Operação de eletroacupuntura em massa para camundongos ou ratos jovens

Summary

Aqui, apresentamos um protocolo para eletroacupuntura (EA) eficiente e rápida em camundongos ou ratos jovens usando um suporte impresso tridimensional (3D). Esta técnica permite a operação simultânea em vários animais, economizando tempo e aumentando a eficiência experimental.

Abstract

A eletroacupuntura (EA) é amplamente utilizada para tratar várias condições de saúde. No entanto, o mecanismo subjacente do tratamento da EA permanece obscuro, dificultando sua promoção. O estudo mecanicista requer modelos de camundongos ou ratos para abordar essa questão. No entanto, esses animais não são obedientes ao processo experimental, que é demorado. Para resolver esses problemas, projetamos um fixador de corpo de pequenos animais impresso em 3D para melhorar a eficiência dos experimentos com animais da EA. Este vídeo mostra em detalhes como usar o fixador para executar EA em massa em camundongos ou ratos jovens. Para a seleção dos acupontos, optou-se pela linha oblíqua anterior do vértex temporal (cabeça MS6) e ponto de Tianshu (barriga ST25) para verificar o efeito do dispositivo de fixação com posição prona e posição supina. O uso do porta-animais de pequeno porte impresso em 3D permite que vários roedores sejam imobilizados e tratados simultaneamente, reduzindo o tempo e os recursos necessários para o experimento. Esta técnica poderia ser aplicada a outros modelos animais por impressão 3D de diferentes tamanhos e poderia potencialmente ser usada para várias condições de fixação. O dispositivo é benéfico para a promoção da pesquisa científica experimental em EA.

Introduction

A eletroacupuntura (EA) é um método único no qual agulhas de acupuntura são inseridas no couro cabeludo e conectadas a uma eletromáquina para estimular pontos específicos¹. Ao contrário da estimulação manual, a AE permite um melhor controle da estimulação, estabilizando frequências e formas de onda específicas para alcançar efeitos terapêuticos ótimos². De acordo com uma pesquisa, 81,2% das instituições médicas na China usam EA ou acupuntura manual para tratar paralisia cerebral, neuralgia, paralisia facial e outras condições. Apesar de sua popularidade, o mecanismo específico de eficácia da EA ainda é desconhecido, o que tem dificultado sua promoção e aplicação no tratamento reabilitador de doenças neurológicas ^1,2,3. Mais pesquisas são necessárias para compreender completamente o mecanismo de eficácia da EA e promover seu uso no tratamento de reabilitação de doenças neurológicas.

À medida que a influência da acupuntura se expande em todo o mundo, muitos estudos já investigaram os mecanismos de EA realizados em modelos de roedores, como modelos de ratos ou camundongos ^1,2,3. Vários problemas são frequentemente encontrados nos experimentos de roedores da EA. A primeira é como imobilizar roedores sem anestesia, já que a acupuntura realizada em indivíduos acordados é mais reflexiva da prática clínica. Além disso, alguns experimentos requerem que os animais estejam acordados para observar os efeitos do tratamento ^2,3. Outro desafio é localizar com precisão os acupontos em camundongos ou ratos que correspondem aos dos humanos. A localização precisa de acupontos em roedores experimentais está sendo estudada por muitos estudiosos ^4,5. Nesse protocolo, foram selecionadas as SM6 e ST25, as quais foram claramente definidas em roedores pela transformação da localização anatômica humana. A MS6 é comumente utilizada para o tratamento de algumas doenças cerebrais, como a doença de Parkinson⁶. O ST25 é usualmente utilizado para tratar problemas gastrointestinais, como diarreia⁷. Esses dois acupontos foram escolhidos principalmente para demonstrar como os roedores podem ser efetivamente imobilizados tanto na posição supina quanto na posição prona. Além disso, esses acupontos têm sido extensivamente estudados e oferecem insights significativos para fins de pesquisa ^6,7.

O método anterior de imobilização de um único rato para experimentos não é apenas demorado, mas também difícil de manusear por uma única pessoa⁸. Além disso, devido à não cooperação dos animais, a taxa de sucesso é relativamente baixa na prática. Portanto, há uma necessidade crítica de criar um modelo animal facilmente estabelecido com características estáveis para melhorar a eficiência do experimento. Neste artigo, foi introduzido um suporte impresso em 3D para pequenos animais que poderia facilmente imobilizar múltiplos roedores, levando à restrição motora. O objetivo deste trabalho é administrar tratamentos de EA a um lote de ratos jovens ou camundongos, enfocando as estratégias de restrição em massa de camundongos, identificação e estimulação de acupontos MS6 e ST25.

Protocol

Os experimentos deste estudo obedecem ao princípio “3Rs” da ética animal e foram aprovados pelo Comitê de Bem-Estar Animal e Etnia do Laboratório da Universidade de Medicina do Exército (AMUWEC20234543). 1. Preparo do dispositivo de fixação do corpo de roedores Projetar um pequeno porta-animais com base na patente do modelo de utilidade chinês9. Produza o dispositivo através da tecnologia de impressão 3D. Prepare …

Representative Results

A planta baixa do fixador do corpo do animal que projetamos é mostrada na Figura 1. Além disso, um modelo gráfico 3D deste fixador foi submetido para fornecer uma visão abrangente do projeto (Arquivo Suplementar 1). Trata-se de um dispositivo que permite imobilizar 3 roedores e realizar EA simultaneamente. Ratos e camundongos ficaram restritos ao fixador em estado de vigília, e tanto a posição prona quanto a supina puderam ser firmemente fixadas sem causar lesão aos …

Discussion

A eletroacupuntura (EA) é uma forma de acupuntura que envolve o uso de estimulação elétrica em agulhas de acupuntura¹¹. Essa técnica envolve o uso de microcorrentes de pulso de intensidade e frequência específicas para estimular pontos de acupuntura e alcançar efeitos terapêuticos aprimorados³. No entanto, o mecanismo de EA para cicatrização é limitado e requer extensa pesquisa básica para comprovação1,2,3.^…

Materials

3D printing batch mice fixator	MESH INVENT	Custom made	The fixator produced by 3D printer. The printing method is called fused deposition modeling (FDM), also known as fused filament fabrication (FFF).
Electroacupuncture instrument	Hwato, Suzhou Medical Appliance Factory	SDZ-III	www.Hwato-med.com
Disposable sterile acupuncture needle	Suzhou Medical Appliance Factory	N/A	0.25 mm x 13 mm