动态记录12的特点。该系统已被广泛用于记录直径为60μm至10mm的腔体结构的 体外 组织张力特性。线材显微照片平台的连续加热特性在很大程度上抵消了对不利外部环境的刺激。同时,气体混合物的恒定输入和pH值使我们能够在相似的生理状态下获得更准确的血管张力数据13。然而,考虑到大鼠冠状动脉解剖定位的复杂性(图1),其分离一直令人困惑,并限制了其对多样化心血管疾病和药物开发的机制的探索。因此,本方案详细介绍了大鼠冠状动脉的解剖位置和分离过程,随后在钢丝显微照片14的平台上进行张力测量。
冠状动脉微循环紊乱涉及广泛的CAD患者,已逐渐得到认可,并关注充分心肌灌注的基础。考虑到突发性冠心病和心血管疾病的严重并发症,及时药物预防和治疗对于CAD17的临床个体非常重要。不可避免地,冠状动脉解剖结构的保密性及其生理结构的复杂性严重制约了对CAD18、19、20、21、22<…
The authors have nothing to disclose.
这项工作得到了四川省科技计划重点研发项目(2022YFS0438)、国家自然科学基金(82104533)、中国博士后科学基金(2020M683273)和四川省科技厅(2021YJ0175)的支持。
Apigenin | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | 150731 | |
CaCl2 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A501330 | |
D-glucose | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A610219 | |
HEPES | Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China | S3872 | |
KCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100395 | |
KH2PO4 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100781 | |
LabChart Professional version 8.3 | ADInstruments, Australia | — | |
MgCl2·6H2O | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100288 | |
Multi myograph system | Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark | 620M | |
NaCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100241 | |
NaHCO3 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100865 | |
Steel wires | Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark | 400447 | |
U46619 | Sigma, USA | D8174 |