אנו מציגים פרוטוקול למניפולציה של Tuina המבוצעת על חולדות אוסטיאוארתריטיס ברך המושרה על ידי גבס. בהתבסס על התוצאות הראשוניות, הוא הציע כי יעילות השיטה מסתמכת על הפחתת דלקת ואובדן סחוס.
ניסויים קליניים מצביעים על כך שמניפולציה של Tuina יעילה בטיפול בדלקת מפרקים ניוונית של הברך (KOA), בעוד שנדרשים מחקרים נוספים כדי לגלות את המנגנון שלה. לכן, מניפולציה של מודלים בעלי חיים של osteoarthritis הברך הוא קריטי. פרוטוקול זה מספק תהליך סטנדרטי למניפולציה של Tuina על חולדות KOA וחקירה ראשונית של המנגנון של Tuina עבור KOA. שיטת מניפולציית הלחיצה והלישה (סוג של מניפולציה של טווינה המתייחסת ללחיצה ולישה של האזור הספציפי של משטח הגוף) מיושמת על 5 נקודות דיקור סביב מפרק הברך של חולדות. הכוח והתדירות של המניפולציה תוקנו על ידי רישומי לחץ אצבע, ומיקום החולדה במהלך המניפולציה מתואר בפירוט בפרוטוקול. השפעת המניפולציה ניתנת למדידה על ידי בדיקות התנהגות כאב וממצאים מיקרוסקופיים בסינוביאל ובסחוס. חולדות KOA הראו שיפור משמעותי בהתנהגות הכאב. ההסננה הדלקתית של הרקמה הסינוביאלית הופחתה בקבוצת טווינה, והביטוי של גורם נמק גידולי (TNF)-α היה נמוך משמעותית. בהשוואה לקבוצת הביקורת, אפופטוזיס כונדרוציטים היה פחות בקבוצת טווינה. מחקר זה מספק פרוטוקול סטנדרטי למניפולציה של Tuina על חולדות KOA והוכחה ראשונית לכך שההשפעות הטיפוליות של Tuina עשויות להיות קשורות להפחתת דלקת סינוביאלית ואפופטוזיס כונדרוציטים מאוחר.
דלקת מפרקים ניוונית בברך (KOA) היא מחלה ניוונית המתבטאת בעיקר בכאבי מפרקים. פיברוזיס, סדקים, כיבים ואובדן סחוס מפרקי הם הגורמים העיקריים למחלה זו1. KOA יש שכיחות גבוהה עלולה לגרום השפעה עמוקה על חיי היומיום של החולים, גרימת נכות במקרים חמורים. בקרב אנשים בגילאי 45-84 שנים, שכיחות KOA עולה עם הגיל, והשכיחות בקרב אנשים בני 85 ומעלה היא 15%, עם דומיננטיות בקרב נשים 2,3. בנוסף, KOA עלול להביא נטל כלכלי רציני הן על הפרט והן על החברה. סקר הראה כי עלויות הבריאות הישירות על KOA לנפש הגיעו עד 8,858 $ ± 5,120 $ בשנה4. עם הזדקנות החברה, KOA הפך לבעיית בריאות עולמית ולנושא חברתי מרכזי, כמו גם נושא אקטואלי למחקר מדעי.
מחקרים מבוססי ראיות הראו את היעילות של מניפולציה Tuina בטיפול KOA5. מניפולציה Tuina יכול להקל על הכאב ולשפר תפקוד לקוי בחולי KOA, המנגנון של אשר קשור השפעות אנטי דלקתיות 6,7. חוקרים מצאו כי מניפולציה של Tuina עיכבה ביעילות את הביטוי של גורמים דלקתיים אינטרלוקין (IL)-β ו-5-hydroxytryptamine והאטה את התנוונות הסחוס המפרקי בארנב KOA מודל8. הוא הציע כי Tuina יכול לקדם את זרימת הדם ואת חילוף החומרים באתר הנגע, אשר עזר לנקות גורמים דלקתיים כגון IL-1, IL-6 וגורם נמק הגידול (TNF)-α, ובכך להקל על הסימפטומים הקליניים של KOA9. בנוסף, התנועה הפסיבית של המפרק באמצעות מניפולציה Tuina יכול לקדם את החדירה ואת הדיפוזיה של נוזל סינוביאלי לתוך הסחוס המפרקי ומשפר את חילוף החומרים המזינים רקמות10. מחקרים אחרים הצביעו על כך שמניפולציה של טווינה יכולה לשפר ביעילות את המדדים הביומכניים בחולי KOA11. מניפולציות המופעלות על רקמות רכות יכולות לשפר את פיזור הלחץ על הגפיים ולשפר את תפקוד שיווי המשקל12,13. יחד עם זאת, עם כמה מניפולציות התאמה משותפת, יישור הגפיים התחתונות יכול גם להיות מותאם לתקן הליכה חריגה14,15.
מנגנון הפעולה של מניפולציה Tuina בטיפול KOA עדיין צריך להיחקר, ולכן, מחקר ניסיוני הוא הכרחי. המפתח ליישום של טווינה בחיות ניסוי הוא סטנדרטיזציה של דוגמנות, קיבוע בעלי חיים ושיטות התערבות16. שיטת המידול קובעת אם חיית הניסוי יכולה להציג את מאפייני המחלה. בינתיים, שיטות קיבוע מתאימות יכול להקל על התערבות של מניפולציה Tuina לשקף טוב יותר את ההשפעה של Tuina. הסטנדרטיזציה של שיטות התערבות היא החלק הקשה ביותר של מניפולציה Tuina. בשנת 2010, המערכת הבסיסית של תקני הדיקור הסיני הזכירה את תקני נקודת הדיקור לבעלי חיים ניסיוניים, המספקים אפשרות לדיקור סיני וניתוחי טווינה בניסויים בבעלי חיים17. עם זאת, עדיין קיימים קשיים בסטנדרטיזציה של מניפולציה של טווינה. ישנם מספר סוגים של מניפולציה Tuina18. הבחירה במניפולציה הספציפית תלויה בעיקר במחלה שיש לטפל בה ובתיאוריות הטיפוליות שהמבצע מעדיף. במחקר של Tuina for KOA, תשומת לב רבה יותר הוקדשה למניפולציה של לחיצה נקודתית (לחיצה על נקודות הדיקור הספציפיות עם האגודל או המרפק), מניפולציית דחיפת Yizhichan (מניפולציית דחיפה על ידי נענוע האגודל), ומניפולציית לחיצה ולישה (המתייחסת ללחיצה ולישה של האזור הספציפי של משטח הגוף באמצעות אצבע או כף יד)19. מניפולציה של לחיצה ולישה היא אחת המניפולציות הנפוצות ביותר של טווינה, המשלבת לחיצה ולישה כדי להזיז את הרקמה התת עורית20. מניפולציה של לחיצה ולישה המיושמת על נקודות דיקור יכולה לקדם את זרימת הדם ולהקל על הכאב ומייצגת את ההשפעה הטיפולית של טווינה על KOA19.
בפרוטוקול זה יתוארו בפירוט פעולות המניפולציה של לחיצה ולישה על חולדות KOA, כולל נקודות דיקור נבחרות, עוצמת ותדירות המניפולציה ותנוחת הגוף של החולדה, כדי לספק התייחסות למחקר עתידי.
מחקר זה מספק פרוטוקול למניפולציה של Tuina על חולדות KOA. באמצעות בדיקות התנהגות כאב וממצאים היסטומורפולוגיים, הוא הציע כי סדרה כזו של מניפולציה Tuina המיושמת על חולדות KOA יכולה להפחית דלקת סינוביאלית ואפופטוזיס סחוס, אשר יכול להיות התייחסות של מניפולציה Tuina על מודלים בעלי חיים של KOA.
<p class="jove_cont…The authors have nothing to disclose.
עבודה זו נתמכה על ידי Shanghai Critical Clinical Specialties Construction Project (מספר מענק: Shslczdzk04001); תוכנית השיט של ועדת המדע והטכנולוגיה של שנגחאי (מספר מענק: 22YF1444300); פרויקטים במסגרת תקציב אוניברסיטת שנגחאי לרפואה סינית מסורתית (מספר מענק: 2021LK091).
absolute ethanol | Supelco | PHR1070 | For making specimen |
ALMEMO admeasuring apparatus | ahlborn | 2450-1 | For Mechanical Withdrawal Threshold test |
Anti-Digoxin antibody | Sigma-Aldrich | SAB4200669 | For HE stain IHC or TUNEL |
Anti-IL-1 beta | abcam | ab283818 | For HE stain IHC or TUNEL |
DAB Substrate kit | Solarbio | DA1010 | For HE stain IHC or TUNEL |
Denture base materials | Shanghai New Century | 20000356 | For model making |
eosin | bioswamp | PAB180016 | For HE stain IHC or TUNEL |
Finger pressure recordings | Suzhou Changxian Optoelectronic Technology | CX1003w | For Tuina manipulation |
formic acid solution | Sigma-Aldrich | 695076 | For decalcification |
H2O2 | Sigma-Aldrich | 386790-M | For HE stain IHC or TUNEL |
hematoxylin | bioswamp | PAB180015 | For HE stain IHC or TUNEL |
Isoflurane | Shanghai Yuyan Scientific Instrument Company | S10010533 | For gas anesthesia |
neutral resins | bioswamp | PAB180017 | For HE stain IHC or TUNEL |
Paraformaldehyde Fix Solution | Sigma-Aldrich | 100496 | For histology |
PBS | Sigma-Aldrich | P3813 | For HE stain IHC or TUNEL |
Plantar Test Apparatus | IITC Life Science | / | For Paw Withdrawal Latency test |
plaster of Paris bandage | WANDE | 20150023 | For model making |
Proteinase K | Sigma-Aldrich | 124568 | For HE stain IHC or TUNEL |
TNF Alpha Monoclonal antibody | Proteintech | 60291-1-Ig | For HE stain IHC or TUNEL |
TUNEL | Servicebio | GDP1042 | For HE stain IHC or TUNEL |
Wax | Sigma-Aldrich | 327204 | For making specimen |
xylene | Shanghai Sinopharm Group | 100092 | For making specimen |