La présente étude démontre un modèle animal hautement reproductible d’ischémie myocardique régionale aiguë et de lésion de reperfusion chez le lapin en utilisant une mini-thoracotomie gauche pour les cas de survie ou une sternotomie médiane pour les cas de non-survie.
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Article de méthode
Modèle d’ischémie et de lésion de reperfusion chez le lapin
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Dans cet article
Résumé
Résumé
Le protocole fournit ici une méthodologie simple et hautement reproductible pour induire in situ une ischémie myocardique régionale aiguë chez le lapin pour des expériences de non-survie et de survie. Le lapin adulte blanc de Nouvelle-Zélande est mis sous sédation avec de l’atropine, de l’acépromazine, du butorphanol et de l’isoflurane. L’animal est intubé et placé sous ventilation mécanique. Un cathéter intraveineux est inséré dans la veine marginale de l’oreille pour la perfusion de médicaments. L’animal est prémédiqué avec de l’héparine, de la lidocaïne et de la solution de Ringer lactée. Une réduction de la carotide est effectuée pour obtenir un accès à la ligne artérielle pour la surveillance de la pression artérielle. Certains paramètres physiologiques et mécaniques sont surveillés et enregistrés par une analyse continue en temps réel.
Une fois l’animal sous sédation et complètement anesthésié, on effectue soit une quatrième thoracotomie de l’espace intercostal gauche (survie), soit une sternotomie médiane (non-survie). Le péricarde est ouvert et l’artère descendante antérieure gauche (LAD) est située.
Une suture en polypropylène est passée autour de la deuxième ou de la troisième branche diagonale de l’artère LAD, et le filament de polypropylène est enfilé à travers un petit tube en vinyle, formant un piège. L’animal est soumis à 30 min d’ischémie régionale, obtenue en occlusant le LAD en resserrant le collet. L’ischémie myocardique est confirmée visuellement par une cyanose régionale de l’épicarde. Après une ischémie régionale, la ligature est relâchée et le cœur est autorisé à se reperfuser.
Pour les expériences de survie et de non-survie, la fonction myocardique peut être évaluée par une mesure échocardiographie (ECHO) du raccourcissement fractionnaire. Pour les études de non-survie, les données de sonométrie recueillies à l’aide de trois sondes ultrasoniques piézoélectriques numériques implantées dans la zone ischémique et la pression développée du ventricule gauche (LVDP) à l’aide d’un cathéter du ventricule gauche (VG) inséré apicalement peuvent être acquises en continu pour évaluer la fonction myocardique régionale et globale, respectivement.
Pour les études de survie, l’incision est fermée, une thoracentèse à l’aiguille gauche est effectuée pour l’évacuation de l’air pleural et le contrôle de la douleur postopératoire est réalisé.
Introduction
Les maladies cardiovasculaires sont la première cause de décès dans le monde et contribuent à plus de 18 millions de décès chaque année 1,2,3. L’infarctus aigu du myocarde (IM) est une urgence médicale courante qui se développe lorsqu’un caillot sanguin ou un morceau de plaque d’athérome bloque la circulation sanguine d’une artère coronaire. Cela provoque une ischémie myocardique régionale dans le territoire perfusé par l’artère.
La présente étude décrit un protocole qui utilise une méthodologie simple et fiable pour créer une ischémie myocardique ....
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Protocole
Cette enquête a été menée conformément aux lignes directrices des National Institutes of Health sur les soins et l’utilisation des animaux et a été approuvée par le comité de protection et d’utilisation des animaux de l’hôpital pour enfants de Boston (protocole 20-08-4247R). Tous les animaux ont reçu des soins sans cruauté conformément au Guide sur le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire.
1. Espèces animales, agents anesthésiques et analgésiques
- Espèces animales : Utiliser des lapins blancs de Nouvelle-Zélande (souche sauvage ; sexe femelle ; sexuellement matures de 15 à 20 semaines ; poids corporel de....
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Résultats
Suivant le protocole (Figure 1), l’ischémie myocardique a été confirmée immédiatement par la visualisation directe de la cyanose de l’épicarde.
Des ECG standard (trois dérivations de membres : I, II et III, et trois dérivations augmentées par ordinateur : aVL, aVR et aVF) ont été enregistrées en continu avant l’ischémie, pendant l’ischémie et à la reperfusion (Figure 2). Les ECG mettent en évidence une tachycardie, des arythmies (c’es.......
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Discussion
Notre protocole démontre une méthodologie fiable pour réaliser une ischémie myocardique régionale aiguë chez le lapin. L’approche de la mini-thoracotomie gauche est idéale pour les cas de survie, pour lesquels l’incision et la douleur associée doivent être minimisées. Il est important de noter que le traitement diurétique n’était pas nécessaire avant l’extubation et qu’il n’y avait pas de mortalité peropératoire dans le groupe non survie ou à 4 semaines postopératoire dans le groupe survie. Lorsque la conception du proto.......
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Déclarations de divulgation
Aucun conflit d’intérêts, financier ou autre, n’est déclaré par les auteurs.
Remerciements
L’étude originale dans laquelle ce protocole a été utilisé a été financée par les subventions HL-103642 et HL-088206 de l’Institut national du cœur, des poumons et du sang
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| Lame #10 | Bard Parker | 371210Lame | |
| #11 | Fisher Scientific | B3L | |
| 22 G PIV aiguille | BD Insyte | 381423 | |
| acépromazine | VETONE | NDC 13985-587-50 | 0,5 mg/kg IM et IV |
| Sac à pression Aline | Infu-Stat | 2139 | |
| Angiocath | Becton Dickinson | 382512 | |
| Cathéter artériel | Teleflex | MC-004912 | |
| Atropine | Hikma Pharmaceuticals | NDC 0641-6006-01 | ; 0,01 mg/kg IM |
| Bétadine et alcool isopropylique à 70 % | McKesson | NDC 68599-2302-6 | |
| Machine à gaz du sang | Siemens | MRK0025 | |
| Bovie | Valleylab | E6008 | |
| Pinces Bulldog | World Precision Instruments | 14119 | |
| Bupivacaïne | Auromedics | NDC 55150-249-50 | ; 3 mg/kg |
| IM Butorphanol | Roxane | NDC 2054-3090-36 | 0,5 mg/kg IM |
| Feuille d’acétate transparent | Oxford Instruments | ID 51-1625-0213 | |
| Clipers | Andis | AGC2 | |
| Pince DeBakey | Integra | P6280 | |
| Appareil d’échocardiographie | Philips | IE33 F1 | |
| Appareil d’électrocardiographie | Meditech | MD908B | |
| Sonde endotrachéale | Medline | #922774 | |
| Fentanyl | West-Ward | NDC 0641-6030-01 | 1&ndash ; 4 et micro ; g/kg de patch transdermique |
| Solution de formaldéhyde 10 % | Epredia | 94001 | |
| Plaques de verre | ; United Scientific | B01MUHX6MR | |
| Agent d’héparine sodique | NDC 69-0058-02 | 1000U dans 1 mL 3 mg/kg | |
| Couverture d’eau chaude | 3M | 55577 | |
| Isoflurane | Penn Veterinary Supply, INC | NDC 50989-606-15 | 1 %&ndash ; 3 % |
| Kétamine | Dechra | NDC 42023-138-10 | 10 mg/kg IV |
| Tableau de laboratoire 7 Logiciel d’acquisition | Adinstruments | ||
| Lactated Ringer’s solution | ICUmedical | NDC 0990-7953-09 | 10 mL/kg/h |
| Laryngoscope | Welch Allyn | 68044 | |
| Cathéter à lumière ventricule gauche ; 3Fr | McKesson | 385764-EA | |
| Lidocaïne (1 %) | Pfizer | 4276-01 | 1&ndash ; 1,5 mL/kg IV |
| Transducteur LVDP | Edward | PDP-ED | |
| Stylo de marquage | Viscot | 1451SR-100 | |
| Mayo | S7-1098 | ||
| Medetomidine | Entireoly Pets Pharmacy | NDC 015914-005-01 | 0,25 mg/kg |
| CISEAUX IM Metzenbaum | Cole-Parmer | UX-10821-05 | |
| Monastra. Pigment bleu 98 % | Chemsavers | MBTR1100G | |
| Monocryl 5-0 | Ethicon | Y463G | |
| Pince anti-moustiques | Shioda | 802N | |
| PDS 3-0 | Ethicon | 42312201 | |
| Cristaux de sonomicrométrie piézoélectriques | Sonométrie | Petit 2mm rond | |
| Plegets | DeRoyal | 32-363 | |
| Povuine Iodine Prep Solutions | Medline | MDS093940 | |
| Masque facial système vaporisé de précision | Yuwell | B07PNH69BF | |
| Prolene 3-0 | Ethicon | 8665G | |
| Proline 5-0 | Ethicon | 8661G | |
| Sonde d’oxymétrie de pouls | Masimo | 9216-U | |
| Écarteur de côtes | Medline | MDS5621025 | |
| S12 Sonde sectorielle pédiatrique | Phillips | 21380A | |
| Sonomicromètre Sonométrie | BZ10123724 | ||
| Gaze stérile | Medline | 3.00802E+13 | |
| Serviettes stériles | McKesson | MON 277860EA | |
| Écarteur sternal | Medline | MDS5610321 | |
| Sutures de fermeture | J& J Dental | 8698G | |
| Moniteur de télémétrie | Meditech | MD908B | |
| Sonde de température | Omega | KHSS-116G-RSC-12 | |
| Chlorure de triphényle tétrazolium (1 %) | Millipore | MFCD00011963 | |
| Ventilateur | MedGroup | MSLGA 11 | |
| Vicryl 2-0 | Ethicon | V635H | |
| Vinyle tube | ABE | DISW 3001 |
Références
- Selvin, E., Erlinger, T. P. Prevalence of and risk factors for peripheral arterial disease in the United States: Results from the National Health and Nutrition Examination Survey, 1999-2000. Circulation. 110 (6), 738-743 (2004).
- Bolli, R., et al.
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Réimpressions et autorisations
