Burada, noninvaziv orofaringeal endotrakeal entübasyon yoluyla intratrakeal lipopolisakkarit (LPS) doğumu için bir protokol öneriyoruz. Bu yöntem, hayvan için cerrahi prosedürün travmasını en aza indirir ve LPS’yi trakeaya ve daha sonra akciğerlere doğru bir şekilde iletir.
Lipopolisakkarit (LPS) veya endotoksin tarafından indüklenen akut akciğer hasarı (ALI) fare modeli, akut akciğer hasarı veya akut inflamasyon ile ilgili hayvan çalışmalarında hala en sık kullanılan modeller arasındadır. Akut akciğer hasarlı fare modellerinde en sık kullanılan yöntemler, LPS’nin intraperitoneal enjeksiyonu ve LPS’nin trakeal infüzyonu için trakeostomidir. Bununla birlikte, ilk yöntem akciğer hedeflemesinden yoksundur ve diğer organlara zarar verir ve ikinci yöntem operatif travmaya, enfeksiyon riskine ve düşük sağkalım oranına neden olur. Burada, farelerde LPS instilasyonu için noninvaziv bir orofaringeal endotrakeal entübasyon yöntemi öneriyoruz. Bu yöntemde LPS, endotrakeal entübasyon için bir aparat yardımıyla akciğere aşılanmak üzere orofaringeal boşluktan trakeaya noninvaziv olarak sokulur. Bu yöntem sadece akciğer hedeflemesini sağlamakla kalmaz, aynı zamanda hayvanlarda hasarı ve ölüm riskini de önler. Bu yaklaşımın akut akciğer hasarı alanında yaygın olarak kullanılmasını bekliyoruz.
Akut akciğer hasarı (ALI) sık görülen bir klinik sendromdur. Çeşitli patojenik faktörler altında, akciğer epitel hücrelerinin ve vasküler endotel hücrelerinin fizyolojik bariyerinin bozulması, alveoler geçirgenliğin artmasına neden olur, böylece akciğer kompliyasının azalmasına, pulmoner ödem ve ciddi hipoksemiye neden olur1. Akut solunum sıkıntısı sendromu (ARDS) ALI’nin en şiddetli formudur. Kontrolsüz inflamasyon ve oksidatif stres hasarı, ALI’nin ve daha şiddetli ARDS2’nin ana nedenleri olarak kabul edilir. Alveoler epitel hücreleri travma nedeniyle doğrudan yaralandığında, alveoler makrofajların enflamatuar yanıt zinciri aktive olur ve akciğerde iltihaplanmaya yol açar3. Küresel olarak, yılda 3 milyondan fazla akut ARDS’li hasta vardır ve yoğun bakım ünitesi başvurularının yaklaşık% 10’unu oluşturmaktadır; Ek olarak, ağır vakalarda ölüm oranı% 46 kadar yüksektir4,5,6. Bu nedenle, patogenezini incelemek için uygun bir ALI hayvan modeli oluşturmaya ihtiyaç vardır. Fare, ALI çalışmasında en yaygın kullanılan deney hayvanıdır, çünkü solunum yolu ALI çalışmaları için insan solunum yolunu iyi simüle edebilir. Ayrıca, ALI masif inflamatuar hücre infiltrasyonu, artmış pulmoner vasküler geçirgenlik ve pulmoner ödem olarak kendini gösterir. Serumdaki inflamatuar sitokinlerdeki değişiklikler ve akciğer kuru-ıslak ağırlık oranı ALI7 derecesini yansıtır.
Şu anda, farelerde LPS’ye bağlı ALI’yi modellemek için ana yöntemler arasında intranazal ve cerrahi trakeal entübasyon 8,9 bulunmaktadır. Burada, noninvaziv orofaringeal entübasyon yoluyla trakeaya LPS vermek için yeni bir yöntem öneriyoruz. Bu yöntem, farenin trakeasını bulmak için ışıklı bir entübatör kullanır ve daha sonra LPS’yi trakea ve akciğere iletir. Bu yöntem, LPS’yi akciğerlere intranazal doğum yönteminden daha doğru bir şekilde iletir. Cerrahi trakeal entübasyon ile karşılaştırıldığında, bu yöntem ameliyat gerektirmez, yaralara neden olmaktan kaçınır ve farelerde ağrıyı azaltır10. Bu nedenle, bu yöntem ALI’nin daha ikna edici bir fare modelini oluşturmak için kullanılabilir.
Başlangıçta, trakea19’un yerini bulmak için ağız boşluğunun içine baktık. Bununla birlikte, bu işlem sırasında, C57 / BL farelerinin trakeasının dar olduğunu keşfettik, bu da endoskop20 gibi ekipmanların yardımı olmadan bu yöntemle doğru yeri bulmayı zorlaştırıyor. Daha fazla araştırma üzerine, entübatör lambasından gelen ışığın vücudun yüzeyine nüfuz edebileceğini ve operatörün kanül21’in konumunu belirlem…
The authors have nothing to disclose.
Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No.: 81903902), Çin Doktora Sonrası Bilim Vakfı (No.: 2019M663457), Sichuan Bilim ve Teknoloji Programı (No.: 2020YJ0172) ve Chengdu TCM Üniversitesi Xinglin Scholar Research Premotion Projesi (No.: QJRC2022053) tarafından desteklenmiştir.
Lipopolysaccharide | MERK | L4130 | LPS |
Microliter Syringes | SHANGHAI GAOGE INDUSTRY AND TRADE CO., LTD | 10028505008124 | To deliver LPS |
Mouse cannula | RWD Life Science | 803-03008-00 | Mouse cannula |
Mouse intubation kit | RWD Life Science | 903-03027-00 | Including a base, a riser, a intubator, a surgical forceps and some strings |
Pasteur pipette | Biosharp life science | BS-XG-03 | To verify the success of intubation |
Pentobarbital sodium | Beijing Chemical Co., China | 20220918 | To anesthetize mice |