تحريض تضيق مجرى البول متبوعا برأب الإحليل بطعم الغشاء المخاطي الشدقي في نموذج الفئران
Summary
في البروتوكول الحالي ، تم تطوير تحريض تضيق مجرى البول في فئران Wistar ، تليها إعادة بناء مجرى البول مع طعم الغشاء المخاطي الشدقي. تم إجراء تصوير الإحليل الرجعي وتقييم دوبلر بالليزر ، للتحقق من صحة إعادة بناء مجرى البول (بعد تكوين التضيق) ووضع الكسب غير المشروع.
Abstract
إعادة بناء مجرى البول هو مجال مهم من الخبرة لأطباء المسالك البولية. يعتبر الغشاء المخاطي الشدقي الخيار الأفضل عندما يكون تطعيم مجرى البول ضروريا ، على الرغم من أنه في بعض الحالات ، يكون غير مناسب أو يحتاج إلى تحسين لإصلاح تضيق معين. لذلك ، فإن تطوير إجراءات مبتكرة وتقييم نجاحها المفترض في النماذج التجريبية أمر بالغ الأهمية لتناسب الحاجة السريرية. مع هذا الهدف ، تصف هذه الدراسة بروتوكولا تم فيه تحفيز تضيق مجرى البول بواسطة الكي الكهربائي في فئران Wistar. تم إجراء إعادة بناء مجرى البول بعد 1 أسبوع مع طعم الغشاء المخاطي الشدق ، الذي تم حصاده من الشفة السفلى ، ووضعه بطريقة بطانة بطنية. أظهر مخطط الإحليل الرجعي تحسنا ملحوظا في قطر مجرى البول بعد رأب الإحليل مقارنة بالقيمة ذات الصلة بعد تحريض التضيق. بالإضافة إلى ذلك ، تم تقييم موضع الكسب غير المشروع عن طريق تحليل نضح الدم باستخدام دوبلر بالليزر. كما هو متوقع ، تتوافق منطقة زرقاء داكنة مع طعم الغشاء المخاطي الشدقي غير الوعائي. يمكن لهذا الإجراء أن يحاكي بنجاح العملية الفيزيولوجية المرضية الطبيعية لإصابة مجرى البول وتعديل الأنسجة ، وكذلك إعادة بناء مجرى البول باستخدام طعم الغشاء المخاطي الشدقي بطريقة قابلة للتكرار ، ويكون بمثابة أساس للبحوث المستقبلية القائمة على هندسة الأنسجة أو ترقيع مجرى البول.
Introduction
تمثل إعادة بناء مجرى البول تحديا كبيرا لجراحي المسالك البولية في إدارة إصابة مجرى البول في وضع التضيقات أو الصدمات أو العيوب الخلقية1. مع النية العلاجية ، رأب الإحليل هو العلاج المفضل لمعظم المرضى ، مع عيوب مجرى البول الطويلة (>2 سم) والأمامية التي تتطلب شكلا من أشكال رأب الإحليل البديل2. تم استخدام العديد من الأنسجة كبدائل لمجرى البول ، بما في ذلك ترقيع الجلد الكامل أو المقسم للمناطق التناسلية أو خارج الأعضاء التناسلية ، أو الغشاء المخاطي لجدار المثانة ، أو الغشاء المخاطي الشدقي2 الواسع الانتشار. تتميز الطعوم المخاطية الشدقية بالعديد من المزايا ، مثل القدوم من بيئة رطبة وخالية من الشعر ، وسهولة الحصاد ، ومقاومة العدوى ، وظهارة سميكة ، وتقليل احتمالية تكوين الرتج الزائف ، وصفيحة رقيقة ، مما يسمح بالتشرب المبكر والتلقيح3. على عكس اللوحات ، لا تحتوي الطعوم على إمدادات الدم ، اعتمادا على سرير الأوعية الدموية للمتلقي للبقاء على قيد الحياة4.
تم استخدام النماذج الحيوانية للطعوم أو اللوحات على نطاق واسع لتطوير أو تحسين التقنيات الجراحية ، ودراسة وفهم فسيولوجيا الأنسجة ، والآليات الأساسية ، وأسباب الفشل ، وتقييم استراتيجيات العلاج المبتكرة5،6. على الرغم من أن الأكبر حجما تسهل التنفيذ الفني ، إلا أن القوارض ، وهي الجرذان والفئران ، أسهل في التعامل معها وصيانتها ، ومقاومة للأمراض ، وأكثر فعالية من حيث التكلفة ، والأهم من ذلك ، مع أدوات التحقيق في الآليات الجزيئية ، وهي ضرورية لاختبار العلاجات المبتكرة 5,6. تم وصف عدة نماذج من اللوحات والطعوم في الفئران باستخدام أنسجة مختلفة ، وهي الجلد والعظام والعضلات6 والأوعية5 وحتى الأعضاء الصلبة7. ومع ذلك ، هناك فحص نادر في نماذج الفئران في الطعوم لإعادة بناء مجرى البول أو هندسة الأنسجة.
ومع ذلك ، فإن التقدم في العلوم الانتقالية يعتمد على النماذج الحيوانية التي تحاكي المرض. حتى الآن ، لم تتم معالجة بيئة الفيزيولوجيا المرضية المحلية ، حيث يتم إجراء إعادة بناء مجرى البول مباشرة بعد تضيقه. هنا ، تهدف هذه الدراسة إلى إجراء إعادة بناء مجرى البول باستخدام طعم الغشاء المخاطي الشدقي في بيئة الفيزيولوجيا المرضية المحلية. مع هذا الهدف ، تم حث تضيق مجرى البول 1 أسبوع قبل إعادة بنائه. يسمح هذا النموذج التجريبي ، الذي يتم إجراؤه على الفئران ، باختبار العلاجات المبتكرة والتحقيق في آلياتها الجزيئية ومزاياها السريرية في المستقبل.
Protocol
Representative Results
Discussion
رأب الإحليل مع ترقيع الغشاء المخاطي الشدقي هو حجر الزاوية الرئيسي في إعادة بناء مجرى البول. ومع ذلك ، ينبغي تطوير إجراءات مبتكرة لتحسين تلك الموصوفة بالفعل وإنشاء إجراءات جديدة ، مثل المواد المهندسة بالأنسجة والطعوم البيولوجية ، للحد من المضاعفات والأمراض. تم نشر العديد من الإجراءات لإن?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نشكر جواو ليتاو ، رئيس قسم الأشعة في Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte ، وكاتيا فرنانديز ، فني قسم الأشعة في Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte ، على تعاونهم في تحقيق صور الإحليل.
Materials
| Atipamezole | OrionPharma | ANTISEDAN (atipamezole) is indicated for the reversal of the sedative and analgesic effects. | |
| Buprenorphine | RichterPharma | Buprenorphine is a derivative of the opioid alkaloid thebaine that is a more potent (25-40 times) and longer lasting analgesic than morphine. | |
| Carl Zeiss Opmi-1 FC Surgical Stereo Microscope | Carl Zeiss Microscopy, Germany | OPMI 1 FC from ZEISS symbolizes quality, precision and reliability. The manual system is easy to use and delivers high fidelity images with the legendary ZEISS optics. | |
| Carprofen | Zoetis | Carprofen is a non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) of the propionic acid class. | |
| Catheter 22 G. x 1'' | B Braun | Introcan Safety | IV Catheter of fluorinated ethylene propylene (FEP) with firmer construction for arterial access. |
| Enrofloxacin | Bayer | Enrofloxacin is a fluoroquinolone antibiotic. | |
| Fentanyl | Braun | 3644960 | Fentanyl is a powerful synthetic opioid analgesic. |
| Flumazenil | Fresenius Kabi | Benzodiazepine antagonist is used for the complete or partial reversal of the sedative effects caused by benzodiazepines. | |
| High temperature cautery | Fiab | F7244 | Disposable cautery, sterile, high temperature (1200 °C), 28 mm fine tip. |
| Instillagel gel | Farco-pharma | Cellulose-based lubricant with local anaesthetic and disinfecting properties. | |
| Iopromide | Bayer | Non-ionic injectable contrast medium, with iodine. | |
| Laser Doppler imaging system (perfusion imager moorLDI2-HIR and dedicated software) | MoorLDI-V6.0, Moor Instruments Ltd, Axminster, UK | 5710 | The angiogenesis models uses Laser Doppler imaging to assess blood perfusion in the hind limbs, one of which is ligated surgically. Dedicated measurement and comparison software allows the definition of regions of interest for blood flow assessment on the ischaemic versus non-ischaemic limb to establish a "reperfusion ratio" which can be assessed as often as needed and over a number of days on the same subject. |
| Lubrithal Eye Gel | Dechra | Eye gel used in animals for prevention of dry eyes during anaesthesia. Lubricating and moisturising action on cornea and conjunctiva. | |
| Male Wistar Han IGS (Crl:WI(Han) rats | Charles River Laboratories, Spain | Twelve to fourteen-week-old | |
| Metedomidin | Virbac | 037/01/07RFVPT | Medetomidine is a synthetic drug used as surgical anesthetic. |
| Midazolam | Labesfal | Benzodiazepine medication is used for anesthesia and procedural sedation. | |
| Monoplan Angiography System | Philips Medical Systems | Azurion 7 M20 | A stationary diagnostic fluoroscopic x-ray system specifically designed to optimize the capability of users to visually and quantitatively evaluate the anatomy and function of blood vessels of the heart, brain and other organs, as well as the lymphatic system. |
| Mosquito forceps | Henry Schein | 102-4346 | Hartman-Mosquito Hemostatic Forcep Curved 3-1/2" Stainless Steel |
| Needle Holder | Henry Schein | 100-2570 | Needle holder Mayo-Hegar, stainless steel, 14 cm |
| Ophtalmic Needle Holder | Asico | AE-6143 | Needle holder barranquer most delicate without lock |
| Pentobarbital Sodium | Ecuphar | Pentobarbital Sodium is the sodium salt of pentobarbital used for euthanasia. | |
| Pointed Forceps | Aesculap | BD335R | Microforceps, 0.30 mm tip |
| Polysorb 6.0 | Medtronic (Covidien) | UL-101 | Coated Synthetic Absorbable Suture aimed to reduce the inflammatory reaction in tissues, followed by gradual encapsulation of the suture by fibrous connective tissue. |
| Providone-Iodine | Mylan | Povidone-iodine 10% is an antiseptic drug, used as a disinfectant before and after surgery. | |
| Scalpel Blade nº11 | B Braun | BB511 | Carbon steel, sterile |
| Spring Scissor | Henry Schein | 600-4826 | Surgical scissors 31 castroviejo |
| Surgical Forceps | Aesculap | BD33R | Microforceps, 0.20mm tip |
| Surgical Scissor | Aesculap | MA873R | Micro Iris Scissor, curved shrap tips |
| SurgiPro 7.0 | Medtronic (Coviden) | VP-702-X | Non-Absorbable Monofilament Polypropylene Suture indicated for use in general soft tissue ligation. |
References
- Souza, G. F., Calado, A. A., Delcelo, R., Ortiz, V., Macedo, A. Histopathological evaluation of urethroplasty with dorsal buccal mucosa: an experimental study in rabbits. International Brazilian Journal of Urology. 34 (3), 345-354 (2008).
- Andrich, D. E., Mundy, A. R. Urethral strictures and their surgical treatment. BJU International. 86 (5), 571-580 (2000).
- Bhargava, S., Chapple, C. R., Bullock, A. J., Layton, C., MacNeil, S. Tissue-engineered buccal mucosa for substitution urethroplasty. BJU International. 93 (6), 807-811 (2004).
- Fu, Q., et al. Substitution urethroplasty for anterior urethral stricture repair: comparison between lingual mucosa graft and pedicled skin flap. Scandinavian Journal of Urology. 51 (6), 479-483 (2017).
- Blain, B., et al. Vascular grafts in the rat model: an anatomic study. Microsurgery. 21 (3), 80-83 (2001).
- Schmauss, D., Weinzierl, A., Schmauss, V., Harder, Y. Common rodent flap models in experimental surgery. European Surgical Research. 59 (3-4), 255-264 (2018).
- You, H., et al. A rat orthotopic renal transplantation model for renal allograft rejection. Journal of Visualized Experiments. (180), e63464 (2022).
- Park, J. H., et al. Balloon-expandable biodegradable stents versus self-expandable metallic stents: a comparison study of stent-induced tissue hyperplasia in the rat urethra. Cardiovascular and Interventional Radiology. 42 (9), 1343-1351 (2019).
- Martín-Cano, F., et al. Histological and immunohistochemical changes in the rat oral mucosa used as an autologous urethral graft. Journal of Pediatric Surgery. 48 (7), 1557-1564 (2013).
- Hofer, M. D., et al. Analysis of primary urethral wound healing in the rat. Urology. 84 (1), e1-7 (2014).
- Tavukcu, H. H., et al. Protective effect of platelet-rich plasma on urethral injury model of male rats. Neurourology and Urodynamics. 37 (4), 1286-1293 (2018).
