Transplante Cardíaco Heterotópico Abdominal Modificado e um Novo Modelo de Regurgitação Aórtica em Ratos

Summary

Este estudo demonstra uma técnica reprodutível de transplante cardíaco abdominal heterotópico em ratos que iniciantes podem aprender e executar. Além disso, um novo modelo de regurgitação aórtica em ratos é gerado pela realização de transplante cardíaco abdominal heterotópico e lesão da valva aórtica do doador usando fio-guia após a coleta.

Abstract

Nos últimos 50 anos, muitos pesquisadores relataram transplante cardíaco abdominal heterotópico em camundongos e ratos, com algumas variações na técnica cirúrgica. A modificação do procedimento de transplante para fortalecer a proteção miocárdica poderia prolongar o tempo de isquemia, preservando a função cardíaca do doador. Os pontos-chave dessa técnica são: transeccionar a aorta abdominal do doador antes da coleta para descarregar o coração do doador; perfundir as artérias coronárias do doador com uma solução cardioplégica fria; e resfriamento tópico do coração do doador durante o procedimento de anastomose. Consequentemente, como este procedimento prolonga o tempo de isquemia aceitável, os iniciantes podem facilmente realizá-lo e alcançar uma alta taxa de sucesso.

Além disso, um novo modelo de regurgitação aórtica (IAp) foi estabelecido neste trabalho utilizando uma técnica diferente da existente, que é criada pela inserção de um cateter da artéria carótida direita e punção da valva aórtica nativa sob orientação ecocardiográfica contínua. Um transplante cardíaco abdominal heterotópico foi realizado usando o novo modelo de RA. No protocolo, após a retirada do coração do doador, um fio-guia rígido é inserido na artéria braquiocefálica do doador e avançado em direção à raiz da aorta. A valva aórtica é puncionada empurrando-se ainda mais o fio-guia mesmo após a resistência ser sentida, induzindo assim o RA. É mais fácil lesar a valva aórtica com esse método do que com o procedimento descrito no modelo convencional de RA. Além disso, esse novo modelo de RA não contribui para a circulação do receptor; portanto, espera-se que esse método produza um modelo de RA mais severo do que o procedimento convencional.

Introduction

O transplante cardíaco abdominal heterotópico em ratos foi relatado pela primeira vez em 1964 por Abbott e ^cols.1 e tem sido usado para estudar a rejeição aguda e crônica do enxerto, a vasculopatia do enxerto cardíaco, a lesão de isquemia-reperfusão e o remodelamento^{cardíaco2,3,4,5,6,7,8,9,10,11} . Algumas modificações foram adicionadas ao procedimento nos últimos 50 anos. Os fundamentos do procedimento atual são os seguintes. A aorta ascendente e a artéria pulmonar (AP) do doador são anastomosadas término-lateralmente à aorta abdominal e à veia cava inferior do receptor, respectivamente. Embora o átrio e o ventrículo esquerdos do doador não recebam fluxo intracavitário, o sangue flui para o sistema coronariano do doador; portanto, o coração do doador volta a bater após o despinçamento.

Alguns especialistas com experiência em centenas ou milhares de operações têm relatado alta taxa de sucesso com curto tempo de isquemia para transplante cardíaco abdominal heterotópico 2,3,4,5; no entanto, é difícil para iniciantes alcançar o curto tempo de isquemia desde o início. A cardioproteção suficiente é um fator importante para a obtenção de uma boa contração cardíaca do coração do doador. A proteção miocárdica insuficiente pode enrijecer o coração do doador. Portanto, modificamos o procedimento de transplante para fortalecer a proteção do coração do doador. Um dos objetivos deste estudo é demonstrar um procedimento de transplante cardíaco abdominal heterotópico reprodutível que os iniciantes podem ser facilmente realizados, uma vez que prolonga o tempo de isquemia aceitável.

Além disso, alguns pesquisadores relataram um modelo de regurgitação aórtica (RA) em ratos, que tem sido utilizado para examinar os efeitos de agentes no remodelamento do ventrículo esquerdo (VE)^12,13,14,15. O procedimento convencional inclui: (1) uma incisão cervical lateral direita é feita para expor a artéria carótida direita após a anestesia; (2) um cateter é canulado desse vaso e avançado em direção à raiz da aorta; e (3) a RA é induzida pela punção da valva aórtica nativa sob orientação ecocardiográfica contínua.

No entanto, puncionar a valva aórtica com a sonda ecocardiográfica e obter uma boa visão da aorta ascendente, da valva aórtica e do cateter com um ecocardiograma é um desafio. Além disso, a insuficiência cardíaca após RA aguda é outra complicação. Portanto, um novo modelo de RA, que pode ser facilmente criado e não contribui para a circulação do receptor, foi estabelecido neste trabalho para resolver esses desafios. O outro objetivo deste estudo é criar um modelo de RA utilizando transplante cardíaco abdominal heterotópico e lesando a valva aórtica do doador com fio-guia após a coleta.

Protocol

Todos os procedimentos com animais foram conduzidos de acordo com “An Outline of the Act on Welfare and Management of Animals” e “Standards Related to the Care and Keeping and Reducing Pain of Laboratory Animals” pelo Ministério do Meio Ambiente, Governo do Japão e as “Diretrizes para Conduta Adequada de Experimentação Animal” pelo Conselho Científico do Japão16, 17,18. Os protocolos com animais foram revisados e aprovados…

Representative Results

Em relação ao modelo normal, uma boa contração do VE foi estabelecida com sucesso após o despinçamento. O tempo de isquemia do coração transplantado e o tempo de anestesia do receptor foram de aproximadamente 60 min e 130 min, respectivamente (Tabela 1). Boa contração do VE também foi obtida após o despinçamento no novo modelo de RA. O tempo de isquemia do coração transplantado e o tempo de anestesia do receptor no modelo de RA foram aproximadamente 5 min e 10 m…

Discussion

Foram descobertos os principais passos para evitar que o coração doador enrijeça durante o implante. Primeiramente, é fundamental transeccionar a aorta abdominal do doador antes da coleta para descarregar o coração do doador ^4,7. Se o procedimento cirúrgico do doador for realizado sem intubação endotraqueal, a respiração cessa após a toracotomia, o que obstrui a circulação pulmonar do doador. Consequentemente, o coração do doador fica sobrecarrega…

Materials

Antisedan (atipamezole)	Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd.
Domitor (medetomidine)	Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd.
Dormicum (midazolam)	Maruishi Pharmaceutical Co., Ltd.
heparin	AY Pharmaceuticals Co.,Ltd.
Jcl:Wistar rats	CLEA Japan, Inc.
microscope	Orinpas Co., Ltd.	SZ61
modified Krebs-Henseleit cardioplegic solution	Merck KGaA
sevoflurane	FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation
SURGICEL FIBRILLAR	Johnson & Johnson K.K.
Vetorphale (butorphanol)	Meiji Animal Health Co., Ltd.