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Article de méthode

Implants de tête pour la neuroimagerie de rats éveillés fixés à la tête

2.7K vues

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DOI :

10.3791/64324

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7 septembre 2022

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Dans cet article

Résumé

Une nouvelle procédure détaillée pour l’imagerie fonctionnelle de rats éveillés et fixés à la tête est décrite.

Résumé

Les anesthésiques, couramment utilisés dans la recherche préclinique et scientifique fondamentale, ont une influence dépressive sur les fonctions métaboliques, neuronales et vasculaires du cerveau et peuvent influencer négativement les résultats neurophysiologiques. L’utilisation d’animaux éveillés pour les études de recherche est avantageuse, mais pose le défi majeur de garder les animaux calmes et immobiles pour minimiser les artefacts de mouvement tout au long de l’acquisition de données. L’imagerie éveillée chez les rongeurs de petite taille (p. ex. souris) est très courante, mais reste rare chez les rats, car les rats sont plus gros, plus forts et ont une plus grande tendance à s’opposer aux contraintes de mouvement et à la fixation de la tête pendant les longues durées requises pour l’imagerie. Un nouveau modèle de neuroimagerie de rats éveillés et fixés à la tête à l’aide d’élingues cousues à la main, d’implants de tête imprimés en 3D, de casques et d’un chevalement est décrit. Les résultats obtenus à la suite d’un seul essai de stimulation à moustache unique suggèrent une augmentation de l’intensité de la réponse fonctionnelle évoquée. L’acquisition de la réponse fonctionnelle évoquée chez des rats éveillés fixés à la tête est plus rapide que celle des rats anesthésiés, fiable, reproductible et peut être utilisée pour des études longitudinales répétées.

Introduction

La plupart des examens scientifiques de neuroimagerie fondamentale, préclinique et translationnelle sont acquis à partir d’animaux anesthésiés 1,2. Les anesthésiques facilitent l’expérimentation, mais influencent continuellement le métabolisme, la pression artérielle et la fréquence cardiaque du cerveau etdu corps 3. Le type d’anesthésique ainsi que la durée et la voie d’administration ajoutent des variables confusionnelles à l’interprétation des données qui pourraient contribuer à la reproductibilité et aux échecs translationnels4. Un goulot d’étranglement majeu....

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Protocole

Toutes les procédures étaient conformes aux directives du National Institute of Health et approuvées par le comité de soin et d’utilisation des animaux de l’Université de Californie à Irvine. Sept rats mâles et une femelle (Sprague-Dawley, poids: 185-350 g) ont été utilisés dans cette étude. Une fois l’étude terminée, les rats ont été sacrifiés en utilisant une surdose de dioxyde de carbone.

1. Conception des différents composants

  1. Conception de l’implant de tête :
    1. Réalisez l’implant de tête à l’aide d’un logiciel de CAO (Figure 1C) et concevez-le de manière à imager la zone pos....

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Résultats

Les signaux d’imagerie optique représentatifs d’un seul essai sur un rat anesthésié et la réponse additionnée (de 40 essais recueillis) d’un rat éveillé sont présentés (Figure 4). L’intensité du signal pour la stimulation à moustache unique d’un rat éveillé peut être visualisée à un seuil plus élevé que pour le rat anesthésié, montrant un signal plus fort de l’animal éveillé. Les moustaches C2 des rats sont stimulées à 5 Hz pendant 1 s, et la réponse fonctionnelle est affichée comme un chang.......

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Discussion

L’utilisation de l’imagerie éveillée et fixe de la tête chez le rat offre de nombreux avantages en termes de facilité et de personnalisation. Les élingues conçues sur mesure permettent aux rats d’être enveloppés dans un matériau de filet respirant, éliminant ainsi le besoin d’enfermer les animaux dans des chambres de retenue en plastique fermées pendant de longues périodes10,11. Les rats sont gardés calmes et sans stress pendant les longues durées des séances d’i.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.

Remerciements

Nous remercions Clara Jones, James Stirwalt, Linh Hoang, Young Joon Ha et Amirsoheil Zareh pour leur aide lors de l’entraînement des rats et de la préparation des frondes. Le financement a été fourni par les National Institutes of Health (NIH, numéro de subvention: NS119852) et la Fondation Leducq (numéro de subvention: 15CVD02).

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
RatsCharles RiverSprague Dawley
IsofluranePivetal21295098Anesthésique général
Lidocaïne HCl 2 % injectionPhoenixL-2000-04Anesthésique local
Injection de sulfate d’atropineVedco5098907512Aide à la respiration
Solution injectable de LactateRinger Vedco
Flunixin injectionVedco6064408670Gestion de la douleur
Enrosite injection (Enrofloxacine 2,27 %)VetOne501084Avoid infection
PromAce injection (Maléate d’acépromazine)Beohringer Ingelheim136059
Animax onguentDechra Veterinary Products122-75ingrédients actifs de nystatine 1000 unités par gramme, sulfate de néomycine 2,5 mg par gramme, thiostrepton 2500 unités par gramme et acétonide de triamcinolone 1 mg par gramme
Puralube pommade ophtalmiqueDechra Veterinary Products211-38
Povidone-iode PVP tampons de préparationMedlineMDS093917Betadine générique
Alcool isopropylique tamponsBD326895
Vetbond tissu adhésif3M1469SB
Fraise (foret), carbure opératoire standardSS Fraises blanches14829#3
Vis à tête plate 00-90 x 1/8 en acier inoxydableJ.I. MorrisF0090CE125Vis d’ancrage
Système stéréotaxiqueKopf Instruments1430
Couverture chauffante homéothermiqueHarvard Apparatus50-7220-F
Oxymètre de pouls & cardiofréquencemètreKent ScientificMouseStat Jr.
PétrolatumFisher ScientificP66-1LBVaseline
générique Fil, cuivre nuFisher Scientific15-545-2C20 gauge
Teets Cold Cure powderPearson DentalC73-0054  ;matière active : Méthacrylate de méthyle
Teets Cold Cure liquidPearson DentalC73-0078  ;matière active : Méthacrylate de méthyle
Moule en silicone caoutchoucSmooth-OnBody Double Fastpolymère de silicium
Metricide 28 (Germicide)MetrexOct-05
Encre de Chine, noirPelikan301051
Foret dentaireNSK DentalUltimate XL-F
Imprimante 3DPrusa Researchi3 MK3S+
Attaches à coudre Velcro90030
Tissu utilitaire de protection pour animaux de compagnieJoann10173334Matériau de filet
Fraise (foret), carbure opératoire standardSS Fraises blanches14829#1 fraise
50989088317

Références

  1. Cicero, L., Fazzotta, S., Palumbo, V. D., Cassata, G., Lo Monte, A. I. Anesthesia protocols in laboratory animals used for scientific purposes. Acta Biomedica. 89 (3), 337-342 (2018).
  2. Lythgoe, M. F., Sibson, N. R., Harris, N. G. Neuroimaging of animal models of brain disease. B....

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Réimpressions et autorisations

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