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Article de méthode

Extraction dynamique continue de sang du cœur de rat par une technique de microdialyse non invasive

3K vues

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DOI :

10.3791/64531

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13 septembre 2022

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Dans cet article

Résumé

Le présent protocole décrit une méthode simple et efficace pour la collecte dynamique et en temps réel du sang de cœur de rat à l’aide de la technique de microdialyse.

Résumé

L’analyse dynamique des composants sanguins est d’une grande importance pour comprendre les maladies cardiovasculaires et leurs maladies connexes, telles que l’infarctus du myocarde, l’arythmie, l’athérosclérose, l’œdème pulmonaire cardiogénique, l’embolie pulmonaire et l’embolie cérébrale. Dans le même temps, il est urgent de percer la technique de prélèvement sanguin cardiaque continu chez les rats vivants afin d’évaluer l’efficacité de la thérapie de médecine ethnique distinctive. Dans cette étude, une sonde de microdialyse sanguine a été implantée dans la veine jugulaire droite de rats lors d’une intervention chirurgicale précise et non invasive. Des échantillons de sang cardiaque ont ensuite été prélevés à un débit de 2,87 nL/min à 2,98 mL/min en se connectant à un système de prélèvement d’échantillons de microdialyse en ligne. Plus important encore, les échantillons de sang acquis peuvent être stockés temporairement dans des récipients de microdialyse à 4 ° C. Le programme de collecte continue de sang en ligne basé sur la microdialyse sur le cœur de rat a grandement garanti la qualité des échantillons de sang, faisant progresser et dynamisant la rationalité scientifique de la recherche sur les maladies cardiovasculaires systémiques et évaluant la thérapie ethnomédicale du point de vue de l’hématologie.

Introduction

Avec l’accélération du rythme de vie et l’augmentation de la pression psychologique, les maladies cardiovasculaires (MCV) ont tendance à survenir chez les jeunes, les personnes d’âge moyen et les personnes âgées 1,2. La morbidité et la mortalité des MCV sont élevées, avec les caractéristiques d’apparition aiguë, de progression rapide et d’évolution longue de la maladie, qui affectent gravement la sécurité des patients3. L’apparition de MCV peut être étroitement liée aux changements dans certains composants sanguins, tels que le cholestérol, les lipides sériques, la glycémie, les enzymes....

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Protocole

Le protocole animal a été approuvé par le Comité administratif de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Chengdu (Numéro d’enregistrement: 2021-11). Des rats Sprague Dawley mâles (SD) exempts d’agents pathogènes spécifiés (8 à 10 semaines, 260 à 300 g) ont été élevés dans des cages de ventilation indépendantes, maintenant l’environnement de laboratoire à 22 °C et à 65 % d’humidité relative, et ont été utilisés pour la présente étude. Les animaux ont été obtenus d’une source commerciale (voir le tableau des matériaux). Tous les rats ont été habitués à une alimentation adaptative pendant 1 semaine avec de l’eau et un régime gratuits pendant....

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Résultats

Le protocole actuel a permis d’obtenir le sang cardiaque de rats conscients selon les paramètres d’échantillonnage définis dans l’équipement de microdialyse. Les échantillons de sang normaux doivent être rouge vif, tandis que les animaux atteints d’hypoxie, de caillots sanguins potentiels ou de maladie anémique peuvent avoir un violet foncé ou un rouge foncé. Les échantillons obtenus par la technique de microdialyse sanguine sont incolores, clairs et transparents, ce qui peut être utilisé pour analyser les marqueurs séri.......

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Discussion

Les MCV sont une maladie chronique courante dans les cliniques dont l’incidence augmente progressivement en Chine, et l’âge d’apparition a tendance à être plus jeune, provoquant l’inquiétude et la panique de la plupart des patients20,21. Étant la principale cause de décès dans le monde, les MCV peuvent induire un infarctus cérébral et d’autres maladies à forte mortalité, menaçant gravement la vie saine des patients22. Les MCV, y compris le.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Remerciements

Ce travail a été soutenu par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (82104533), la Fondation chinoise des sciences postdoctorales (2020M683273), le Département des sciences et de la technologie de la province du Sichuan (2021YJ0175) et le projet de R&D clé du Plan provincial des sciences et technologies du Sichuan (2022YFS0438). En attendant, les auteurs tiennent à remercier M. Yuncheng Hong, ingénieur principal en équipement chez TRI-ANGELS D&H TRADING PTE. LTD. (Singapour, Singapour), pour avoir fourni des services techniques pour les techniques de microdialyse.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
Système d’anesthésie animaleRayward Life Technology Co., LtdR500IE
Mainteneur de la température animaleRayward Life Technology Co., Ltd69020
Sonde de microdialyse sanguine  ; CMA Microdialyse ABT55347
Cathéter  ; CMA Microdialyse ABT55347
CitrateMerck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd251275
Rasoir électriqueRayward Life Technology Co., LtdCP-5200
Fep tubing  ; CMA Microdialysis AB3409501
Réservoir de libre circulation pour animaux  ; CMA Microdialyse ABCMA120
GlucoseMerck Chemical Technology (Shanghai) Co., LtdG8270
Pince hémostatiqueRayward Life Technology Co., LtdF21020-16
IsofluranRayward Life Technology Co., LtdR510-22
Micro-ciseauxBeyotime Biotechnology Co., LtdFS221
Microdialyse tube de collecte  ; CMA Microdialyse AB7431100
Collecteur de microdialyse  ; CMA Microdialysis ABCMA4004
Microdialyse in vitro stand  ; CMA Microdialyse ABCMA130
Pompe de micro-injection de microdilyse CMA Microdialyse AB788130
Seringue de microdialyse (1,0 mL)  ; CMA Microdialysis AB8309020
Adaptateur de tubulure de microdialyse  ; CMA Microdialyse AB3409500
Membrane filtrante microporeuseMerck Millipore Ltd.
Sutures chirurgicales non résorbablesShanghai Tianqing Biological Materials Co., LtdS19004
Table d’opérationYuyan Scientific Instrument Co., Ltd30153
Pince ophtalmiqueRayward Life Technology Co., LtdF12016-15
Citrate de sodiumMerck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd1613859
Sprague Dawley  ; (SD) ratsChengdu Dossy Experimental Animals Co., LtdSYXK(figure-materials-1)2019-049
Ciseaux chirurgicauxRayward Life Technology Co., LtdS14014-15
Ciseaux chirurgicauxShanghai Bingyu Fluid technology Co., LtdBY-103
Aiguille de seringue  ; CMA Microdialyse ABT55347
Nettoyeur à ultrasonsGuangdong Goote Ultrasonic Co., LtdKMH1-240W8101
R0DB36622

Références

  1. van Rensburg, W. J. J. Post-mortem evidence of a diverse distribution pattern of atherosclerosis in the South African population. Scientific Reports. 12 (1), 11366(2022).
  2. Katz, A. J., Chen, R. C., Usinger, D. S., Danus, S. M., Zullig, L. L.

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Réimpressions et autorisations

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