אינדוקציה של היצרות השופכה ואחריה ניתוח שופכה של השתלת רירית בוקלית במודל חולדה
Summary
בפרוטוקול הנוכחי פותחה אינדוקציה של היצרות שופכה בחולדות וויסטאר, ואחריה שחזור שופכה עם שתל רירית בוקאלית. בוצעה בדיקת אורתרוגרמה לאחור ובדיקת דופלר לייזר, המאמתת שחזור שופכה (לאחר היווצרות קשיחות) ומיקום השתל.
Abstract
שחזור שופכה הוא תחום התמחות חשוב עבור אורולוגים. רירית buccal נחשב האפשרות הטובה ביותר כאשר השתלת השופכה יש צורך, אם כי במקרים מסוימים, זה לא מתאים או צריך להיות אופטימיזציה כדי לתקן צרות נתונה. לכן, פיתוח הליכים חדשניים והערכת הצלחתם המשוערת במודלים ניסיוניים הוא חיוני כדי להתאים לצורך הקליני. עם מטרה זו, מחקר זה מתאר פרוטוקול שבו היצרות השופכה נגרמה על ידי electrocautery בחולדות Wistar. שחזור שופכה בוצע שבוע לאחר מכן עם שתל רירית buccal, שנקצר מהשפה התחתונה, והוכנס בצורה משובצת גחון. בדיקת אורתרוגרמה מדרדרית הראתה שיפור משמעותי בקוטר השופכה לאחר ניתוח שופכה בהשוואה לערך בהתאמה לאחר השראת היצרות. בנוסף, מיקום השתל הוערך על ידי ניתוח זילוח דם באמצעות דופלר לייזר. כצפוי, אזור כחול כהה התאים להשתלת רירית הבוקלית הלא וסקולרית. הליך זה יכול לדמות בהצלחה את התהליך הפתופיזיולוגי הרגיל של פגיעה בשופכה ומודולציה של רקמות, כמו גם שחזור שופכה באמצעות שתל רירית בוקאלית באופן הניתן לשחזור, ולשמש בסיס למחקר עתידי המבוסס על הנדסת רקמות או שתלי שופכה.
Introduction
שחזור שופכה הוא אתגר גדול עבור מנתחים אורולוגיים בניהול פגיעה בשופכה במצב של צרות, טראומה או מומים מולדים1. עם כוונה מרפאת, urethroplasty הוא הטיפול המועדף על רוב החולים, עם פגמים ארוכים (>2 ס”מ) ואת השופכה הקדמית הדורשים צורה כלשהי של החלפת urethroplasty2. רקמות רבות שימשו כתחליפי שופכה, כולל שתלי עור בעובי מלא או מפוצל של אזורים באברי המין או מחוץ לאיברי המין, רירית דופן שלפוחית השתן, או רירית buccal2 הנפוצה. לשתלי רירית בוקלית יש מספר יתרונות, כגון הגעה מסביבה רטובה וחסרת שיער, קלות לקציר, עמידות בפני זיהום, אפיתל עבה, סבירות מופחתת להיווצרות פסאודו-דיברטיקולום, ולמינה דקה, המאפשרת אימביציה מוקדמת וחיסון3. בניגוד לדשים, לשתלים אין אספקת דם, תלוי במיטת כלי הדם של המקבל כדי לשרוד4.
מודלים של בעלי חיים של שתלים או דשים שימשו באופן נרחב לפיתוח או שכלול טכניקות כירורגיות, לימוד והבנה של הפיזיולוגיה של הרקמות, המנגנונים הבסיסיים והסיבות לכישלון, והערכת אסטרטגיות טיפול חדשניות 5,6. למרות שבעלי חיים גדולים יותר מאפשרים ביצוע טכני, מכרסמים, כלומר חולדות ועכברים, קלים יותר לטיפול ותחזוקה, עמידים למחלות, חסכוניים יותר, וחשוב מכך, עם הכלים לחקור מנגנונים מולקולריים, החיוניים לבדיקת טיפולים חדשניים 5,6. מספר מודלים של דשים ושתלים תוארו בחולדות באמצעות רקמות שונות, כלומר עור, עצם, שריר6, כלי דם5, ואפילו איברים מוצקים7. עם זאת, יש מחקר נדיר במודלים של מורין לשתלים לשחזור שופכה או הנדסת רקמות.
אף על פי כן, ההתקדמות במדע התרגום תלויה במודלים של בעלי חיים המחקים מחלות. עד כה, הסביבה הפתופיזיולוגית המקומית לא טופלה, שכן שחזור השופכה מבוצע מיד לאחר הצרות שלה. מחקר זה נועד לבצע שחזור שופכה באמצעות השתלת רירית בוקאלית בסביבה פתופיזיולוגית מקומית. עם מטרה זו, היצרות השופכה הושרה 1 שבוע לפני השחזור שלה. מודל ניסיוני זה, המבוצע בחולדות, מאפשר לבחון טיפולים חדשניים ולחקור את המנגנונים המולקולריים שלהם ואת היתרונות הקליניים שלהם בעתיד.
Protocol
Representative Results
Discussion
Urethroplasty עם שתלי רירית buccal הוא אבן פינה מרכזית בשחזור השופכה. עם זאת, יש לפתח נהלים חדשניים כדי לייעל את אלה שכבר תוארו ולהקים חדשים, כגון חומרים מהונדסים רקמות ושתלים ביולוגיים, כדי להפחית סיבוכים ותחלואה. פורסמו מספר נהלים לביסוס מודלים פרה-קליניים ולהגדרת טכניקות כירורגיות. Souza et <sup class="xre…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו מודים לז’ואאו לייטאו, ראש מחלקת הרדיולוגיה של Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte, ולקטיה פרננדס, טכנאית המחלקה לרדיולוגיה של Centro Hospitalar Universitário Lisboa Norte, על שיתוף הפעולה במימוש אורתרוגרמות.
Materials
| Atipamezole | OrionPharma | ANTISEDAN (atipamezole) is indicated for the reversal of the sedative and analgesic effects. | |
| Buprenorphine | RichterPharma | Buprenorphine is a derivative of the opioid alkaloid thebaine that is a more potent (25-40 times) and longer lasting analgesic than morphine. | |
| Carl Zeiss Opmi-1 FC Surgical Stereo Microscope | Carl Zeiss Microscopy, Germany | OPMI 1 FC from ZEISS symbolizes quality, precision and reliability. The manual system is easy to use and delivers high fidelity images with the legendary ZEISS optics. | |
| Carprofen | Zoetis | Carprofen is a non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) of the propionic acid class. | |
| Catheter 22 G. x 1'' | B Braun | Introcan Safety | IV Catheter of fluorinated ethylene propylene (FEP) with firmer construction for arterial access. |
| Enrofloxacin | Bayer | Enrofloxacin is a fluoroquinolone antibiotic. | |
| Fentanyl | Braun | 3644960 | Fentanyl is a powerful synthetic opioid analgesic. |
| Flumazenil | Fresenius Kabi | Benzodiazepine antagonist is used for the complete or partial reversal of the sedative effects caused by benzodiazepines. | |
| High temperature cautery | Fiab | F7244 | Disposable cautery, sterile, high temperature (1200 °C), 28 mm fine tip. |
| Instillagel gel | Farco-pharma | Cellulose-based lubricant with local anaesthetic and disinfecting properties. | |
| Iopromide | Bayer | Non-ionic injectable contrast medium, with iodine. | |
| Laser Doppler imaging system (perfusion imager moorLDI2-HIR and dedicated software) | MoorLDI-V6.0, Moor Instruments Ltd, Axminster, UK | 5710 | The angiogenesis models uses Laser Doppler imaging to assess blood perfusion in the hind limbs, one of which is ligated surgically. Dedicated measurement and comparison software allows the definition of regions of interest for blood flow assessment on the ischaemic versus non-ischaemic limb to establish a "reperfusion ratio" which can be assessed as often as needed and over a number of days on the same subject. |
| Lubrithal Eye Gel | Dechra | Eye gel used in animals for prevention of dry eyes during anaesthesia. Lubricating and moisturising action on cornea and conjunctiva. | |
| Male Wistar Han IGS (Crl:WI(Han) rats | Charles River Laboratories, Spain | Twelve to fourteen-week-old | |
| Metedomidin | Virbac | 037/01/07RFVPT | Medetomidine is a synthetic drug used as surgical anesthetic. |
| Midazolam | Labesfal | Benzodiazepine medication is used for anesthesia and procedural sedation. | |
| Monoplan Angiography System | Philips Medical Systems | Azurion 7 M20 | A stationary diagnostic fluoroscopic x-ray system specifically designed to optimize the capability of users to visually and quantitatively evaluate the anatomy and function of blood vessels of the heart, brain and other organs, as well as the lymphatic system. |
| Mosquito forceps | Henry Schein | 102-4346 | Hartman-Mosquito Hemostatic Forcep Curved 3-1/2" Stainless Steel |
| Needle Holder | Henry Schein | 100-2570 | Needle holder Mayo-Hegar, stainless steel, 14 cm |
| Ophtalmic Needle Holder | Asico | AE-6143 | Needle holder barranquer most delicate without lock |
| Pentobarbital Sodium | Ecuphar | Pentobarbital Sodium is the sodium salt of pentobarbital used for euthanasia. | |
| Pointed Forceps | Aesculap | BD335R | Microforceps, 0.30 mm tip |
| Polysorb 6.0 | Medtronic (Covidien) | UL-101 | Coated Synthetic Absorbable Suture aimed to reduce the inflammatory reaction in tissues, followed by gradual encapsulation of the suture by fibrous connective tissue. |
| Providone-Iodine | Mylan | Povidone-iodine 10% is an antiseptic drug, used as a disinfectant before and after surgery. | |
| Scalpel Blade nº11 | B Braun | BB511 | Carbon steel, sterile |
| Spring Scissor | Henry Schein | 600-4826 | Surgical scissors 31 castroviejo |
| Surgical Forceps | Aesculap | BD33R | Microforceps, 0.20mm tip |
| Surgical Scissor | Aesculap | MA873R | Micro Iris Scissor, curved shrap tips |
| SurgiPro 7.0 | Medtronic (Coviden) | VP-702-X | Non-Absorbable Monofilament Polypropylene Suture indicated for use in general soft tissue ligation. |
References
- Souza, G. F., Calado, A. A., Delcelo, R., Ortiz, V., Macedo, A. Histopathological evaluation of urethroplasty with dorsal buccal mucosa: an experimental study in rabbits. International Brazilian Journal of Urology. 34 (3), 345-354 (2008).
- Andrich, D. E., Mundy, A. R. Urethral strictures and their surgical treatment. BJU International. 86 (5), 571-580 (2000).
- Bhargava, S., Chapple, C. R., Bullock, A. J., Layton, C., MacNeil, S. Tissue-engineered buccal mucosa for substitution urethroplasty. BJU International. 93 (6), 807-811 (2004).
- Fu, Q., et al. Substitution urethroplasty for anterior urethral stricture repair: comparison between lingual mucosa graft and pedicled skin flap. Scandinavian Journal of Urology. 51 (6), 479-483 (2017).
- Blain, B., et al. Vascular grafts in the rat model: an anatomic study. Microsurgery. 21 (3), 80-83 (2001).
- Schmauss, D., Weinzierl, A., Schmauss, V., Harder, Y. Common rodent flap models in experimental surgery. European Surgical Research. 59 (3-4), 255-264 (2018).
- You, H., et al. A rat orthotopic renal transplantation model for renal allograft rejection. Journal of Visualized Experiments. (180), e63464 (2022).
- Park, J. H., et al. Balloon-expandable biodegradable stents versus self-expandable metallic stents: a comparison study of stent-induced tissue hyperplasia in the rat urethra. Cardiovascular and Interventional Radiology. 42 (9), 1343-1351 (2019).
- Martín-Cano, F., et al. Histological and immunohistochemical changes in the rat oral mucosa used as an autologous urethral graft. Journal of Pediatric Surgery. 48 (7), 1557-1564 (2013).
- Hofer, M. D., et al. Analysis of primary urethral wound healing in the rat. Urology. 84 (1), e1-7 (2014).
- Tavukcu, H. H., et al. Protective effect of platelet-rich plasma on urethral injury model of male rats. Neurourology and Urodynamics. 37 (4), 1286-1293 (2018).
