Tuina-Intervention im Natriummonojodacetat-induzierten Rattenmodell der Kniearthrose

Summary

Dieses Protokoll beschreibt die Methoden der Tuina-Intervention im Natriummonojodacetat-induzierten Rattenmodell der Kniearthrose (KOA), das eine Referenz für die Anwendung von Tuina in KOA-Tiermodellen darstellt. In diesem Protokoll wird auch der wirksame Mechanismus von Tuina für KOA untersucht, und die Ergebnisse werden dazu beitragen, seine Anwendung zu fördern.

Abstract

Die Kniearthrose (KOA), eine häufige degenerative Gelenkerkrankung, ist durch chronische Schmerzen und Behinderungen gekennzeichnet, die zu irreparablen strukturellen Schäden des Gelenks führen können. Untersuchungen zum Zusammenhang zwischen Gelenkknorpel, Muskeln, Synovium und anderen Geweben, die das Kniegelenk umgeben, sind bei KOA von großer Bedeutung. Derzeit umfasst die Behandlung von KOA Änderungen des Lebensstils, Bewegung, Medikamente und chirurgische Eingriffe. Die Aufklärung der komplizierten Mechanismen, die den KOA-bedingten Schmerzen zugrunde liegen, fehlt jedoch noch. Folglich bleibt der KOA-Schmerz eine zentrale klinische Herausforderung und eine therapeutische Priorität. Es wurde festgestellt, dass Tuina eine regulierende Wirkung auf das motorische, immunologische und endokrine System hat, was zu der Untersuchung führte, ob Tuina KOA-Symptome lindern kann, die durch die Hochregulierung von Entzündungsfaktoren verursacht werden, und ob die Entzündungsfaktoren in der Skelettmuskulatur das Fortschreiten von KOA verstärken können.

Wir randomisierten 32 männliche Sprague Dawley (SD)-Ratten (180-220 g) in vier Gruppen mit jeweils acht Tieren: antiPD-L1+Tuina (Gruppe A), Modell (Gruppe B), Tuina (Gruppe C) und Scheinchirurgie (Gruppe D). Für die Gruppen A, B und C injizierten wir 25 μl Natriummonojodacetat (MIA)-Lösung (4 mg MIA verdünnt in 25 μl steriler Kochsalzlösung) in die rechte Kniegelenkshöhle, und für Gruppe D wurde die gleiche Menge steriler physiologischer Kochsalzlösung injiziert. Alle Gruppen wurden vor der Injektion und 2, 9 und 16 Tage nach der Injektion mit den am wenigsten bis am stärksten belastenden Tests (mechanische Rückzugsschwelle der Pfoten, thermische Latenz des Pfotenrückzugs, Schwellung des rechten Kniegelenks, Lequesne-MG-Score, Hauttemperatur) bewertet.

Introduction

Die Kniearthrose (KOA) ist eine häufige degenerative Arthrose, die durch chronische Schmerzen und Behinderungen gekennzeichnet ist, und eine relativ schwere KOA führt zu irreversiblen strukturellen Schäden am Gelenk¹. Die weltweit hohe Prävalenz von KOA ist zu einer großen globalen Herausforderung für die öffentliche Gesundheit geworden ^2,3, die die Lebensqualität der Patienten ernsthaft beeinträchtigt ^4,5. Studien haben gezeigt, dass weltweit mehr als 260 Millionen Menschen von KOA betroffen sind⁶. Mit der Alterung der Bevölkerung liegt die Gesamtprävalenzrate von KOA in China bei bis zu 17,0 % über 40 Jahren, was eine hohe Belastung für die Familien der Betroffenen darstellt ^7,8.

Nach der chinesischen Medizin gehört KOA zur Kategorie der “Lähmung^“9, und der Klassiker der Inneren Medizin des Gelben Kaisers assoziiert Sehnen, Knochen und Fleisch mit Lähmungen. Daher müssen wir auf die Verbindung zwischen Knorpel, Muskel, Synovium sowie anderen Geweben um das Kniegelenk bei KOA achten. In der modernen Medizin treiben sowohl Muskel- als auch Knochenentzündungen, die Hauptbestandteile der Immunhomöostase der Arthritis sind, das Fortschreiten von KOA-Schmerzen voran. Die meisten Studien konzentrieren sich jedoch auf Knorpelentzündungen und Synovialentzündungen in Knochengelenken, und es gibt einen Mangel an Artikeln, die entzündliche Phänomene in der Skelettmuskulatur untersuchen. Daher ist mehr Forschung über die Rolle der Skelettmuskulatur bei Entzündungen erforderlich, um ein umfassenderes Verständnis von KOA zu erlangen und Ideen für effektivere Behandlungsmodalitäten zu liefern. In einer Literaturrecherche fanden wir heraus, dass die Hemmung des immunkorrelierenden faktorprogrammierten Todesliganden 1 (PD-L1) die Progression von KOA ^10,11 verschlimmerte und dass es eine differentielle Expression von IL-15 und FOXO1 im Skelettmuskel von Patienten mit KOA¹² sowie eine signifikante Skelettmuskelentzündung bei Patienten mit KOA^im Endstadium gab. was auch mit Veränderungen des Gangbildes verbunden war. Es wurde gezeigt, dass der Skelettmuskel auch Faktoren wie IL-6 sezernieren kann, die eng mit der entzündlichen Immunität verbunden sind, und dass TNF-α auch eng mit dem PD-L1-Signalweg und KOA^13,14,15 verwandt ist.

Zu den derzeit verfügbaren Behandlungen für KOA gehören Gewichtskontrolle, Bewegung, Medikamente und Operationen, die in der Regel intraartikuläre Injektionen, schmerzstillende Medikamente, arthroskopische Chirurgie und periprothetische Osteotomie des Knies umfassen¹⁶. Derzeit kann das Fortschreiten der KOA-Erkrankung nicht vollständig gestoppt oder rückgängig gemacht werden, und ohne ein klares Verständnis der komplexen Mechanismen, die KOA-Schmerzen zugrunde liegen, besteht bei KOA-Patienten das Risiko eines übermäßigen Gebrauchs von Analgetika und einer hohen Inzidenz von Nebenwirkungen⁸. Die meisten Behandlungsstrategien sind nur für kurze Zeiträume wirksam und konzentrieren sich nur auf die vorübergehende Linderung der Symptome und nicht auf die Pathogenese der Krankheit. Daher bleiben KOA-Schmerzen eine Priorität und eine Herausforderung für die Behandlung, die eine ernsthafte klinische Herausforderung darstellt. Tuina kann jedoch bei der KOA-Behandlung die Skelettmuskulatur um das betroffene Gelenk herum direkt stimulieren und einige Vorteile bieten. In Kombination mit der vorherigen Beschreibung ist es die ideale Therapie, um die Rolle des Skelettmuskelgewebes bei KOA zu untersuchen, und die Klärung der Rolle von Skelettmuskelgewebe bei Entzündungen kann auch eine bessere theoretische Unterstützung für Tuina von KOA bieten.

Studien haben gezeigt, dass Massagetherapie, osteopathische manipulative Therapie und Wirbelsäulenmanipulation dazu beitragen können, Schmerzen zu lindern und die Körperfunktion wiederherzustellen^17,18. Diese Manipulationen können auf lokale Entzündungen einwirken und Krämpfe und Analgesie durch äußere mechanische Einwirkung lindern. Sie können Schmerzen nach einer Knie-Totalendoprothetik lindern, den Einsatz von Analgetika reduzieren, die postoperative Genesung fördern und das biomechanische Gleichgewicht verbessern¹⁹. Die schwedische Massage ist bei der Behandlung von Arthrose durchführbar und kann Stress abbauen und die Lebensqualität verbessern²⁰. Der therapeutischen Wirkung von Tuina auf KOA sind bestimmte Studien vorausgegangen.

In diesem Experiment wird unser Team untersuchen, ob die Expression von PD-L1 und verwandten Entzündungsfaktoren in der Skelettmuskulatur KOA induzieren und seine Entwicklung fördern kann, basierend auf dem MIA-induzierten KOA-Modell bei Ratten. Tuina wird auch eingesetzt, um zu sehen, ob es KOA-Symptome lindern kann, die durch eine erhöhte Expression von Entzündungsfaktoren verursacht werden. Tuina wird mit PD-L1-Hemmung kombiniert, um den Zusammenhang zwischen dem Tuina-vermittelten PD-1-Signalweg bei Skelettmuskelentzündungen, die die KOA-Entwicklung beeinflussen, und Schmerzen zu demonstrieren und damit den Grundstein für weitere mehrstufige Studien zu den therapeutischen Mechanismen der Tuina-Intervention bei KOA zu legen.

Zusammenfassend beschreibt diese Arbeit die Untersuchung und Ausarbeitung der Mechanismen der Skelettmuskelentzündung bei der Entstehung von KOA und deren Schmerzen sowie die therapeutischen Wirkungen von Tuina auf KOA aus der Perspektive der Expression immuninflammatorischer Faktoren, kombiniert mit verhaltensbezogenen Indikatoren, um moderne Forschungsbelege für die Theorie des “Ungleichgewichts von Sehne und Knochen” in der traditionellen chinesischen Medizin zu liefern.

Protocol

Alle Versuche wurden vom Animal Care and Use Committee der Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (Zulassungsnummer: SYXK2018-0040) genehmigt und überwacht, das den Bestimmungen der Helsinki-Erklärung des Weltärztebundes entspricht. 1. Zubereitung von Tieren Haus 32 Sprague Dawley (SD) männliche Ratten im Alter von 8 Wochen und einem Gewicht von 180-220 g in einem speziellen pathogenfreien Haltungsapparat unter 12 h Licht/12 h Dunkelheit bei 24 ± 2 …

Representative Results

Das beschriebene Protokoll wurde in einer klinischen Umgebung am Yueyang Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine implementiert. Abbildung 1 zeigt die genaue Position der Akupunkturpunkte, die bei Ratten geschoben werden, und Tabelle 1 veranschaulicht die allgemeinen Vorteile der Stimulation dieser Punkte. Tabelle 2 und Tabelle 3 bieten überzeugende Beweise für eine bemerkenswerte Schmerzlinderung, die durch die Tuin…

Discussion

Diese Studie zielt darauf ab, die Verbesserung der KOA nach Tuina-Intervention unter Verwendung standardisierter Verhaltensindikatoren zu beurteilen und die Mechanismen von Tuina für KOA und die Assoziation zwischen Skelettmuskulatur und KOA zu untersuchen. Im Gegensatz zu pharmakologischen und chirurgischen Therapien hat Tuina eine positive regulatorische Wirkung auf das motorische, immunologische und endokrine System. Tuina kann krankheitsbedingte Entzündungen und Schmerzen lindern, indem sie auf verschiedene Ziele e…

Materials

Anti-PD-L1	Abcam, Cambridge, MA, USA	ab80276
electric von Frey esthesiometer	IITC/Life Science, Woodland Hills, CA, USA	ALMEMO 2450
GraphPad Prism 9.0	GraphPad Software		Software for stastistical analysis
monosodium iodoacetate	Sigma-Aldrich Inc	I9148	Resolved into normal saline for injection
pentasorbital sodium	Sigma-Aldrich Inc	P3761
Sprague Dawley (SD) male rats	Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd	No. SCXK (Hu) 2017-0012
thermal analgesia tester	IITC/Life Science	Model 390