Caractérisation de la morphologie vasculaire de la dégénérescence maculaire néovasculaire liée à l’âge par angiographie au vert d’indocyanine

Summary

Actuellement, l’angiographie à la fluorescéine (AF) est la méthode privilégiée pour identifier les modèles de fuite dans les modèles animaux de néovascularisation choroïdienne (CNV). Cependant, l’AF ne fournit pas d’informations sur la morphologie vasculaire. Ce protocole décrit l’utilisation de l’angiographie au vert d’indocyanine (ICGA) pour caractériser différents types de lésions de CNV induites par laser dans des modèles murins.

Abstract

La dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA) est l’une des principales causes de cécité chez les personnes âgées, et sa prévalence augmente rapidement en raison du vieillissement de la population. La néovascularisation choroïdienne (NVC) ou DMLA humide, qui représente 10 à 20 % de tous les cas de DMLA, est responsable de 80 à 90 % des cécités liées à la DMLA. Les traitements anti-VEGF actuels montrent des réponses sous-optimales chez environ 50 % des patients. La résistance au traitement anti-VEGF chez les patients atteints de CNV est souvent associée à une CNV artériolaire, tandis que les répondeurs ont tendance à avoir une CNV capillaire. Bien que l’angiographie à la fluorescéine (AF) soit couramment utilisée pour évaluer les modèles de fuite chez les patients atteints de DMLA humide et les modèles animaux, elle ne fournit pas d’informations sur la morphologie vasculaire de la CNV (CNV artériolaire vs CNV capillaire). Ce protocole introduit l’utilisation de l’angiographie au vert d’indocyanine (ICGA) pour caractériser les types de lésions dans des modèles murins de CNV induits par laser. Cette méthode est cruciale pour étudier les mécanismes et les stratégies de traitement de la résistance aux anti-VEGF dans la DMLA humide. Il est recommandé d’intégrer l’ICGA aux côtés de l’AF pour une évaluation complète des fuites et des caractéristiques vasculaires de la CNV dans les études mécanistes et thérapeutiques.

Introduction

La dégénérescence maculaire liée à l’âge (DMLA) est une affection répandue qui entraîne une perte de vision sévère chez les personnes âgées¹. Rien qu’aux États-Unis, le nombre de patients atteints de DMLA devrait doubler, atteignant près de 22 millions d’ici 2050, contre 11 millions actuellement. À l’échelle mondiale, le nombre estimé de cas de DMLA devrait atteindre 288 millions d’ici 2040².

La néovascularisation choroïdienne (NVC), également connue sous le nom de DMLA « humide » ou néovasculaire, peut avoir des effets dévastateurs sur la vision en raison de la formation de vaisseaux sanguins....

Protocol

Les expériences sur les animaux menées dans le cadre de cette étude ont reçu l’approbation des comités institutionnels de protection et d’utilisation des animaux (IACUC) du Baylor College of Medicine. Toutes les procédures ont été effectuées conformément aux directives décrites dans la déclaration de l’Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) pour l’utilisation d’animaux dans la recherche ophtalmique et visuelle. Des souris mâles et femelles C57BL/6J jeunes (7 à 9 semaines) et âgées (12 à 16 mois) ont été utilisées pour la présente étude. Les animaux ont été obtenus d’une source commerciale (voir la Table des matières).

Results

Conformément au protocole, l’ICGA et l’AF ont été réalisées sur la CNV induite par laser chez des souris C57BL/6J jeunes (7 à 9 semaines) et âgées (12 à 16 mois). L’AF fournit des informations sur l’emplacement et la fuite des lésions du CNV (Figure 1, panneaux de gauche), tandis que l’ICGA révèle la morphologie vasculaire des lésions du CNV (Figure 1, panneaux de droite). Chez les jeunes souris, la CNV capillaire domine les lésions de CNV. En revanche, les sour.......

Discussion

Cette étude a démontré l’utilisation de l’angiographie au vert d’indocyanine (ICGA) pour identifier la morphologie vasculaire de la néovascularisation choroïdienne artériolaire et capillaire (CNV) dans des modèles murins avec CNV induite par laser. Les propriétés liées à l’hémoglobine et à la lumière infrarouge du colorant vert d’indocyanine (ICG) ont permis de détecter la morphologie des CNV, ce qui est difficile à réaliser à l’aide de l’angiographie à la fluorescéine (FA), la méthode actuellement utilisée par la commun.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
32-G Seringue à insuline	MHC Produits médicaux	NDC 08496-3015-01
Alexa Fluor 488 chèvre anti-lapin anticorps secondaire	Invitrogen	; A11008
Anticorps anti-actine pour les muscles lisses	Abcam	ab5694
Albumine sérique bovine	Santa Cruz Biotechnology, Inc.	SC-2323  ;
souris C57BL/6J (7-9 semaines)	The Jackson Laboratory	Strain # :000664
Fluorescéine Sodium Salt	Sigma-Aldrich	MFCD00167039
Gaymar T Pump Heat Therapy System	Gaymar	TP-500	Pompe à chaleur à circulation d’eau pour la récupération de souris après imagerie
GenTeal Gel	Genteal	NDC 58768-791-15	Gel
lubrifiant transparent pour les yeuxGS-IB4 Alexa-Flour 568 conjugué	Invitrogen	; I21412
Heidelberg Eye Explorerer	Heidelberg Engineering, Allemagne	HEYEX2
Vert d’Indocyanine	Pfaultz & Bauer	I01250
Kétamine	Vedco Inc.	NDC 50989-996-06
Paraformaldéhyde	Acros Organics  ;
416785000 Solution ophtalmique de chlorhydrate de proparacaïne (0,5 %)	Sandoz	NDC 61314-016-01
Système d’imagerie multimodale Spectralis	Heidelberg Engineering, Allemagne	SPECTRALIS HRA+OCT
Triton X-100  ;	Sigma-Aldrich	X100-1L
Tropicamide solution ophtalmique (1 %)	Bausch & Lomb	NDC 24208-585-64	Pour la dilatation des pupilles
Xylazine	Lloyd Laboratories	NADA 139-236