זיהוי, אבחון ודירוג גידולי מעטפת עצב היקפיים ממאירים במודלים של עכברים מהונדסים גנטית
Summary
פיתחנו מתודולוגיה להערכה אם גידולים במערכת העצבים בעכברים מהונדסים גנטית משחזרים במדויק את הפתולוגיה של עמיתיהם האנושיים. כאן, אנו מיישמים טכניקות היסטולוגיות אלה, קריטריונים פתולוגיים מוגדרים ומתודולוגיות תרבית על נוירופיברומות וגידולים ממאירים במעטפת העצבים ההיקפית הנובעים במודל העכבר P 0-GGFβ3.
Abstract
חולים עם תסמונת רגישות הגידול האוטוזומלית הדומיננטית נוירופיברומטוזיס מסוג 1 (NF1) מפתחים בדרך כלל נוירופיברומות פרספקס (PNs) שלאחר מכן הופכות לגידולי מעטפת עצב היקפיים אגרסיביים ביותר (MPNST). הבנת התהליך שבו נוירופתיה היקפית הופכת ל-MPNST תתאפשר הודות לזמינותם של מודלים של עכברים מהונדסים גנטית (GEM) המשחזרים במדויק את התקדמות PN-MPNST שנצפתה בבני אדם עם NF1. למרבה הצער, דגמי GEM עם אבלציה Nf1 אינם משחזרים תהליך זה במלואו. זה הוביל אותנו לפתח עכברי P 0-GGFβ3, מודל GEM שבו ביטוי יתר של מיטוגן תאי Schwann neuregulin-1 (NRG1) בתאי Schwann גורם להתפתחות של PNs המתקדמים להיות MPNST בתדירות גבוהה. עם זאת, כדי לקבוע אם גידולים והתקדמות ניאופלסטית בעכברי P 0-GGFβ3 מדגימים במדויק את התהליכים שנצפו בחולי NF1, היינו צריכים להוכיח תחילה שהפתולוגיה של גידולי מעטפת העצבים ההיקפיים P0-GGFβ3 משחזרת את הפתולוגיה של עמיתיהם האנושיים.
כאן, אנו מתארים את המתודולוגיות המיוחדות המשמשות לאבחון מדויק ולציון גידולים במערכת העצבים ההיקפית במודלים של GEM, באמצעות P 0-GGFβ3 ו- P0-GGFβ3; Trp53+/- עכברים כדוגמה. אנו מתארים את השיטות ההיסטולוגיות, האימונוהיסטוכימיות וההיסטוכימיות המשמשות לאבחון PNs ו- MPNSTs, כיצד להבחין בין גידולים אלה לבין סוגי גידולים אחרים המחקים את הפתולוגיה שלהם, וכיצד לדרג גידולים אלה. אנו דנים בהקמת תרביות מעבר מוקדמות מ- GEM MPNSTs, כיצד לאפיין תרבויות אלה באמצעות אימונוציטוכימיה, וכיצד לאמת את הגידול שלהן על ידי הקמת allografts. באופן קולקטיבי, טכניקות אלה מאפיינות את הפתולוגיה של PNs ו- MPNST המתעוררים במודלים של GEM ומשווים באופן ביקורתי את הפתולוגיה של גידולים מורינים אלה לעמיתיהם האנושיים.
Introduction
במהלך שלושת העשורים האחרונים, מעבדות רבות ניסו ליצור מודלים עכבריים של סרטן אנושי על ידי החדרת מוטציות הקשורות לסרטן אנושי לתוך הגנום של העכבר או על ידי ביטוי יתר של תוצר גנטי המתבטא יתר על המידה בסרטן אנושי. המודלים המתקבלים של עכבר מהונדס גנטית (GEM) יכולים לשמש למגוון מטרות, כגון קביעה כי השינוי הגנומי החדש שהוכנס יוזם גידול, זיהוי שינויים גנטיים או אפיגנטיים אחרים המתרחשים לאחר מכן התורמים להתקדמות הגידול, והגדרת מסלולי האיתות העיקריים המניעים את התחלת הגידול והתקדמותו. שלא כמו מודלים אורתוטופיים של קסנוגרפט, המסתמכים על שימוש בעכברים מדוכאי חיסון, למודלים של סרטן GEM יש מערכת חיסונית מתפקדת במלואה ולכן מודל מדויק יותר של תגובות לחומרים טיפוליים מועמדים. עם זאת, בעת שימוש במודלים של סרטן GEM למטרות כגון אלה, חיוני שהחוקרים יאשרו כי תצפיות שנעשו עם גידולי GEM רלוונטיים לעמיתיהם האנושיים. אימות זה צריך לכלול הערכה יסודית של הפתולוגיה של גידולי GEM וקביעה האם התכונות הפתולוגיות של גידולי GEM משחזרות את הפתולוגיה של סוג הגידול האנושי המתאים.
תסמונת רגישות הגידול נוירופיברומטוזיס סוג 1 (NF1) היא המחלה הגנטית הנפוצה ביותר המשפיעה על מערכת העצבים האנושית, המתרחשת בערך 1 מכל 3,000-3,500 לידות חי 1,2,3. אנשים הסובלים מ- NF1 מפתחים גידולים שפירים מרובים במעטפת העצבים ההיקפית הידועים בשם נוירופיברומות בעורם (נוירופיברומות עוריות) ובעצבים גדולים ובמקלעי עצבים (נוירופיברומות פרקסיפורם). בעוד שגם נוירופיברומות עוריות וגם פרסיפורמות מחמירות את איכות החיים של המטופל על ידי ייצור ליקוי פיזי, התנהגותי ו / או חברתי, נוירופיברומות פרספקס (PNs) מסוכנות במיוחד 4,5. הסיבה לכך היא כי PNs לעתים קרובות להפוך גידולים ממאירים מעטפת עצב היקפי (MPNST), שהם neoplasms תאי ציר אגרסיבי עם שיעור הישרדות נמוך במיוחד 1,2. במידה רבה, שיעור הישרדות נמוך זה נובע מכך שמשטרי הרדיו והכימותרפיה המשמשים כיום לטיפול ב- MPNST אינם יעילים. עם זאת, פיתוח טיפולים חדשים ויעילים יותר היה מאתגר. הסיבה לכך היא, למרות כמה נפוץ MPNST להתרחש בחולים NF1, הם עדיין neoplasms נדיר. כתוצאה מכך, קשה מאוד להשיג מספר גדול של גידולים אנושיים למחקר; זה גם מאתגר לגייס מספיק חולים עם MPNST לניסויים קליניים. כדי להתגבר על מגבלות אלה, נוצרו מספר מודלים של GEM במטרה להשיג תובנות נוספות לגבי החריגות המניעות פתוגנזה נוירופיברומה והתקדמות PN-MPNST ולהקל על ניסויים פרה-קליניים עם סוכנים טיפוליים מועמדים.
לחולי NF1 יש מוטציות לא פעילות בעותק אחד של הגן NF1. נוירופיברומה פתוגנזה מופעלת כאשר מוטציה משביתה בגן NF1 הפונקציונלי הנותר מתרחשת בתא בשושלת תאי Schwann. עם זאת, באופן מפתיע, כאשר עכברים נוצרו עם מוטציות Nf1 שהשביתו את קו הנבט, הם לא פיתחו נוירופיברומות 6,7. ההדגמה העוקבת כי עכברים עם תאי Schwann Nf1-null ו- Nf1 haploinsufficiency בכל סוגי התאים האחרים (Krox20-Cre;Nf1flox/- עכברים) פיתחו נוירופיברומות פרספקס הציעו כי מינון מופחת של גן Nf1 בסוגי תאים נוספים נדרש עבור נוירופיברומהפתוגנזה 8. גם אז, נוירופיברומות פרספקס ב Krox20-Cre; עכברי Nf1flox/- לא התקדמו והפכו ל-MPNST ולכן חיקו רק חלקית את הביולוגיה של עמיתיהם האנושיים. פתוגנזה של MPNST אכן התרחשה כאשר מוטציות Nf1 היו שותפות עם מוטציות בגנים מדכאי גידול נוספים כגון Trp539 או Cdkn2a10, אך MPNST במודלים אלה של GEM התפתחו דה נובו או מניאופלזמות נוירופיברומטיות לא טיפוסיות בעלות פוטנציאל ביולוגי לא בטוח (ANNUBPs)11,12, ולא מנוירופיברומות שפירות שפירות קיימות (ראו13,14 לסקירות מצוינות של מודלים אלה, כמו גם מודלים אחרים המציגים מוטציות נוספות הקשורות לאובדן תפקוד הקשור ל- MPNST בגנים כגון Suz12 ו– Pten15).
מודלים אלה של עכברים היו יקרי ערך לביסוס התפקיד שגנים כגון NF1, TP53 ו– CDKN2A ממלאים בפתוגנזה של גידולים במערכת העצבים ההיקפית הקשורים ל- NF1 ובניסויים פרה-קליניים הבוחנים סוכנים טיפוליים מועמדים. עם זאת, עדיין יש לנו הבנה חלקית של התהליך שבו נוירופיברומות פרספקס מתקדמות להיות גידולים נוירופיברומטיים לא טיפוסיים של פוטנציאל ביולוגי לא בטוח (ANNUBPs16) ולאחר מכן MPNSTs. לאחרונה חלה התקדמות מסוימת בהבנת תהליך זה עם הדיווח האחרון כי עכברים עם מחיקות ב-Nf1 וב-Arf מפתחים ANNUBPs שמתקדמים והופכים ל-MPNSTs11. עם זאת, מודלים עכבריים מבוססי מוטציה Nf1 המשחזרים באופן מלא את תהליך התקדמות הפרספקס נוירופיברומה-MPNST שנראה בבני אדם עדיין אינם קיימים. בנוסף, לא ברור אם ישנם מספר מסלולים נפרדים המובילים לפיתוח MPNST. בהתחשב בכך, ייתכן כי GEMs שתוארו לעיל רק מודל של תת-קבוצה של מספר מסלולים שונים המובילים להתקדמות נוירופיברומה-MPNST ופתוגנזה MPNST. נקודה זו מודגשת על ידי העובדה כי MPNSTs להתרחש גם באופן ספורדי וכי כמה MPNST ספורדיים כנראה אין מוטציות NF1 17,18.
למרות שנקודה אחרונה זו אותגרה על ידי ההצעה האחרונה של Magollon-Lorenz et al. כי לפחות כמה MPNST ספורדיים חסרי מוטציות NF1 הם מלנומה או סוג אחר של סרקומה19, לאחרונה דיווחנו MPNST ספורדי וקו תאים נגזר מגידול זה (2XSB תאים) שהיה NF1 פראי סוג20. במהלך אפיון גידול האב וקו תאי 2XSB, שללנו באופן שיטתי אפשרויות אבחון חלופיות, כולל מלנומה וסוגי סרקומה רבים אחרים הנשקלים באופן שגרתי באבחנה המבדלת של גידול נדן עצב היקפי ממאיר ספורדי20. בנוסף, נציין כי Magollon-Lorenz et al. הכירו בכך שלא ניתן להכליל את ממצאיהם בשלושת קווי תאי MPNST הספורדיים שהם חקרו כדי להצביע על כך שכל הגידולים שזוהו כ- MPNST ספורדיים אינם MPNST.
כדי לבנות מודל GEM שבו נוירופיברומה ופתוגנזה MPNST לא היו תלויות בהכרח במוטציות ספציפיות של גנים מדכאי גידולים, יצרנו עכברים טרנסגניים שבהם ביטוי יתר של מיטוגן תאי Schwann החזק neuregulin-1 (NRG1) הונע על ידי מקדם חלבון המיאלין הספציפי לתאי Schwann (P0) (עכברי P 0-GGFβ3)21. הראינו בעבר כי נוירופיברומות, MPNST וקווי תאים MPNST אנושיים מבטאים מספר איזופורמים של NRG1 יחד עם קולטן erbB טירוזין קינאזות (erbB2, erbB3 ו-erbB4) המתווכים איתות NRG1 וכי קולטני erbB אלה מופעלים באופן קונסטיטוטיבי22. הראינו גם שמעכבים פרמקולוגיים של קינאזות erbB מעכבים בעוצמה התפשטות MPNST22, הישרדות23 והגירה24. בהתאם לתצפיות שלנו בבני אדם, עכברי P 0-GGFβ3 מפתחים נוירופיברומות פרספקס25 שמתקדמות והופכות ל-MPNST בתדירות גבוהה21,25. הראינו כי P 0-GGFβ3 MPNSTs, כמו עמיתיהם האנושיים, מפתחים בדרך כלל מוטציות של Trp53 ו– Cdkn2a, כמו גם הפרעות גנומיות רבות אחרות שעשויות לתרום לגידולים25. ל-MPNST המתעוררים בעכברי P 0-GGFβ3 אין מוטציות Nf1 משביתות. עם זאת, באמצעות השלמה גנטית, הראינו כי NRG1 מקדם גידולים בעכברי P 0-GGFβ3 בעיקר באמצעות אותם מפלים איתות המשתנים על ידי אובדן Nf1 26; מסקנה זו מבוססת על קביעתנו כי החלפת ביטוי יתר של NRG1 בהפסד Nf1 בנוכחות Trp53 haploinsufficiency (P 0-GGFβ3;Trp53+/- עכברים) מייצר בעלי חיים שבהם MPNST מפתחים דה נובו, כפי שניתן לראות ב- cis-Nf1+/-; Trp53+/- עכברים27.
כדי להשיג מידע זה ומידע אחר המוכיח כי עכברי P 0-GGFβ3 מדגימים במדויק את תהליכי הפתוגנזה של נוירופיברומה והתקדמות נוירופיברומה-MPNST שנצפו בבני אדם עם NF1, פיתחנו מתודולוגיות מיוחדות לעיבוד רקמות מבעלי חיים אלה, אבחון מדויק של הגידולים שלהם, דירוג MPNST המתעוררים בעכברים אלה, ביסוס ואפיון מעבר מוקדם P0-GGFβ3 ו- P0-GGFβ3; Trp53+/- תרביות MPNST והשוואה ביקורתית של הפתולוגיה של P 0-GGFβ3 PNs ו- MPNST ו- P0-GGFβ3; Trp53+/- MPNSTs לזה של עמיתיהם האנושיים. רבות מהמתודולוגיות הללו ניתנות להכללה למודלים אחרים של GEM של ניאופלזיה של מערכת העצבים. בנוסף, כמה ממתודולוגיות אלה ישימות באופן רחב יותר למודלים של GEM שבהם גידולים מתעוררים באתרי איברים אחרים. כתוצאה מכך, כאן אנו מציגים תיאור מפורט של מתודולוגיות אלה.
Protocol
Representative Results
Discussion
השיטות ההיסטולוגיות והביוכימיות המוצגות כאן מספקות מסגרת לאבחון ואפיון מודלים של GEM של פתוגנזה נוירופיברומה ו- MPNST. במהלך השנים, מצאנו מתודולוגיות אלה להיות שימושי למדי להערכת הפתולוגיה של גידולים עצביים היקפיים הנובעים מודלים GEM 21,25,26. ע…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהמכון הלאומי למחלות נוירולוגיות ושבץ (R01 NS048353 ו- R01 NS109655 ל- S.L.C.; R01 NS109655-03S1 ל- D.P.J.), המכון הלאומי לסרטן (R01 CA122804 ל- S.L.C.) ומשרד ההגנה (X81XWH-09-1-0086 ו- W81XWH-12-1-0164 ל- S.L.C).
Materials
| 100 mm Tissue Culture Plates | Corning Falcon | 353003 | |
| 3, 3'- Diaminobensidine (DAB) | Vector Laboratories | SK-400 | |
| 6- well plates | Corning Costar | 3516 | |
| Acetic Acid | Fisher Scientific | A38-212 | |
| Alexa Fluor 488 Secondary (Goat Anti-Mouse) | Invitrogen | A11029 | |
| Alexa Fluor 568 Secondary (Goat Anti-Mouse) | Invitrogen | A21043 or A11004 | |
| Alexa Fluor 568 Secondary (Goat Anti-Rabbit) | Invitrogen | A11036 | |
| Ammonium Chloride (NH4Cl) | Fisher Scientific | A661-500 | |
| BCA Protein Assay Kit | Thermo Scientific | 23225 | |
| Bovine Serum Albumin | Fisher Scientific | BP1600-100 | |
| Caldesmon | ABCAM | E89, ab32330 | |
| CD117 | Cell Marque | 117R-18-ASR | |
| CD163 | Leica | NCL-L-CD163 | |
| CD31 | ABCAM | ab29364 | |
| CD34 | ABCAM | ab81289 | |
| CD86 | ABCAM | ab53004 | |
| Cell Scraper | Sarstedt | 83.183 | |
| Cell Stripper | Corning | 25-056-CI | |
| Circle Coverslip | Fisher Scientific | 12-545-100 | |
| Citrisolve Hybrid (d-limonene-based solvent) | Decon Laboratories | 5989-27-5 | |
| Critic Acid | Fisher Scientific | A104-500 | |
| Cytokeratin | ABCAM | C-11, ab7753 | |
| Desmin | Agilent Dako | clone D33 (M0760) | |
| Diaminobensizdine (DAB) Solution | Vector Laboratories | SK-4100 | |
| DMEM | Corning | 15-013-CV | |
| Eosin Y | Thermo Scientific | 7111 | |
| Ethanol (200 Proof) | Decon Laboratories | 2716 | |
| Fetal Calf Serum | Omega Scientific | FB-01 | |
| Forksolin | Sigma-Aldrich | F6886 | |
| Glycerol | Sigma-Aldrich | G6279 | |
| Hank's Balanced Salt Solution (HBSS) | Corning | 21-022-CV | |
| Harris Hematoxylin | Fisherbrand | 245-677 | |
| Hemacytometer | Brightline-Hauser Scientific | 1490 | |
| Hydrochloric Acid | Fisher Scientific | A144-212 | |
| Hydrogen Peroxide | Fisher Scientific | 327-500 | |
| Iba1 | Wako Chemicals | 019-19741 | |
| ImmPRESS HRP (Peroxidase) Polymer Kit ,Mouse on Mouse | Vector Laboratories | MP-2400 | |
| ImmPRESS HRP (Peroxidase) Polymer Kit, Horse Anti-Rabbit | Vector Laboratories | MP-7401 | |
| Incubator | Thermo Scientific | Heracell 240i CO2 incubator | |
| Isoflurane | Piramal | NDC 66794-017-25 | |
| Isopropanol | Fisher Scientific | A415 | |
| Ki-67 | Cell Signaling | 12202 | |
| Laminin | Thermo Fisher Scientific | 23017015 | |
| Liquid Nitrogen | |||
| MART1 | ABCAM | M2-9E3, ab187369 | |
| Microtome | |||
| Nestin | Millipore | Human: MAD5236 (10C2), Human:MAB353 (Rat-401) | |
| Neuregulin 1 beta | In house | Made by S.L.C. (also available as 396-HB-050/CF from R&D Systems) | |
| Neurofibromin | Santa Cruz Biotechnology | sc-67 | |
| NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ mice | Jackson Laboratory | 5557 | |
| Nonfat Dry Milk | Walmart | Great Value Brand | |
| P0-GGFβ3 mice | In house | ||
| Paraffin Wax | Leica | Paraplast 39601006 | |
| Parafilm M | Sigma-Aldrich | PM-999 | |
| Paraformaldehyde (4%) | Thermo Scientific | J19943-K2 | |
| Permount (Xylene Mounting Medium) | Fisher Scientific | SP15-100 | |
| pH Meter | Mettler Toldedo | Seven Excellence, 8603 | |
| Phosphate Buffered Saline (Dulbecco's) | Corning | 20-031-CV | |
| PMEL | ABCAM | EP4863(2), ab137078 | |
| Poly-L-Lysine Hydrobromide | Sigma-Aldrich | P5899-5MG | |
| Portable Isoflurance Machine | VetEquip Inhalation Anesthesia Systems | ||
| PVA-DABCO (Aqueous Mounting Medium) | Millipore Sigma | 10981100ML | |
| Rice Cooker | Beech Hamilton | ||
| S100B | Agilent Dako | Z0311 (now GA504) | |
| SMA | Ventana Medical Systems | clone 1A4 | |
| Sodium Chloride | Fisher Scientific | S640 | |
| Sodium Citrate (Dihydrate) | Fisher Scientific | BP327-1 | |
| Sox10 | ABCAM | ab212843 | |
| Steel histology mold | |||
| Superfrost Plus Microscope Slides | Fisher Scientific | 12-550-15 | |
| TCF4/TCFL2 | Cell Signaling | (CH48H11) #2569 | |
| Tissue Cassette | |||
| Toluidine Blue | ACROS Organics | 348600050 | |
| Triton X-100 | Fisher Scientific | BP151-500 | |
| TRIzol | Invitrogen | 15596026 | |
| Trypsin | Corning | 25-051-31 |
References
- Carroll, S. L. Molecular mechanisms promoting the pathogenesis of Schwann cell neoplasms. Acta Neuropathologica. 123 (3), 321-348 (2012).
- Longo, J. F., Weber, S. M., Turner-Ivey, B. P., Carroll, S. L. Recent advances in the diagnosis and pathogenesis of neurofibromatosis type 1 (NF1)-associated peripheral nervous system neoplasms. Advances in Anatomic Pathology. 25 (5), 353-368 (2018).
- Longo, J. F., Carroll, S. L. The RASopathies: Biology, genetics and therapeutic options. Advances in Cancer Research. 153, 305-341 (2022).
- Boyd, K. P., Korf, B. R., Theos, A. Neurofibromatosis type 1. Journal of the American Academy of Dermatology. 61 (1), 1-16 (2009).
- Rad, E., Tee, A. R. Neurofibromatosis type 1: Fundamental insights into cell signalling and cancer. Seminars in Cell and Developmental Biology. 52, 39-46 (2016).
- Brannan, C. I., et al. Targeted disruption of the neurofibromatosis type-1 gene leads to developmental abnormalities in heart and various neural crest-derived tissues. Genes and Development. 8 (9), 1019-1029 (1994).
- Jacks, T., et al. Tumour predisposition in mice heterozygous for a targeted mutation in Nf1. Nature Genetics. 7 (3), 353-361 (1994).
- Zhu, Y., Ghosh, P., Charnay, P., Burns, D. K., Parada, L. F. Neurofibromas in NF1: Schwann cell origin and role of tumor environment. Science. 296 (5569), 920-922 (2002).
- Cichowski, K., et al. Mouse models of tumor development in neurofibromatosis type 1. Science. 286 (5447), 2172-2176 (1999).
- Joseph, N. M., et al. The loss of Nf1 transiently promotes self-renewal but not tumorigenesis by neural crest stem cells. Cancer Cell. 13 (2), 129-140 (2008).
- Rhodes, S. D., et al. Cdkn2a (Arf) loss drives NF1-associated atypical neurofibroma and malignant transformation. Human Molecular Genetics. 28 (16), 2752-2762 (2019).
- Chaney, K. E., et al. Cdkn2a loss in a model of neurofibroma demonstrates stepwise tumor progression to atypical neurofibroma and MPNST. Recherche en cancérologie. 80 (21), 4720-4730 (2020).
- Mohamad, T., Plante, C., Brosseau, J. P. Toward understanding the mechanisms of malignant peripheral nerve sheath tumor development. International Journal of Molecular Science. 22 (16), 8620 (2021).
- Somatilaka, B. N., Sadek, A., McKay, R. M., Le, L. Q. Malignant peripheral nerve sheath tumor: models, biology, and translation. Oncogene. 41 (17), 2405-2421 (2022).
- Keng, V. W., et al. Conditional inactivation of Pten with EGFR overexpression in Schwann cells models sporadic MPNST. Sarcoma. 2012, 620834 (2012).
- Miettinen, M. M., et al. Histopathologic evaluation of atypical neurofibromatous tumors and their transformation into malignant peripheral nerve sheath tumor in patients with neurofibromatosis 1-a consensus overview. Human Pathology. 67, 1-10 (2017).
- Lee, W., et al. PRC2 is recurrently inactivated through EED or SUZ12 loss in malignant peripheral nerve sheath tumors. Nature Genetics. 46 (11), 1227-1232 (2014).
- Zhang, M., et al. Somatic mutations of SUZ12 in malignant peripheral nerve sheath tumors. Nature Genetics. 46 (11), 1170-1172 (2014).
- Magallon-Lorenz, M., et al. Deep genomic analysis of malignant peripheral nerve sheath tumor cell lines challenges current malignant peripheral nerve sheath tumor diagnosis. iScience. 26 (2), 106096 (2023).
- Longo, J. F., et al. Establishment and genomic characterization of a sporadic malignant peripheral nerve sheath tumor cell line. Scientific Reports. 11 (1), 5690 (2021).
- Huijbregts, R. P., Roth, K. A., Schmidt, R. E., Carroll, S. L. Hypertrophic neuropathies and malignant peripheral nerve sheath tumors in transgenic mice overexpressing glial growth factor beta3 in myelinating Schwann cells. Journal of Neuroscience. 23 (19), 7269-7280 (2003).
- Stonecypher, M. S., Byer, S. J., Grizzle, W. E., Carroll, S. L. Activation of the neuregulin-1/ErbB signaling pathway promotes the proliferation of neoplastic Schwann cells in human malignant peripheral nerve sheath tumors. Oncogene. 24 (36), 5589-5605 (2005).
- Kohli, L., et al. The pan erbB inhibitor PD168393 enhances lysosomal dysfunction-induced apoptotic death in malignant peripheral nerve sheath tumor cells. Neuro-Oncology. 14 (3), 266-277 (2012).
- Eckert, J. M., Byer, S. J., Clodfelder-Miller, B. J., Carroll, S. L. Neuregulin-1 beta and neuregulin-1 alpha differentially affect the migration and invasion of malignant peripheral nerve sheath tumor cells. Glia. 57 (14), 1501-1520 (2009).
- Kazmi, S. J., et al. Transgenic mice overexpressing neuregulin-1 model neurofibroma-malignant peripheral nerve sheath tumor progression and implicate specific chromosomal copy number variations in tumorigenesis. American Journal of Pathology. 182 (3), 646-667 (2013).
- Brosius, S. N., et al. Neuregulin-1 overexpression and Trp53 haploinsufficiency cooperatively promote de novo malignant peripheral nerve sheath tumor pathogenesis. Acta Neuropathologica. 127 (4), 573-591 (2014).
- Vogel, K. S., et al. Mouse tumor model for neurofibromatosis type 1. Science. 286 (5447), 2176-2179 (1999).
- Reuss, D. E., et al., Louis, D. N., et al. Malignant peripheral nerve sheath tumour (MPNST). WHO Classification of Tumours of the Central Nervous System, Revised 4th Edition. , 226-229 (2016).
- Landuzzi, L., Ruzzi, F., Lollini, P. L., Scotlandi, K. Synovial sarcoma preclinical modeling: integrating transgenic mouse models and patient-derived models for translational research. Cancers. 15 (3), 588 (2023).
- Cohen, P. R., Rapini, R. P., Farhood, A. I. Expression of the human hematopoietic progenitor cell antigen CD34 in vascular and spindle cell tumors. Journal of Cutaneous Pathology. 20 (1), 15-20 (1993).
- Weiss, S. W., Nickoloff, B. J. CD-34 is expressed by a distinctive cell population in peripheral nerve, nerve sheath tumors, and related lesions. American Journal of Surgical Pathology. 17 (10), 1039-1045 (1993).
- Longo, J. F., Brosius, S. N., Carroll, S. L. Defining gene functions in tumorigenesis by ex vivo ablation of floxed alleles in malignant peripheral nerve sheath tumor cells. Journal of Visualized Experiments. (174), (2021).
- Hoffman, G. E., Murphy, K. J., Sita, L. V. The importance of titrating antibodies for immunocytochemical methods. Current Protocols in Neuroscience. 76, 2.12.1-2.12.37 (2016).
- Brossier, N. M., Carroll, S. L. Genetically engineered mouse models shed new light on the pathogenesis of neurofibromatosis type I-related neoplasms of the peripheral nervous system. Brain Research Bulletin. 88 (1), 58-71 (2012).
