Modèle d’anévrisme de l’aorte abdominale de souris induit par le phosphate de calcium

Résumé

Ce protocole décrit un modèle murin d’anévrisme de l’aorte abdominale induit par le phosphate de calcium (AAA) pour étudier les caractéristiques pathologiques et les mécanismes moléculaires des AAA.

Résumé

Un anévrisme de l’aorte abdominale (AAA) est une maladie cardiovasculaire potentiellement mortelle qui survient dans le monde entier et se caractérise par une dilatation irréversible de l’aorte abdominale. Actuellement, plusieurs modèles murins AAA induits chimiquement sont utilisés, chacun simulant un aspect différent de la pathogenèse de l’AAA. Le modèle AAA induit par le phosphate de calcium est un modèle rapide et rentable par rapport aux modèles AAA induits par l’angiotensine II et l’élastase. L’application de cristaux de CaPO₄ à l’aorte de la souris entraîne une dégradation des fibres élastiques, une perte de cellules musculaires lisses, une inflammation et un dépôt de calcium associé à la dilatation aortique. Cet article présente un protocole standard pour le modèle AAA induit par CaPO₄. Le protocole comprend la préparation du matériel, l’application chirurgicale du CaPO₄ à l’adventice de l’aorte abdominale infrarénale, la récolte des aortes pour visualiser les anévrismes de l’aorte et les analyses histologiques chez la souris.

Introduction

Un anévrisme de l’aorte abdominale (AAA) est une maladie cardiovasculaire mortelle caractérisée par une dilatation permanente de l’aorte abdominale, avec des taux de mortalité élevés une fois la rupture survenue. L’AAA est associé au vieillissement, au tabagisme, au sexe masculin, à l’hypertension et à l’hyperlipidémie¹. Il a été démontré que plusieurs processus pathologiques contribuent à la formation d’AAA, notamment la protéolyse des fibres de la matrice extracellulaire, l’infiltration des cellules immunitaires et la perte des cellules musculaires lisses vasculaires. Actuellement, les mécanismes pathologiques de l’AAA restent insaisissables ....

Protocole

Les études sur les animaux ont été réalisées conformément aux directives du Comité institutionnel de soin et d’utilisation des animaux du Centre des sciences de la santé de l’Université de Pékin et ont été approuvées par le Comité d’éthique biomédicale de l’Université de Pékin (LA2015142). Toutes les souris pour la chirurgie ont été anesthésiées avec de l’isoflurane (1,5%-2%), et l’anesthésie a été soigneusement surveillée pour éviter la douleur ou l’inconfort pour les souris.

1. Préparation

1. Coupez des bandes de 0,3 cm de large de gants en caoutchouc sans poudre et de gaze.
2. Achetez des souris mâles C57BL....

Résultats

14 jours après l’application de CaPO₄, les souris mâles C57BL/6J ont été euthanasiées et leurs aortes ont été récoltées et nettoyées. La morphologie des aortes a été imagée pour visualiser la formation d’AAA. Comme le montre la figure 1A-B, l’application de CaPO₄ a entraîné une dilatation de l’aorte abdominale infrarénale. Histologiquement, CaPO₄ a entraîné une dégradation spectaculaire des fibres élastiques, comme l’illustre.......

Discussion

L’application périaortique de CaPO₄ est une approche robuste pour induire l’AAA chez la souris. Plusieurs études ont utilisé le modèle CaPO₄ et ont systématiquement rapporté qu’il s’agit d’une méthode rapide et reproductible pour étudier l’AAA chez la souris ^7,9. Ce modèle est considéré comme récapitulant une partie des caractéristiques de l’anévrisme de l’aorte humaine et fournissant des informations mécanistes sur la pathogenèse de l’AAA, .......

Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article

Nom	Entreprise	Numéro de catalogue	Commentaires
CaCl2	MECKLIN	C805225
NaCl	Biomed	SH5001-01
PBS	HARVEYBIO	MB5051
Ventilateur pour petits animaux	RWD	H1550501-012