Verbeterde fixatie van de suspensie met behulp van rattenjas in acupunctuurexperimenten bij ratten
Summary
Hier presenteren we een verbeterde fixatiemethode voor suspensie met behulp van een rattenjas om ratten effectief te immobiliseren tijdens acupunctuurexperimenten. Verder wordt de structuur en toepassing van dit fixatieapparaat, evenals instructies en evaluatie voor het gebruik ervan in elektro-acupunctuurtherapie, toegelicht.
Abstract
In fundamenteel experimenteel acupunctuuronderzoek worden ratten vaak gebruikt als proefdieren. Het is echter moeilijk voor hen om een vaste houding aan te nemen. Tijdens elektro-acupunctuurprocedures is een goede immobilisatie van ratten essentieel. Er worden momenteel verschillende methoden voor rattenfixatie gebruikt, waaronder anesthesiefixatie, fixatie op hoog platform, bindende fixatie en fixatie met een zelfgemaakte rattenjas. Deze methoden hebben echter hun beperkingen, die de efficiëntie en bruikbaarheid van het experiment tot op zekere hoogte kunnen beïnvloeden. Dit protocol introduceert een methode om ratten op te hangen en te fixeren met behulp van rattenkleding. Ten eerste zijn ratten gekleed in rattenjassen die passen bij hun lichaamsvorm, gebruikmakend van hun voorkeur voor duisternis en graven. De needling-operatie kan dan worden uitgevoerd nadat de ratten rattenkleding hebben gedragen. Wanneer ze hangen, zijn de ratten relatief stil, omdat hun ledematen niet kunnen bewegen. Deze fixatiemethode biedt niet alleen economische en gebruiksvriendelijke voordelen, maar zorgt ook voor een stabiele en betrouwbare fixatie van de ratten in een comfortabel ontspannen positie. Het minimaliseert ook effectief het tijdsverbruik, de experimentele ruimte en de mankracht. Bovendien maakt deze methode het mogelijk om de meeste acupunten die worden gebruikt voor acupunctuur bij ratten bloot te leggen. Dit artikel concentreert zich voornamelijk op de samenstelling van het apparaat, met een speciaal ontworpen rattenjas, een verhoogd fixatierek en hun verbindingsstructuren. Daarnaast zal een illustratief voorbeeld worden gepresenteerd om de toepassing van de op rattenkleding gebaseerde suspensiefixatiemethode in elektro-acupunctuurprocedures bij ratten te demonstreren.
Introduction
Acupunctuur is een traditionele therapie die wordt gekenmerkt door naalden op specifieke acupunten of andere posities om ziekten te voorkomen en te behandelen. Elektro-acupunctuur combineert filiforme naalden met elektrische stimulatie1, wat een nauwkeurige controle over de hoeveelheid stimulatie mogelijk maakt door relevante parameters aan te passen, waardoor de standaardisatie van acupunctuurbehandeling2 wordt bevorderd. In de afgelopen jaren is het onderzoek naar de mechanismen van elektro-acupunctuur blijven uitbreiden en verdiepen3,4, wat heeft geleid tot een jaarlijkse toename van studies die zich richten op de mechanismen van elektro-acupunctuur5.
In fundamenteel onderzoek naar elektro-acupunctuur zijn ratten de meest gebruikte dieren. Tijdens een elektro-acupunctuurbehandeling moet de ontvanger stil blijven staan om een vlotte procedure te garanderen. In tegenstelling tot klinische onderzoeken met menselijke proefpersonen, kunnen kleine dieren die in dierproeven worden gebruikt, commando’s niet bewust opvolgen tijdens langdurige elektro-acupunctuurprocedures van 15-30 minuten. Dit stelt onderzoekers voor een primaire uitdaging om een stabiele en betrouwbare fixatie te bereiken. Onjuiste fixatie kan leiden tot negatieve emoties zoals angst, depressie en angst bij dieren6, wat niet alleen het risico op letsel voor ratten en de kans om gebeten te worden voor het experimentele personeel verhoogt, maar ook de stabiliteit en overtuigingskracht van onderzoeksresultaten beïnvloedt.
In eerdere studies hebben onderzoekers vaak gebruik gemaakt van anesthesiefixatie7, hoge platformfixatie8, bindende fixatie 6,9 of rattenvachtfixatie10 vóór acupunctuur- of elektro-acupunctuuroperaties. Gezien de effecten van anesthesie op het lichaam11 en de hersenfunctie12, en gezien het feit dat acupunctuur in klinische gevallen wordt uitgevoerd bij bewuste patiënten, kan anesthesie de onderzoeksresultaten tot op zekere hoogte beïnvloeden. Daarom is, in vergelijking met anesthesiefixatie, comfortabele fixatie van ratten in wakkere toestand een betere optie.
In niet-verdoofde toestand hebben verschillende fixatiemethoden echter ook hun respectievelijke beperkingen, waaronder beperkte blootstelling aan acupunten als gevolg van het bedekken van de rattenvacht bij ratten 10, de noodzaak van ten minste twee personen om de operatie uit te voeren13, niet-verstelbare fixatormaat14, of de gestreste toestand van ratten in een geforceerde positie6. Om deze technische problemen aan te pakken, hebben we een rattenjas en een fixatierek ontworpen die geschikt zijn voor acupunctuurmanipulatie in de meeste delen van het rattenlichaam. Dit kan onderzoekers helpen om acupunctuurprocedures met ratten efficiënt uit te voeren.
De grondgedachte voor dit protocol is als volgt: ten eerste maakt het gesloten hoofddeksel op de jas van de rat gebruik van de natuurlijke neiging van de ratten om te schemeren en te graven, waardoor hun scala aan activiteiten wordt beperkt. Ten tweede zorgen de bindtouwen in de buurt van de gewrichten van de ledematen van de ratten voor fysieke compressiebeperking, waardoor hun bewegingen bepaalde beperkingen opleggen. Ratten kunnen echter nog steeds springen en horizontaal bewegen, zelfs als ze de jas dragen. Ten slotte, omdat ratten de grond niet kunnen raken zonder een vast krachtpunt wanneer ze hangen, hebben we een ophangfixatieapparaat aan de rattenjas toegevoegd, waardoor hun bewegingen verder worden beperkt en de naald wordt vastgehouden. De samenstelling van het fixatieapparaat is weergegeven in figuur 1.
Figuur 1: Schematische weergave van het rattenjack en de bevestiging van de ophanging. (A) Het algemene uiterlijk van de rattenjas in een plat aanzicht. (B) Driedimensionale weergave van het rattenjasje. (C) Speciaal op maat gemaakte rattenjas met een incisie in de buurt van de acupunten op het hoofd en de taille op de rug. (D) Illustratie van meerdere ratten die tegelijkertijd aan het verhoogde rek hangen. 1: Stof totaalaanzicht; 2: Uitlaat voorpoot; 3: Uitlaat van de achterpoten; 4: Touw binden; 5: Holte gevormd na het hechten; 6: Incisie voor het blootleggen van acupunten in het hoofd; 7: Incisie voor het blootleggen van acupunten in rug en taille. 8: Hechtingspositie. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Protocol
Representative Results
Discussion
Van elektro-acupunctuur is aangetoond dat het goede therapeutische effecten heeft op verschillende ziekten, zoals cognitieve stoornissen16,17, myocardletsel 18 en ontstekingspijn 19. Om het werkingsmechanisme te begrijpen, zijn dierproeven uitgevoerd waarbij voornamelijk ratten werden gebruikt. Fixatie van de dieren tijdens de procedures is cruciaal voor nauwkeurige resultaten. Hoewel veel onderzoeken elektro-acupun…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
De auteurs willen graag hun dank betuigen aan het Figdraw-tekenplatform voor wetenschappelijk onderzoek van het Home for Researchers voor het verstrekken van het materiaal dat is gebruikt om figuur 2 in dit artikel te maken, met geautoriseerde licentie-ID: URUUO5699e. Dit werk heeft steun gekregen van subsidies van de National Natural Science Foundation of China (81873380, 82074566), de Natural Science Foundation van de provincie Hubei (2022CFCO43) en het National Famous Traditional Chinese Medicine Heritage Studio Construction Project van de National Administration of Traditional Chinese Medicine ([2022] nr. 5, [2022] nr. 75).
Materials
| 75% alcohol | Shandong Lircon medical technology co., ltd | 2002-0059 | Disinfection |
| acupuncture needles | Beijing Luo ya shan chuan medical equipment co., Ltd. | needling | |
| Adult Sprague-Dawley (SD) rats | Liaoning Changsheng biotechnology co., Ltd. | SCXK 2020-0001 | The recipient subjected to fixation |
| an elevated fixation rack | Taizhou shiai instruments and equipments for scientific and teaching research Co., ltd | / | Fix rats |
| Hans electronic acupuncture apparatus | Beijing Huayun Ante Science and Technology Co. Ltd. | HANS-200A | electroacupuncture |
| Medical cotton ball | Jiangsu Misawa Medical Supplies Co., Ltd. | 20172142357 | Disinfection |
| Pet electric clipper | Fenghua Xikou Lubao Knives & Scissors Electrical Appliance Factory | / | Shave the hair of rats |
| Tweezers | Qingdao Schultz Biotechnology Co., ltd | Pinch cotton balls |
References
- Liu, Z., et al. Effect of Electroacupuncture on Urinary Leakage Among Women With Stress Urinary Incontinence: A Randomized Clinical Trial. The Journal of the American Medical Association. 317 (24), 2493-2501 (2017).
- Tsuei, J. J. Recent developments in clinical acupuncture. The American Journal of Chinese Medicine. 11 (1-4), 150-158 (1983).
- Liu, S., et al. Somatotopic Organization and Intensity Dependence in Driving Distinct NPY-Expressing Sympathetic Pathways by Electroacupuncture. Neuron. 108 (3), 436-450 (2020).
- Liu, S., et al. A neuroanatomical basis for electroacupuncture to drive the vagal-adrenal axis. Nature. 598 (7882), 641-645 (2021).
- Li, X., Wei, W., Wang, Y., Wang, Q., Liu, Z. Global Trend in the Research and Development of Acupuncture Treatment on Parkinson’s Disease From 2000 to 2021: A Bibliometric Analysis. Frontiers In Neurology. 13, 906317 (2022).
- Jiang, S., et al. Application Progress of fixation methods for rodents under non anesthesia in acupuncture and moxibustion experiments domestically and abroad. Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion. 40 (12), 1509-1514 (2021).
- Jiang, H. Z., et al. Fixation method in the study of acupuncture intervention on rats. Journal of Shanxi College of Traditional Chinese Medicine. 20 (3), 169-171 (2019).
- Wang, Y., Ning, Y., Wang, P. Y., Yang, Y. Q. Method of Placing a Rat on an Elevated Platform for Acupuncture. Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion. 31 (5), 289-292 (2012).
- Wang, F., Xiong, J., Zeng, F., He, Z. X. A fixation frame for acupuncture and moxibustion of Shu-Mu acupoint combination in rats. Acupuncture Research. 47 (10), 938-940 (2022).
- Tu, S., P, C., Y, Y. H. Fixation method for needle warming moxibustion treatment on swinging rats bound with coat. Chinese Journal of Comparative Medicine. 31 (5), 128-132 (2021).
- Redfors, B., Shao, Y., Omerovic, E. Influence of anesthetic agent, depth of anesthesia and body temperature on cardiovascular functional parameters in the rat. Laboratory Animals. 48 (1), 6-14 (2014).
- Kiyatkin, E. A., Brown, P. L. Brain and body temperature homeostasis during sodium pentobarbital anesthesia with and without body warming in rats. Physiology & Behavior. 84 (4), 563-570 (2005).
- He, C., Zhang, C., Zhou, S., Fan, Y. Using old meshy cage cover to make a rat fixating device for acupuncture study. Acupuncture Research. 46 (4), 348-350 (2021).
- Li, Y., Lin, N., Huang, Y., Xue, X., Liu, Q. A Newly-made Rat Holder for Convenient Acupuncture Needle Insertion. Acupuncture Research. 41 (5), 466-468 (2016).
- Bielitzki, J. T., Barbee, R. W., Garber, J. . Guide for the care and use of laboratory animals. 85 (3), 963-965 (2011).
- Zheng, X., et al. Electroacupuncture ameliorates beta-amyloid pathology and cognitive impairment in Alzheimer disease via a novel mechanism involving activation of TFEB (transcription factor EB). Autophagy. 17 (11), 3833-3847 (2021).
- Su, X., et al. Effectiveness and Safety of Acupuncture for Vascular Cognitive Impairment: A Systematic Review and Meta-Analysis. Frontiers In Aging Neuroscience. 13, 692508 (2021).
- Wang, Q., et al. Efficacy of electroacupuncture pretreatment for myocardial injury in patients undergoing percutaneous coronary intervention: A randomized clinical trial with a 2-year follow-up. International Journal of Cardiology. 194, 28-35 (2015).
- Zhang, R., Lao, L., Ren, K., Berman, B. M. Mechanisms of acupuncture-electroacupuncture on persistent pain. Anesthesiology. 120 (2), 482-503 (2014).
