Microbiële controle- en monitoringstrategieën voor cleanroomomgevingen en cellulaire therapieën
Summary
Het protocol vat de beste praktijken samen om microbiële bioburden in een cleanroomomgeving te minimaliseren en omvat strategieën zoals milieumonitoring, procesbewaking en productsteriliteitstests. Het is relevant voor productie- en testfaciliteiten die moeten voldoen aan de huidige normen voor goede weefselpraktijken en de huidige normen voor goede productiepraktijken.
Abstract
Een goed gevalideerd en holistisch programma dat robuuste toga’s, reiniging, milieumonitoring en personeelsbewakingsmaatregelen omvat, is van cruciaal belang voor het minimaliseren van de microbiële bioburden in productiesuites voor cellulaire therapie en de bijbehorende testlaboratoria om ervoor te zorgen dat de faciliteiten in een staat van controle werken. Het waarborgen van productveiligheid door middel van kwaliteitscontrolemaatregelen, zoals steriliteitstests, is een wettelijke vereiste voor zowel minimaal gemanipuleerde (sectie 361) als meer dan minimaal gemanipuleerde (sectie 351) menselijke cellen, weefsels en cellulaire en op weefsel gebaseerde producten (HCT / Ps). In deze video bieden we een stapsgewijze handleiding voor het ontwikkelen en opnemen van de beste aseptische praktijken voor het werken in een cleanroomomgeving, waaronder jassen, reiniging, stadiëring van materialen, milieumonitoring, procesbewaking en productsteriliteitstests met behulp van directe inenting, geleverd door de United States Pharmacopeia (USP ) en de National Institutes of Health (NIH) Alternative Sterility Testing Method. Dit protocol is bedoeld als referentiegids voor instellingen die geacht worden te voldoen aan de huidige goede weefselpraktijken (cGTP) en de huidige goede fabricagepraktijken (cGMP).
Introduction
Het implementeren van een sterk microbieel monitoringprogramma door middel van omgevingsmonitoring (EM), procesmonitoring en productsteriliteitstests is een wettelijke vereiste voor de huidige goede weefselpraktijken (cGTP) en de huidige goede productiepraktijken (cGMP) in cellulaire therapielaboratoria1. Bovendien verwacht de Amerikaanse Food and Drug Administration (FDA) dat het laboratorium dat de kwaliteitscontrole (QC) -tests van het product uitvoert, ook faciliteiten en controles moet gebruiken die vergelijkbaar zijn met die welke worden gebruikt voor aseptische vulbewerkingen2.
Dit protocol heeft vier hoofdsecties: 1) Aseptische praktijken, waaronder het werven van personeel, het schoonmaken en ensceneren van materialen; 2) EM, met inbegrip van levensvatbare lucht- en oppervlakteculturen en niet-levensvatbare deeltjesluchtmonitoring; 3) procesbewaking, met inbegrip van bezinkplaten en gehandschoende vingertopbemonstering; en 4) steriliteitstests van producten via de compendial United States Pharmacopeia (USP) methode3 of de NIH Alternative Sterility Testing Method4. Wanneer deze maatregelen samen worden gebruikt, kunnen ze een effectieve methode zijn om ervoor te zorgen dat een faciliteit in een staat van controle blijft.
De hier beschreven technieken zijn niet nieuw; De huidige normen van regelgevers en professionele organisaties missen echter details, wat heeft geleid tot een afwezigheid van microbiële monitoring of de implementatie van niet-gestandaardiseerde praktijken, met name in academische centra waar on-site productie en productsteriliteitstests in een snel tempo opkomen 1,5,6 . Dit protocol kan worden gebruikt als een gids voor het maken van een microbieel monitoring- en controleprogramma dat voldoet aan de wettelijke vereisten wanneer het wordt gebruikt in combinatie met validatie van eindgebruikers en risicobeoordelingen.
Protocol
Representative Results
Discussion
Er zijn verschillende kritieke gebieden in dit protocol, waaronder het onderhoud van aseptische techniek en unidirectionele luchtstroom binnen cleanrooms en de BSC’s. Best practices omvatten langzaam en opzettelijk bewegen om turbulentie te minimaliseren. Aseptische manipulaties moeten vanaf de zijkant van het product worden uitgevoerd, niet van bovenaf. Verwerking van gesloten systemen en het gebruik van terminaal gesteriliseerde grondstoffen worden aanbevolen. Spreken in kritieke gebieden en leunen tegen muren of appar…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Dit werk werd ondersteund door het intramurale onderzoeksprogramma van het National Institutes of Health Clinical Center. De inhoud is uitsluitend de verantwoordelijkheid van de auteurs en vertegenwoordigt niet de officiële standpunten van de National Institutes of Health.
Materials
| 20-25°C Incubator | Lab preference | ||
| 30-35°C Incubator | Lab preference | ||
| Alcohol-based hand sanitizer | Lab preference | ||
| BacT/ALERT Dual-T instrument | BioMerieux Industry | ||
| Beard cover | Lab preference | ||
| Biosafety cabinet (BSC) | Lab preference | ||
| Cleanroom shoes | Lab preference | ||
| Fluidthioglycollate medium (FTM) | Hardy Diagnostics | U84 | USP |
| Handheld cleaning mop | Contec | 2665LF | |
| Hypodermic needle | Lab preference | ||
| iFA+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412990 | |
| iFN+ BacT/ALERT bottle | Biomerieux | 412991 | |
| Isokinetic head | Lab preference | ||
| Laser particle counter | TSI Incorporated | 9500-01 | |
| LpH III | Steris | 1S16CX | |
| Mirror | Lab preference | ||
| Non-sterile bouffant | Lab preference | ||
| Non-sterile gloves | Lab preference | ||
| Non-sterile shoe covers | Lab preference | ||
| Non-sterile sleeve covers | Lab preference | ||
| Parafilm | Lab preference | ||
| Peridox RTU | Contec | CR85335IR | |
| Plastic bag | Lab preference | ||
| Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT) | Hardy Diagnostics | P595 | USP, irradiated |
| Sabouraurd Dextrose Agar (SAB) | Hardy Diagnostics | W565 | USP, irradiated |
| Safety glasses | Lab preference | ||
| Scrubs (top and bottom) | Lab preference | ||
| Spor-Klenx RTU | Steris | 6525M2 | |
| Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA) | Decon CiDehol | 8316 | |
| Sterile alcohol wipe | Lab preference | ||
| Sterile boot covers | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile coveralls | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile face mask | Lab preference | ||
| Sterile gloves | Lab preference | ||
| Sterile hood | Kimberly Clark | Cat# varies based on size | |
| Sterile low-lint wipes | Texwipe | TX3210 | |
| Sterile mop cleaning pads | Contec | MEQT0002SZ | |
| Sterile sleeve covers | Kimberly Clark | 36077 | |
| Sterile spreading rod | Fisher Scientific | 14665231 | |
| Sterile syringe | Lab preference | ||
| Tacky mats | Lab preference | ||
| Tryptic Soy Agar (TSA) | Hardy Diagnostics | W570R | USP, irradiated |
| Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT) | Hardy Diagnostics | P520R | USP, irradiated |
| Tryptic Soy Broth (TSB) | Hardy Diagnostics | U46 | USP |
| Tubing | Lab preference | ||
| Vesphene III | Steris | 1S15CX | |
| Viable air sampler | Hardy Diagnostics | BAS22K | |
| Vortex | Lab preference |
References
- Cundell, T., Atkins, J. W., Lau, A. F. Sterility testing for hematopoietic stem cells. Journal of Clinical Microbiology. , (2023).
- United States Food and Drug Administration. Guidance for Industry. Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing – Current Good Manufacturing Practice. United States Food and Drug Administration. , (2004).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<71> Sterility Tests in USP43-NF38. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2022).
- England, M. R., Stock, F., Gebo, J. E. T., Frank, K. M., Lau, A. F. Comprehensive evaluation of compendial USP<71>, BacT/Alert Dual-T, and Bactec FX for detection of product sterility testing contaminants. Journal of Clinical Microbiology. 57 (2), 01548 (2019).
- Gebo, J. E. T., East, A. D., Lau, A. F. A side-by-side comparison of clinical versus current good manufacturing practices (cGMP) microbiology laboratory requirements for sterility testing of cellular and gene therapy products. Clinical Microbiology Newsletter. 43 (21), 181-191 (2021).
- Gebo, J. E. T., Lau, A. F. Sterility testing for cellular therapies: What is the role of the clinical microbiology laboratory. Journal of Clinical Microbiology. 58 (7), 01492 (2020).
- International Organization for Standardization. ISO 14644-1:2015 Cleanrooms and associated controlled environments – Part 1: Classification of air cleanliness by particle concentration. International Organization for Standardization. , (2015).
- Parenteral Drug Association. PDA Technical Report No. 13 Revised 2022 (TR 13) Fundamentals of an Environmental Monitoring Program. Parenteral Drug Association, Inc. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1116> Microbiological Evaluation of Cleanrooms and Other Controlled Environments in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- Guinet, R., et al. Multicenter study on incubation conditions for environmental monitoring and aseptic process simulation. PDA journal of pharmaceutical science and technology. 71 (1), 43-49 (2017).
- Gordon, O., Berchtold, M., Staerk, A., Roesti, D. Comparison of different incubation conditions for microbiological environmental monitoring. PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology. 68 (5), 394-406 (2014).
- Anders, H. J., et al. Multisite qualification of an automated incubator and colony counter for environmental and bioburden applications in pharmaceutical microbiology. PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1072> Disinfectants and Antiseptics. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<1071> Rapid Microbial Tests for Release of Sterile Short-Life Products: A Risk-Based Approach in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. PUSP<1223> Validation of Alternative Microbiological Methods in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
- Parenteral Drug Association. PDA Technical Report No. 33, Revised 2013 (TR 33) Evaluation, Validation and Implementation of Alternative and Rapid Microbiological Methods. Parenteral Drug Association, Inc. , (2013).
- Putnam, N. E., Lau, A. F. Comprehensive study identifies a sensitive, low-risk, closed-system model for detection of fungal contaminants in cell and gene therapy products. Journal of Clinical Microbiology. 59 (11), 0135721 (2021).
- Pharmaceutical Inspection Convention & Pharmaceutical Inspection Co-operation. Guide to Good Manufacturing Practice for Medicinal Products Annexes (PE 009-16 (Annexes)). Pharmaceutical Inspection Convention & Pharmaceutical Inspection Co-operation Scheme. , (2022).
- United States Pharmacopeia – National Formulary. USP<825> Radiopharmaceuticals – Preparation, Compounding, Dispensing, and Repackaging in USP43-NF38 2S. United States Pharmacopeia – National Formulary. , (2020).
