Préparation standardisée de l’anneau coronaire de rat et enregistrement en temps réel des changements de tension dynamiques le long du diamètre du vaisseau
Summary
Le présent protocole décrit la technique du myographe filaire pour mesurer la réactivité vasculaire de l’artère coronaire du rat.
Abstract
En tant qu’événement clé des maladies du système cardiovasculaire, la maladie coronarienne (CAD) a été largement considérée comme le principal responsable de l’athérosclérose, de l’infarctus du myocarde et de l’angine de poitrine, qui menacent gravement la vie et la santé des personnes du monde entier. Cependant, la façon d’enregistrer les caractéristiques biomécaniques dynamiques des vaisseaux sanguins isolés a longtemps intrigué les gens. Pendant ce temps, le positionnement précis et l’isolement des artères coronaires pour mesurer les changements de tension vasculaire dynamique in vitro sont devenus une tendance dans le développement de médicaments cad. Le présent protocole décrit l’identification macroscopique et la séparation microscopique des artères coronaires de rat. La fonction de contraction et de dilatation de l’anneau de l’artère coronaire le long du diamètre du vaisseau a été surveillée à l’aide du système multimyographe établi. Les protocoles standardisés et programmés de mesure de la tension de l’anneau coronaire, de l’échantillonnage à l’acquisition des données, améliorent considérablement la répétabilité des données expérimentales, ce qui garantit l’authenticité des enregistrements de tension vasculaire après une intervention physiologique, pathologique et médicamenteuse.
Introduction
La maladie coronarienne (CORONA) a été largement reconnue et préoccupante comme une maladie cardiovasculaire typique et représentative, étant la principale cause de décès dans les pays développés et en développement 1,2. En tant que voie d’approvisionnement en sang et en oxygène pour une fonction physiologique cardiaque normale, le sang circulant pénètre et nourrit le cœur par deux artères coronaires principales et un réseau vasculaire sanguin à la surface du myocarde 3,4. Les dépôts de cholestérol et de graisse dans les artères coronaires coupent l’approvisionnement en sang du cœur et la réponse inflammatoire violente du système vasculaire, provoquant une athérosclérose, une angine stable, une angine instable, un infarctus du myocarde ou une mort cardiaque subite 5,6. En réponse à la sténose pathologique des artères coronaires, le rythme cardiaque physiologique accéléré compensatoire satisfait l’apport sanguin du cœur lui-même ou des organes vitaux du corps en augmentant la sortie du ventricule gauche7. Si la sténose coronaire prolongée n’est pas soulagée à temps, de nouveaux vaisseaux sanguins étendus peuvent se développer dans certaines zones du cœur8. À l’heure actuelle, le traitement clinique de la coronaropathie adopte souvent une thrombolyse médicamenteuse ou une thrombolyse mécanique chirurgicale et un pontage vasculaire bionique exogène avec des médicaments fréquents et une grande invalidité chirurgicale9. Par conséquent, l’étude fonctionnelle de l’activité physiologique de l’artère coronaire est toujours une percée urgente pour les maladies cardiovasculaires10.
Il n’existe aucun moyen technique disponible pour détecter l’activité physiologique coronaire, à l’exception des systèmes de télémétrie sans fil, qui peuvent enregistrer dynamiquement la pression coronaire in vivo , la tension vasculaire, la saturation en oxygène du sang et les valeurs de pH11. Par conséquent, compte tenu du secret et de la complexité de la texture des artères coronaires, l’identification précise et l’isolement des artères coronaires sont sans aucun doute les meilleurs choix pour explorer de multiples mécanismes de la coronaropathie in vitro4.
Un système multimyographique en série, en particulier un détecteur de tension microvasculaire à micrographie filaire (voir Tableau des matériaux), est un dispositif commercialisable très mature pour enregistrer les changements de tension tissulaire in vitro de petites trompes vasculaires, lymphatiques et bronchiques avec les caractéristiques d’enregistrement dynamique continu et de haute précision12. Ledit système a été largement utilisé pour enregistrer les caractéristiques de tension tissulaire in vitro des structures de cavités d’un diamètre de 60 μm à 10 mm. Les caractéristiques de chauffage continu de la plate-forme de la micrographie filaire compensent largement la stimulation de l’environnement extérieur défavorable. Pendant ce temps, les entrées constantes du mélange gazeux et les valeurs de pH nous permettent d’obtenir des données de tension vasculaire plus précises dans un état physiologique similaire13. Cependant, compte tenu de la complexité de la localisation anatomique des artères coronaires du rat (Figure 1), son isolement a laissé perplexe et limité l’exploration par le mécanisme de maladies cardiovasculaires diversifiées et de développement de médicaments. Par conséquent, le présent protocole présente en détail la localisation anatomique et le processus de séparation de l’artère coronaire du rat, suivis d’une mesure de tension sur la plate-forme de la micrographiefilaire 14.
Protocol
Representative Results
Discussion
La perturbation de la microcirculation coronaire, qui implique un large éventail de patients atteints de coronaropathie, a été progressivement reconnue et a concerné la base d’une perfusion adéquate du myocarde. Compte tenu des complications graves des maladies coronariennes soudaines et des maladies cardiovasculaires, la prévention et le traitement rapides des médicaments sont extrêmement importants pour une personne clinique atteinte deCORONA 17. Inévitablement, le secret de l’anato…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par le projet de R&D clé du Plan provincial des sciences et de la technologie du Sichuan (2022YFS0438), la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (82104533), la Fondation chinoise postdoctorale pour les sciences (2020M683273) et le Département des sciences et technologies de la province du Sichuan (2021YJ0175).
Materials
| Apigenin | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | 150731 | |
| CaCl2 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A501330 | |
| D-glucose | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A610219 | |
| HEPES | Xiya Reagent Co., Ltd., Shandong, China | S3872 | |
| KCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100395 | |
| KH2PO4 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100781 | |
| LabChart Professional version 8.3 | ADInstruments, Australia | — | |
| MgCl2·6H2O | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100288 | |
| Multi myograph system | Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark | 620M | |
| NaCl | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100241 | |
| NaHCO3 | Sangon Biotech Co., Ltd., Shanghai, China | A100865 | |
| Steel wires | Danish Myo Technology, Aarhus, Denmark | 400447 | |
| U46619 | Sigma, USA | D8174 |
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