Tuina-interventie in natriummonojoodacetaat-injectie-geïnduceerd rattenmodel van knieartrose

Summary

Dit protocol beschrijft de methoden van Tuina-interventie in natriummonojoodacetaat-injectie-geïnduceerd rattenmodel van knieartrose (KOA), dat een referentie biedt voor de toepassing van Tuina in KOA-diermodellen. Dit protocol bestudeert ook het effectieve mechanisme van Tuina voor KOA, en de resultaten zullen de toepassing ervan helpen bevorderen.

Abstract

Artrose van de knie (KOA), een veel voorkomende degeneratieve gewrichtsaandoening, wordt gekenmerkt door chronische pijn en invaliditeit, die kan leiden tot onherstelbare structurele schade aan het gewricht. Onderzoek naar het verband tussen gewrichtskraakbeen, spieren, synovium en andere weefsels rond het kniegewricht bij KOA is van groot belang. Momenteel omvat het beheer van KOA aanpassingen van de levensstijl, lichaamsbeweging, medicatie en chirurgische ingrepen; de opheldering van de ingewikkelde mechanismen die ten grondslag liggen aan KOA-gerelateerde pijn ontbreekt echter nog steeds. Bijgevolg blijft KOA-pijn een belangrijke klinische uitdaging en een therapeutische prioriteit. Tuina blijkt een regulerend effect te hebben op de motorische, immuun- en endocriene systemen, wat aanleiding geeft tot het onderzoek of Tuina KOA-symptomen kan verlichten, veroorzaakt door de opregulatie van ontstekingsfactoren, en verder, of de ontstekingsfactoren in skeletspieren de progressie van KOA kunnen vergroten.

We randomiseerden 32 mannelijke Sprague Dawley (SD) ratten (180-220 g) in vier groepen van elk acht dieren: antiPD-L1+Tuina (groep A), model (groep B), Tuina (groep C) en schijnchirurgie (groep D). Voor de groepen A, B en C injecteerden we 25 μL natriummonoiodoacetaat (MIA)-oplossing (4 mg MIA verdund in 25 μL steriele zoutoplossing) in de holte van het rechterkniegewricht, en voor groep D werd dezelfde hoeveelheid steriele fysiologische zoutoplossing geïnjecteerd. Alle groepen werden geëvalueerd met behulp van de minst tot meest belastende tests (mechanische terugtrekkingsdrempel van de poot, thermische latentie van de terugtrekking van de poten, zwelling van het rechterkniegewricht, Lequesne MG-score, huidtemperatuur) vóór injectie en 2, 9 en 16 dagen na injectie.

Introduction

Artrose van de knie (KOA) is een veel voorkomende degeneratieve artrose, gekenmerkt door chronische pijn en invaliditeit, en relatief ernstige KOA zal leiden tot onomkeerbare structurele schade aan^{het gewricht}. De hoge wereldwijde prevalentie van KOA is een grote wereldwijde uitdaging voor de volksgezondheid^{geworden 2,3}, die de kwaliteit van leven van patiënten ernstig schaadt ^4,5. Studies hebben aangetoond dat KOA wereldwijd meer dan 260 miljoen mensen treft⁶. Met de vergrijzing van de bevolking is de totale prevalentie van KOA in China maar liefst 17.0% boven de 40 jaar, wat een zware last legt op de families van de getroffenen ^7,8.

Volgens de Chinese geneeskunde behoort KOA tot de categorie “verlamming”⁹, en de Yellow Emperor’s Classic of Internal Medicine associeert pezen, botten en vlees met verlamming. Daarom moeten we aandacht besteden aan de verbinding tussen het kraakbeen, de spieren, het synovium en andere weefsels rond het kniegewricht bij KOA. In de moderne geneeskunde stimuleren zowel spier- als botontsteking, die belangrijke componenten zijn van de immuunhomeostase van artritis, de progressie van KOA-pijn. De meeste onderzoeken richten zich echter op kraakbeenontsteking en synoviale ontsteking in botgewrichten, en er is een gebrek aan artikelen die ontstekingsverschijnselen in skeletspieren onderzoeken. Daarom is meer onderzoek nodig naar de rol van skeletspieren bij ontstekingen om een beter begrip van KOA te krijgen en ideeën te geven voor effectievere behandelingsmodaliteiten. In een overzicht van de literatuur vonden we dat remming van de immuungerelateerde factor geprogrammeerde doodligand 1 (PD-L1) de progressie van KOA^10,11 verergerde en dat er differentiële expressie was van IL-15 en FOXO1 in de skeletspier van patiënten met KOA ¹², evenals significante skeletspierontsteking bij patiënten met KOA^de het eindstadium^, wat ook in verband werd gebracht met veranderingen in het lopen. Het is aangetoond dat de skeletspier ook factoren kan afscheiden die nauw verband houden met ontstekingsimmuniteit, zoals IL-6, en dat TNF-α ook nauw verwant is aan de PD-L1-route en KOA^13,14,15.

Momenteel omvatten beschikbare behandelingen voor KOA gewichtsbeheersing, lichaamsbeweging, medicatie en chirurgie, waaronder meestal intra-articulaire injecties, pijnstillende medicatie, arthroscopische chirurgie en periprothetische osteotomie van de knie¹⁶. Momenteel kan de progressie van de KOA-ziekte niet volledig worden gestopt of teruggedraaid, en zonder een duidelijk begrip van de complexe mechanismen die ten grondslag liggen aan KOA-pijn, lopen KOA-patiënten het risico op overmatig gebruik van pijnstillende medicijnen en een hoge incidentie van bijwerkingen^. De meeste behandelingsstrategieën zijn slechts voor korte perioden effectief en richten zich alleen op de tijdelijke verlichting van symptomen in plaats van op de pathogenese van de ziekte. Daarom blijft KOA-pijn een prioriteit en een uitdaging voor de behandeling, wat een ernstige klinische uitdaging vormt. Tuina kan echter de skeletspieren rond het aangetaste gewricht direct stimuleren bij een KOA-behandeling en kan enkele voordelen bieden. In combinatie met de vorige beschrijving is het de ideale therapie om de rol van skeletspierweefsel bij KOA te bestuderen, en het verduidelijken van de rol van skeletspierweefsel bij ontstekingen kan ook een betere theoretische ondersteuning bieden voor Tuina van KOA.

Studies hebben aangetoond dat massagetherapie, osteopathische manipulatieve therapie en manipulatie van de wervelkolom kunnen helpen pijn te verlichten en de lichaamsfunctie te herstellen^17,18. Deze manipulaties kunnen inwerken op lokale ontstekingen en spasmen en analgesie verlichten door externe mechanische actie. Ze kunnen pijn verlichten na een totale knieartroplastiek, het gebruik van pijnstillers verminderen, postoperatief herstel bevorderen en de biomechanische balans verbeteren¹⁹. Zweedse massage is haalbaar bij de behandeling van artrose en kan stress verminderen en de kwaliteit van leven verbeteren²⁰. Aan de therapeutische werking van Tuina op KOA zijn bepaalde studies voorafgegaan.

In dit experiment zal ons team onderzoeken of de expressie van PD-L1 en gerelateerde ontstekingsfactoren in skeletspieren KOA kan induceren en de ontwikkeling ervan kan bevorderen op basis van het MIA-geïnduceerde KOA-model bij ratten. Tuina zal ook worden geïmplementeerd om te zien of het KOA-symptomen kan verlichten die worden veroorzaakt door verhoogde expressie van ontstekingsfactoren. Tuina zal worden gecombineerd met PD-L1-remming om de associatie aan te tonen tussen Tuina-gemedieerde PD-1-route bij skeletspierontsteking die de ontwikkeling van KOA beïnvloedt en pijn, waarmee de basis wordt gelegd voor verdere studies op meerdere niveaus naar de therapeutische mechanismen van Tuina-interventie bij KOA.

Samenvattend beschrijft dit artikel het onderzoek en de uitwerking van de mechanismen van skeletspierontsteking bij de ontwikkeling van KOA en de pijn ervan, evenals de therapeutische effecten van Tuina op KOA, vanuit het perspectief van immuun-inflammatoire factorexpressie, gecombineerd met gedragsgerelateerde indicatoren, om modern onderzoeksbewijs te leveren voor de theorie van de “onbalans van pezen en botten” in de traditionele Chinese geneeskunde.

Protocol

Alle experimenten werden goedgekeurd en gecontroleerd door het Animal Care and Use Committee van de Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (goedkeuringsnummer: SYXK2018-0040), dat voldoet aan de bepalingen in de World Medical Association Helsinki Declaration. 1. Voorbereiding van dieren Huis 32 Sprague Dawley (SD) mannelijke ratten van 8 weken oud en met een gewicht van 180-220 g in een specifiek pathogeenvrij huisvestingsapparaat onder 12 uur licht/12 u…

Representative Results

Het beschreven protocol werd geïmplementeerd in een klinische setting in het Yueyang Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine. Figuur 1 toont de exacte locatie van de acupunten die bij ratten worden geduwd, en tabel 1 illustreert de algemene voordelen van het stimuleren van deze punten. Tabel 2 en Tabel 3 bieden overtuigend bewijs van opmerkelijke pijnverlichting die wordt bereikt door Tuina-therapie, zelfs bij afwezi…

Discussion

Deze studie heeft tot doel de verbetering van KOA na Tuina-interventie te beoordelen door gebruik te maken van gestandaardiseerde gedragsindicatoren en de mechanismen van Tuina voor KOA en de associatie tussen skeletspieren en KOA te onderzoeken. In tegenstelling tot farmacologische en chirurgische therapieën heeft Tuina een positief regulerend effect op de motorische, immuun- en endocriene systemen. Tuina kan ontstekingen en pijn veroorzaakt door ziekte verlichten door op verschillende doelen in te werken. Door bijvoor…

Materials

Anti-PD-L1	Abcam, Cambridge, MA, USA	ab80276
electric von Frey esthesiometer	IITC/Life Science, Woodland Hills, CA, USA	ALMEMO 2450
GraphPad Prism 9.0	GraphPad Software		Software for stastistical analysis
monosodium iodoacetate	Sigma-Aldrich Inc	I9148	Resolved into normal saline for injection
pentasorbital sodium	Sigma-Aldrich Inc	P3761
Sprague Dawley (SD) male rats	Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd	No. SCXK (Hu) 2017-0012
thermal analgesia tester	IITC/Life Science	Model 390