Method Article

Dresser des lapins de laboratoire pour affiner les procédures d’élevage habituelles

DOI:

10.3791/66008

⸱

February 16th, 2024

 ,  ,  , 
1German Centre for the Protection of Laboratory Animals (Bf3R), German Federal Institute for Risk Assessment

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Des protocoles de dressage impliquant un renforcement positif pour les procédures d’élevage de routine chez les lapins ont été développés et se sont avérés efficaces, car les lapins ont montré de manière fiable les comportements entraînés lors de l’examen général hebdomadaire. Le ramassage des lapins avec la boîte de transport était moins réticent que la technique de manipulation conventionnelle.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Des techniques de manipulation et de dressage non aversives pour les animaux de laboratoire sont nécessaires pour faciliter les procédures d’élevage expérimentales et de routine, améliorant ainsi à la fois le bien-être des animaux et la qualité scientifique. L’entraînement au clicker a été utilisé pour développer des protocoles de dressage pour les lapins afin d’affiner les procédures d’élevage de routine stressantes généralement associées au levage (c’est-à-dire être ramassé du sol) / contention (c’est-à-dire être tenu dans les bras d’un humain). Treize lapines blanches de Nouvelle-Zélande ont été entraînées pendant trois semaines. Tous les lapins ont appris les comportements d’objectif prédéfinis : ils ont suivi le bâton cible, ont sauté sur la balance, sont entrés dans une boîte de transport et se sont cabrés en plaçant leurs pattes avant sur la main de l’entraîneur. De plus, dix animaux ont sauté du sol sur les genoux de l’entraîneur assis et ont permis à l’entraîneur de lever leurs pattes de la surface tout en étant assis sur les genoux de l’entraîneur. Pour certaines personnes, les protocoles ont dû être adaptés par des étapes intermédiaires supplémentaires. À la fin de l’entraînement, les lapins ont montré de manière fiable les comportements attendus de l’objectif, même après des pauses d’entraînement courtes et longues. À quelques exceptions près, une personne familière autre que l’entraîneur pouvait obtenir les comportements objectifs des lapins (généralisation), bien que d’autres séances aient été nécessaires pour la généralisation. Dans le test d’approche volontaire, les lapins ont préféré interagir avec le dresseur lors du1er essai, mais ont passé autant de temps avec une personne inconnue qu’avec le dresseur lors du 2eessai. Les observations comportementales suggèrent que le fait de ramasser les lapins avec la boîte de transport, comme décrit dans le protocole, au lieu de les retenir avec la peau de leur cou et de les soulever sur le bras, était moins aversif. Dans l’ensemble, les protocoles de formation étaient réalisables et peuvent servir de stratégie de raffinement dans les installations pour animaux de laboratoire. Dans l’intérêt du bien-être animal, les protocoles de dressage doivent être appliqués dans la mesure du possible.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Entre 2015 et 2019, plus de 49 millions d’animaux ont été utilisés à des fins scientifiques dans l’Union européenne (et en Norvège) ; 1 745 037 (3,5 %) d’entre eux étaient des lapins1. Les lapins sont principalement utilisés pour la recherche réglementaire (par exemple, le contrôle de la qualité, la toxicité et d’autres tests d’innocuité, y compris la pharmacologie) et la production régulière de substances biologiques (par exemple, les produits à base de sang)2. Bien que des efforts soient faits pour remplacer l’expérimentation animale par des méthodes sans animaux, l’utilisation d’animaux reste nécessaire à certaines de ces fins. Chaque fois qu’une expérience sur les animaux ne peut pas être remplacée, il est crucial de réduire le nombre d’animaux et d’affiner les conditions d’expérimentation ainsi que les conditions d’hébergement et d’élevage pour minimiser la souffrance. En 1959, Russel et Burch ont décrit cette stratégie comme le principe des 3R (remplacer, réduire, raffiner) 3 et , en 2010, elle a été mise en œuvre dans la directive 2010/63/UE sur la protection des animaux de laboratoire utilisés à des fins scientifiques4. Le rôle du raffinement, parfois appelé « Cendrillon » de la 3R5, a pris une importance croissante. Alors que le remplacement et la réduction sont des stratégies à long terme vers l’objectif ultime de la directive de remplacer complètement l’expérimentation animale, le raffinement permet l’amélioration immédiate du bien-être animal5, qui à son tour a le potentiel d’améliorer la qualité scientifique6. La manipulation et le dressage des animaux, comme indiqué à l’annexe III de la directive 2010/63/UE, sont des éléments essentiels de l’amélioration. La directive stipule que les animaleries doivent concevoir des programmes d’habituation et de dressage des animaux de laboratoire adaptés à l’espèce, à la procédure et au projet4. L’annexe A de la STE n° 123 suggère que le personnel des animaux de laboratoire passe du temps à « parler, manipuler, dresser et toiletter les animaux »7.

Certaines procédures de manipulation causent du stress, en particulier pour les proies terrestres telles que les lapins. Par exemple, être acculé, immobilisé (c’est-à-dire attrapé par un humain, tenu dans les bras d’un humain ou immobilisé par un appareil) et soulevé (c’est-à-dire ramassé du sol) pour une inspection sanitaire ou des procédures expérimentales8. Une enquête portant sur les lapins de compagnie a révélé que 57 à 61 % d’entre eux avaient du mal à être soulevés 9,10 et certains ont même montré une agression liée à la peur (c’est-à-dire des morsures)11. Cela souligne la nécessité de techniques de manipulation et de dressage en douceur. Il a déjà été démontré pour d’autres petits mammifères tels que les souris que les techniques de manipulation douces diminuent l’anxiété12. De plus, une manipulation douce combinée à un entraînement réduit le stress, l’anxiété et le comportement dépressif chez les souris13. Chez les macaques rhésus et les chimpanzés, les mesures physiologiques liées au stress étaient moins affectées lorsqu’ils étaient préalablement entraînés à une procédure14,15. On peut supposer que si un animal peut choisir de participer volontairement à la formation, il peut s’engager activement dans la situation et la contrôler, ce qui améliore le bien-être de l’animal et peut également contribuer àdes données scientifiques plus solides et plus fiables.

De nombreuses procédures de dressage d’animaux reposent sur des principes de conditionnement opérant, en particulier l’utilisation du renforcement positif et de la mise en forme 17,18,19. Le conditionnement opérant exige qu’un animal suscite des comportements qui peuvent ensuite être augmentés ou diminués20. Il existe quatre contingences courantes qui sont utilisées pour décrire le conditionnement opérant : le renforcement positif et négatif ainsi que la punition positive et négative21,22. Chez les lapins, la punition positive est utilisée lorsqu’une personne s’approche (stimulus indésirable) d’un animal pour l’éloigner ou le rapprocher d’un endroit particulier23. Dans le contexte de la manipulation d’un lapin sur la table d’examen, un exemple de renforcement négatif est la suppression de la pression (stimulus indésirable) sur le corps du lapin lorsque le lapin reste immobile ; Un exemple de punition négative est le retrait d’une récompense alimentaire (stimulus souhaité) lorsque le lapin commence à se débattre. Ni la punition positive/négative ni le renforcement négatif ne sont recommandés dans l’éducation animale. La punition provoque des effets émotionnels négatifs24, tels que la détresse comme le montre chez les chiens25. Au lieu de cela, le renforcement positif devrait être la méthode de choix lors de l’entraînement des animaux25,26. L’entraînement par renforcement positif (PRT) signifie qu’un stimulus souhaitable (par exemple, une récompense alimentaire) est fourni après que l’animal a montré un comportement souhaité, ce qui augmente la probabilité que l’animal affiche à nouveau le comportement souhaité à l’avenir27. La PRT implique souvent l’application d’un renforçateur conditionné. Un renforçateur conditionné (renforçateur secondaire) est généralement un stimulus neutre tel qu’un son, que l’animal apprend à associer à un renforçateur inconditionné (renforçateur primaire, par exemple, une récompense alimentaire)28. Une fois que l’animal a montré le comportement souhaité, le renforçateur conditionné est immédiatement présenté, suivi de la présentation de la récompense alimentaire26. Un exemple bien connu de PRT est l’entraînement au clicker, où un clicker est utilisé pour produire un clic en tant que renforçateur secondaire26.

La formation doit suivre des modèles prévisibles, ce qui est réalisé en concevant un protocole de formation. Le protocole d’entraînement décrit comment un comportement objectif peut être atteint étape par étape (c’est-à-dire la mise en forme du comportement), tandis que chaque étape est définie par des critères objectifs et doit être facilement accomplie26. Si la formation suit un protocole particulier, il est possible que le personnel des animaux de laboratoire alterne avec l’éducation des animaux. Il est important de noter que le personnel doit connaître les principes des techniques d’apprentissage et de formation afin de les appliquer correctement26. Le dressage des animaux intègre souvent la mise en forme du comportement. La mise en forme comportementale à la main a été délibérément utilisée pour la première fois par Skinner et ses collègues au début des années 194029. En revanche, dans les travaux précédents, Skinner s’est plutôt concentré sur « l’apport de petits changements dans l’environnement physique afin de mettre en œuvre un programme d’approximation successive »29. Dans un article publié dans Scientific American, il a expliqué que le renforcement d’un comportement augmente la probabilité que le comportement se répète, ce qui « permet de façonner le comportement d’un animal presque comme un sculpteur façonne un morceau d’argile ». Depuis lors, le façonnage a connu une importance croissante pour les animaux en captivité 29,30,31,32. Pour reproduire et améliorer les protocoles de façonnage, il est crucial d’évaluer les protocoles de manière systématique et objective 33,34,35,36.

Une revue systématique et une méta-analyse récemment publiées par Pfaller-Sadovsky et al. ont révélé que le renforcement conditionné était le plus souvent étudié chez les chevaux et les chiens, bien que les chats, les bovins, les poissons, les chèvres et les primates non humains aient également été étudiés37. En science animale de laboratoire, la PRT est largement utilisée pour les primates non humains 38,39,40 et les chiens41,42. De plus, des porcs43, des chèvres44 et même de petits mammifères, tels que les souris13 et les rats45, 46, 47, ont été entraînés avec succès à l’aide d’un clicker en laboratoire. À la connaissance des auteurs, l’introduction de la PRT chez les lapins de laboratoire n’a été que rarement rapportée jusqu’à présent48 ; La littérature existante évaluée par des pairs, publiée il y a plusieurs décennies, est désuète et ne répond pas aux critères de la recherche éthique moderne. Bien que peu d’informations non évaluées par des pairs suggèrent que les lapins peuvent être dressés avec succès à l’aide du PRT49, il semble y avoir un manque de connaissances sur les protocoles de dressage appropriés pour les lapins hébergés dans des installations pour animaux de laboratoire. Les raisons sous-jacentes peuvent varier. Par exemple, les techniques de formation utilisées peuvent ne pas être décrites en détail dans les articles de recherche ou les données sont générées pour la recherche réglementaire et ne sont donc pas publiées. De plus, les lapins ne sont peut-être pas l’objet principal de la recherche de raffinage, car d’autres espèces telles que les souris et les rats sont plus fréquemment utilisées dans la recherche. Étant donné que les lapins peuvent très bien masquer le stress et l’inconfort, leur état émotionnel négatif lorsqu’ils sont manipulés peut souvent passer inaperçu. La taille d’un lapin permet aux humains de retenir ces animaux pour des procédures, tandis que d’autres espèces, telles que les primates non humains, ne peuvent pas être tenues avec les mains pour des interventions similaires sans être gravement blessées. Cependant, ces faits ne devraient pas empêcher l’élaboration ou le partage de protocoles PRT pour les lapins de laboratoire.

En ce qui concerne les avantages potentiels de la PRT, les premières tentatives ont été faites pour combler le manque de connaissances sur les protocoles de dressage appropriés pour les lapins de laboratoire. Pour faciliter les procédures de routine telles que la manipulation, les inspections sanitaires et la pesée, des protocoles de dressage ont été élaborés et leur faisabilité pour les lapines blanches de Nouvelle-Zélande a été évaluée. Des comparaisons ont été effectuées afin d’évaluer si la technique de manipulation alternative décrite dans les protocoles de formation était moins aversive que la technique de manipulation conventionnelle et si les protocoles de formation peuvent servir de mesures de perfectionnement. La figure 1 illustre le calendrier de la présente étude.

Entretien des animaux

Treize lapines blanches de Nouvelle-Zélande femelles ont été obtenues de sources commerciales (arrivée à l’animalerie à l’âge d’environ sept semaines). Les animaux étaient exempts de tous les agents pathogènes viraux, bactériens et parasitaires énumérés dans les recommandations51 de la FELASA. Des vêtements et équipements de protection (gants, masques, filets à cheveux) ont été portés lors de la réalisation des étapes du présent protocole. Un groupe de six et un groupe de sept animaux ont été logés ensemble dans un enclos au sol de 2,8 m × 2,8 m (logement au sol), respectivement. Le sol a été recouvert d’un matériau de litière en bois fin et feuilleté (autoclave). De plus, du matériel de nidification et de la laine à papier étaient éparpillés sur le dessus de la litière. Trois maisons en plastique avec deux ouvertures chacune (37 cm × 60 cm ; hauteur 30 cm) et un tunnel en plastique (longueur : 58 cm ; diamètre : 16 cm) servaient d’abris. De plus, des articles d’enrichissement tels que des blocs de bois à ronger, des boules de foin et de saule et des boules de collation remplies de granulés de nourriture, qui tombent lors du déplacement de la balle, ont été fournis. Les lapins avaient libre accès à l’eau du robinet, à de la nourriture en granulés, du foin autoclavé ainsi qu’à de la paille. De plus amples informations sur les aliments et les articles d’enrichissement sont répertoriées dans la table des matériaux. La salle des animaux était nettoyée le jeudi.

Les lapins ont été maintenus dans des conditions standard (température ambiante et humidité relative données en moyenne ± écart-type : 20,3 ± 0,4 °C et 50 ± 5 %) sur un cycle lumière/obscurité de 12:12 h (lumière artificielle avec incidence supplémentaire de la lumière du jour). Une radio a été allumée 30 min avant le début de la phase lumineuse pendant environ 8 h pour habituer les lapins aux bruits ambiants.

Protocol

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L’entretien des animaux a été approuvé par l’autorité du Land de Berlin (« Landesamt für Gesundheit und Soziales », numéro de permis : ZH3 - Institut fédéral allemand pour l’évaluation des risques, Berlin). Les protocoles de formation ont été élaborés dans le cadre de l’élevage de routine afin d’affiner les procédures telles que la manipulation, l’inspection sanitaire et la pesée. Étant donné que les protocoles de dressage n’ont causé aucune douleur, souffrance ou préjudice et que toutes les observations ont été faites dans le cadre de l’élevage de routine, cette étude n’a pas été considérée comme une expérience sur les animaux selon la législation européenne.

1. Exigences générales en matière de formation

REMARQUE : Les points suivants sont généralement requis pour le dressage des animaux, indépendamment du présent protocole.

  1. Marquez clairement les animaux pour les identifier.
  2. Assurez-vous d’avoir une récompense de haute qualité, par exemple, de la nourriture très appétissante.
  3. Définissez le plan d’entraînement comprenant toutes les étapes vers le comportement objectif, c’est-à-dire le comportement souhaité que l’animal doit afficher.
    REMARQUE : Le comportement de l’objectif est façonné étape par étape, tandis que chaque étape est définie par des critères objectifs et doit être facilement accomplie.
  4. Définissez si les animaux doivent réussir à effectuer 80 % ou 100 % des étapes de dressage avant de passer à l’étape suivante.
  5. Préparez la documentation (p. ex., tableau supplémentaire 1).
  6. Ne dressez pas les animaux lorsqu’ils sont pressés et faites attention aux manières, au ton de la voix et à la vitesse de mouvement, c’est-à-dire parlez doucement et calmement, déplacez-vous lentement et de manière prévisible.
  7. Testez les étapes qui ont été entraînées lors de la formation précédente.
  8. Ne dressez pas un animal lorsque son état de santé général est altéré et/ou que l’animal n’est pas intéressé à interagir avec le dresseur.

2. Routines d’entraînement pour le présent protocole

REMARQUE : Les routines d’entraînement suivantes ont été définies pour le présent protocole.

  1. Installez l’arène d’entraînement dans la salle d’animaux/l’enclos (Figure 2) et, en fonction du comportement visé à entraîner, placez la balance ou la boîte de transport (sol 30 cm × 50 cm ; porte 27 cm × 25,5 cm ; avec une ouverture dans le couvercle 16 cm × 39 cm) dans l’arène.
  2. Placez la balance et la boîte de transport à l’extérieur de l’arène pour familiariser les lapins avec ces nouveaux objets avant que les comportements d’objectif « pesée » et « boîte de transport » ne soient entraînés.
  3. Pour les comportements d’objectif (voir les étapes 6 à 9), conduisez le lapin dans l’arène d’entraînement, comme décrit à l’étape 5.7.
  4. Asseyez-vous sur le sol ou utilisez un tabouret/marche bas pour vous asseoir dans l’arène d’entraînement.
  5. Entraînez les comportements des objectifs l’un après l’autre, dans l’ordre décrit dans le protocole et non simultanément. Faites une exception si un animal ne parvient pas à apprendre une étape d’un comportement d’objectif pendant deux jours consécutifs - dans ce cas, entraînez simultanément le comportement d’objectif suivant. Modifiez l’ordre des comportements des objectifs si cela facilite le processus d’entraînement d’un individu.
  6. Après l’accoutumance et l’introduction du clicker, commencez à entraîner tous les animaux sur la 1èreétape du comportement d’objectif « suivre la cible » (c’est-à-dire que la balle à l’extrémité du bâton cible est définie comme cible). Notez qu’en fonction de leurs performances individuelles, ils peuvent atteindre différentes étapes d’entraînement ce jour-là. Poursuivez l’entraînement en fonction des progrès individuels des animaux dans les jours suivants.
  7. Prévoyez une séance d’entraînement (p. ex., environ 30 minutes pour un groupe de six à sept animaux) pour chaque jour de travail de la semaine.
    REMARQUE : La séance de formation commence lorsque le dresseur se trouve dans la salle ou l’enclos des animaux et qu’il est prêt à commencer la formation. Une session se termine lorsqu’aucun des lapins ne participe (plus) à l’entraînement ou que tous les lapins ont atteint l’étape finale de l’entraînement du comportement objectif à entraîner dans cette session. Commencez chaque séance d’entraînement par la dernière étape réussie du protocole. Une session se compose d’au moins un ou plusieurs essais par animal.
  8. Commencez un essai en demandant à l’animal d’effectuer une étape d’entraînement particulière (c’est-à-dire l’étape 3.1 après que le lapin a appris à toucher la cible avec le nez/la bouche) et terminez l’essai lorsque l’animal ne participe plus (plus) à l’entraînement ou que l’animal a atteint l’étape finale d’entraînement du comportement objectif à entraîner. À la fin de l’entraînement, ouvrez l’arène d’entraînement et guidez le lapin hors de l’arène ; Tenez ensuite le bâton cible (avec la cible tournée vers le plafond) ainsi que le bol de récompense devant le coffre.
  9. Planifiez la formation avant l’alimentation, le nettoyage, les traitements ou les procédures expérimentales.
  10. Utilisez un bol de récompense avec un clicker intégré (Figure 3, Fichier de codage supplémentaire 1) et, pour certains comportements d’objectif, un bâton cible supplémentaire.
  11. Remplissez le bol de récompense avec de la nourriture appétissante, par exemple des graines de tournesol et des friandises à base de céréales.
    REMARQUE : Les lapins sont folivores et ces exemples de récompenses ne sont pas optimaux ; Cependant, en raison des restrictions d’hygiène dans l’animalerie de laboratoire, ils constituaient les meilleures alternatives disponibles pour ces animaux. Si possible, les herbes fraîches doivent être préférées comme récompense alimentaire. Notez qu’une récompense n’est une récompense que si le lapin la favorise vraiment.
  12. Assurez-vous de toujours tenir le bol de récompense dans la même position, par exemple devant le coffre, et ne commencez à déplacer le bol de récompense vers les lapins qu’après le clic. À l’exception du comportement de l’objectif « se cabrer » et « sauter sur les genoux », tenez le bâton cible dans l’une et le bol de récompense dans l’autre main.
  13. Présentez la récompense à l’endroit où se trouvait le nez/la bouche du lapin lorsque le comportement souhaité a été correctement montré.
  14. Veillez à ce que le lapin ne mange qu’une petite quantité de nourriture lors de la présentation de la récompense.
  15. Si un lapin montre le comportement souhaité au moins quatre fois dans un bloc de cinq tentatives (taux de réussite de 80%), passez à l’étape suivante. Si un animal n’est pas en mesure d’effectuer l’étape suivante (c’est-à-dire qu’il ne l’effectue pas plus d’une fois), retournez à l’étape précédente du protocole. S’il était nécessaire de revenir à une étape précédente ou si un lapin ne participe pas à l’entraînement, révisez les protocoles d’entraînement (par exemple, définissez des étapes d’entraînement plus petites), choisissez une autre récompense alimentaire (plus appétissante) ou vérifiez les compétences de dressage du dresseur.
  16. Si un lapin effectue correctement l’étape d’entraînement finale d’un comportement d’objectif, terminez les séances d’entraînement de ce lapin le même jour.
  17. Imprimez la fiche de documentation (Dossier supplémentaire 1), les protocoles d’entraînement détaillés, ainsi que les protocoles d’entraînement simplifiés (Dossier supplémentaire 2) et joignez-les à un presse-papiers ou ouvrez-les sur une tablette. Utilisez la feuille de documentation pour noter les étapes de dressage atteintes par les animaux individuels lors de chaque session.

3. Conditionnement/accoutumance contextuelle

REMARQUE : Les séances de conditionnement/habituation contextuelle sont effectuées quotidiennement par le dresseur et les soigneurs d’animaux pendant environ 15 minutes par groupe de lapins sur une période de cinq jours consécutifs (du lundi au vendredi).

  1. Parlez doucement aux lapins.
  2. Offrez des récompenses alimentaires appétissantes.
    REMARQUE : Sachez que des changements soudains dans le régime alimentaire peuvent causer des problèmes digestifs chez les lapins. Par conséquent, introduisez lentement la nouvelle récompense alimentaire.
  3. Déplacez le bol de récompense rempli de nourriture appétissante vers les lapins et laissez-les manger dans celui-ci.
  4. Touchez doucement les lapins autour du cou, des épaules, du dos et de la croupe sans les retenir.

4. Présentation du clicker

REMARQUE : Comportement de l’objectif : Approchez-vous de l’entraîneur et mangez la récompense du bol après le click. Le but est que le lapin associe la récompense alimentaire au clic, c’est-à-dire que le lapin mange la récompense alimentaire après le clic.

  1. Laissez le lapin s’approcher.
  2. Cliquez une fois et déplacez le bol de récompense vers le lapin (appelé click and treat ou C et T).
  3. Répétez l’étape 4.2 dix fois. Lorsque vous cliquez pour la dixième fois, attendez une seconde avant que la récompense ne soit présentée et observez le comportement du lapin.
    REMARQUE : Si l’animal cherche la récompense immédiatement après le clic, on peut supposer que le conditionnement du renforçateur secondaire a réussi.
  4. Répétez les étapes 4.1.-4.3. Le lendemain, si un lapin n’a pas mangé la nourriture, récompensez après le clic au moins huit fois.

5. Suivre l’objectif

REMARQUE : Comportement de l’objectif : Suivez et touchez la cible avec le nez/la bouche. Les comportements d’objectif des sections 6 à 9 sont des modifications du comportement d’objectif présenté dans la section 5.

  1. Placez la cible près du nez/de la bouche du lapin.
    REMARQUE : La balle à l’extrémité du bâton cible est définie comme cible.
    1. C et T lorsque le lapin touche la cible avec le nez/la bouche.
      REMARQUE : Assurez-vous que le nez/la bouche du lapin ne touche pas le bâton à un endroit indéfini sauf la balle.
    2. Retirez la cible du champ de vision du lapin pendant la récompense.
    3. Répétez toutes les étapes ci-dessus cinq fois jusqu’à ce que le lapin réussisse cette étape au moins quatre fois sur cinq (taux de réussite de 80%).
  2. Placez la cible à un endroit différent où elle peut être touchée avec le nez/la bouche par des mouvements de tête sans bouger tout le corps.
    1. C et T lorsque le lapin touche la cible avec le nez/la bouche et suivez les étapes 5.1.2 et 5.1.3.
  3. Placez la cible à une plus grande distance du lapin et laissez le lapin s’étirer vers lui.
    1. C et T lorsque le lapin touche la cible avec le nez/la bouche et suivez les étapes 5.1.2 et 5.1.3.
  4. Augmentez encore la distance entre la cible et le lapin, en obligeant l’animal à faire un saut pour atteindre la cible.
    1. C et T lorsque le lapin touche la cible avec le nez/la bouche et suivez les étapes 5.1.2 et 5.1.3.
  5. Placez la cible juste devant le nez/la bouche du lapin afin que le lapin puisse toucher la cible, puis éloignez lentement la cible du lapin. Assurez-vous que le lapin doit faire un nombre variable de sauts pour suivre la cible.
    REMARQUE : Dans un bloc de cinq tentatives, la 1ère, la 2ème, la 3ème, la 4ème et la 5èmefois, le lapin est récompensé après 2, 1, 2, 3 et 2 sauts, respectivement (en moyenne : après 2 sauts).
    1. C et T lorsque les lapins ont fait le nombre requis de sauts et suit les étapes 5.1.2 et 5.1.3.
  6. Répétez l’étape 5.5 et déplacez la cible dans le couloir entre les deux objets.
    REMARQUE : Pour cette étape, deux objets tels que des tunnels sont placés parallèlement l’un à l’autre et forment un couloir.
    1. C et T lorsque les lapins ont fait le nombre requis de sauts et suivent les étapes 5.1.2 et 5.1.3.
  7. Répétez l’étape 5.5 et déplacez la cible vers l’arène d’entraînement pour que le lapin y entre.
    1. C et T lorsque les lapins ont fait le nombre requis de sauts et suivent les étapes 5.1.2 et 5.1.3.

6. Pesée

REMARQUE : Comportement de l’objectif : Restez sur la balance pendant au moins une seconde. Si la surface de la balance est trop glissante, un tampon antidérapant peut être placé sur le dessus. Cependant, certains lapins ont tendance à ronger le coussinet.

  1. Dirigez le lapin avec le bâton cible vers la balance comme décrit à l’étape 5.5.
    1. C et T lorsque le lapin touche la cible avec le nez/la bouche.
    2. Retirez la cible du champ de vision du lapin pendant la récompense.
    3. Répétez toutes les étapes décrites ci-dessus cinq fois jusqu’à ce que le lapin réussisse cette étape au moins quatre fois sur cinq (taux de réussite de 80%).
  2. Déplacez la cible légèrement au-dessus de l’échelle de sorte que le lapin marche dessus avec les pattes avant pour toucher la cible avec le nez/la bouche.
    1. C et T et suivez les étapes 6.1.2 et 6.1.3.
  3. Déplacez la cible légèrement au-delà du centre de l’écaille de sorte que le lapin marche dessus avec les pattes avant et s’étire sur l’écaille pour toucher la cible avec le nez/la bouche.
    1. C et T et suivez les étapes 6.1.2 et 6.1.3.
  4. Déplacez la cible plus loin que le centre de l’écaille de sorte que le lapin monte sur l’échelle avec les pattes avant et arrière pour toucher la cible avec le nez/la bouche.
    1. C et T et suivez les étapes 6.1.2 et 6.1.3.
  5. Conduisez le lapin sur la balance comme décrit au point 4.4. et attendez quelques secondes avant C et T.
    REMARQUE : Dans cette étape, récompensez le lapin après s’être assis pendant un temps variable sur la balance. Dans un bloc de cinq tentatives, les1er, 2e, 3e, 4e et 5efois, le lapin est récompensé après 0,5, 1,0, 2,0, 0,5 et 1,0 secondes, respectivement (en moyenne : 1,2 s). Pendant que le lapin reste immobile pendant ce temps, le poids peut être lu sur la balance. Si la balance prend plus de temps pour se stabiliser et mesurer le poids, augmentez le temps d’assise de l’animal sur la balance.
    1. C et T et suivez les étapes 6.1.2 et 6.1.3.

7. Entrée dans la boîte de transport

REMARQUE : Comportement de l’objectif : Entrer et sortir de la boîte de transport. Pour la séance d’entraînement, utilisez une boîte de transport (sol 30 cm × 50 cm ; porte 27 cm × 25,5 cm) avec une ouverture dans le couvercle (16 cm × 39 cm) dont le fond est recouvert de litière souillée.

  1. Dirigez le lapin avec le bâton cible vers la boîte comme décrit à l’étape 5.5.
    1. C et T lorsque le lapin est devant l’entrée du box.
    2. Retirez la cible du champ de vision du lapin pendant la récompense.
    3. Répétez toutes les étapes décrites ci-dessus cinq fois jusqu’à ce que le lapin réussisse la tâche au moins quatre fois sur cinq (taux de réussite de 80 %).
  2. Tenez le bâton cible à travers l’ouverture du couvercle et déplacez-le dans la boîte, motivant ainsi le lapin à entrer dans la boîte avec les pattes avant.
    1. C et T et suivez les étapes 7.1.2 et 7.1.3.
  3. Suivez l’étape 7.2 et conduisez le lapin dans la boîte (c’est-à-dire que toutes les pattes avant et arrière sont entrées dans la boîte).
    1. C et T et suivez les étapes 7.1.2 et 7.1.3.
  4. Suivez l’étape 7.3 et fermez la porte de la boîte pendant quelques secondes. Ensuite, ouvrez à nouveau la porte.
    1. C et T et suivez les étapes 7.1.2 et 7.1.3.
  5. Suivez l’étape 7.3 et fermez la porte de la boîte. Soulevez délicatement la boîte un peu (c’est-à-dire à quelques centimètres au-dessus du sol). Replacez la boîte sur le sol et ouvrez la porte.
    1. C et T et suivez les étapes 7.1.2 et 7.1.3.
  6. Suivez l’étape 7.5. Ensuite, conduisez le lapin avec le bâton cible hors de la boîte.
    1. C et T et suivez les étapes 7.1.2 et 7.1.3.

8. L’élevage

REMARQUE : Comportement du but : Placez les pattes avant sur la paume de la main pendant le cabrage. Pour la séance d’entraînement, tenez le bâton cible et le bol de récompense dans la même main.

  1. Placez la cible au-dessus de la tête du lapin de sorte que le lapin étire le nez vers le haut pour toucher la cible avec le nez/la bouche pendant que toutes les pattes restent au sol.
    1. C et T.
    2. Retirez la cible du champ de vision du lapin pendant la récompense.
    3. Répétez toutes les étapes décrites ci-dessus cinq fois jusqu’à ce que le lapin réussisse cette étape au moins quatre fois sur cinq (taux de réussite de 80%).
  2. Placez la cible au-dessus de la tête du lapin, comme décrit à l’étape 8.1. Une fois que le lapin a étiré le nez vers le haut, déplacez la cible plus haut afin que le lapin soulève les pattes avant du sol et touche la cible avec le nez ou la bouche.
    1. C et T et suivez les étapes 8.1.2 et 8.1.3.
      REMARQUE : Si le lapin ne parvient pas à effectuer 8.2, une étape intermédiaire peut être ajoutée après 8.2. Pour cela, suivez 8.2 puis approchez-vous et touchez les pattes avant du lapin (surface palmaire) avec la paume de la main libre. C et T et suivez les étapes 8.1.2 et 8.1.3.
  3. Placez la paume de la main libre devant le lapin et déplacez la cible au-dessus de la tête du lapin de sorte que le lapin mette les pattes avant sur la main pour toucher la cible avec le nez/la bouche.
    1. C et T après une seconde et suivez les étapes 8.1.2 et 8.1.3.
      REMARQUE : Alors que les pattes avant reposent sur la main de l’entraîneur, l’abdomen du lapin peut être inspecté visuellement.

9. Sauter sur les genoux

REMARQUE : Comportement de l’objectif : Sautez sur les genoux de l’entraîneur et restez assis pendant qu’on le touche. Pour les étapes 9.5 à 9.9, tenez le bâton cible et le bol de récompense dans la même main, car une main doit toucher le lapin.

  1. Dirigez le lapin avec le bâton cible près du dresseur comme décrit à l’étape 5.5 du protocole.
    1. C et T lorsque le lapin touche la cible avec le nez/la bouche.
    2. Retirez la cible du champ de vision du lapin pendant la récompense.
    3. Répétez toutes les étapes décrites ci-dessus cinq fois jusqu’à ce que le lapin réussisse cette étape au moins quatre fois sur cinq (taux de réussite de 80%).
  2. Déplacez la cible au-dessus des pattes de l’entraîneur de sorte que le lapin mette les pattes avant sur les pattes pour toucher la cible avec le nez/la bouche.
    1. C et T et suivez les étapes 9.1.2 et 9.1.3.
  3. Déplacez la cible au-dessus des pattes et légèrement plus loin du lapin afin que le lapin mette les pattes avant sur les pattes et s’étire vers l’avant pour toucher la cible avec le nez ou la bouche.
    1. C et T et suivez les étapes 9.1.2 et 9.1.3.
      REMARQUE : Si le lapin ne parvient pas à effectuer 9.4, une étape intermédiaire peut être ajoutée après 9.3. Pour cela, suivez l’étape 9.3, puis attirez le lapin avec le bol de récompense sur les genoux. Lorsque le lapin a placé ses quatre pattes sur les genoux, C et T et suivez les étapes 9.1.2 et 9.1.3.
  4. Déplacez la cible au-dessus des pattes et encore plus loin du lapin afin que le lapin saute sur les genoux pour toucher la cible avec le nez/la bouche.
    1. C et T et suivez les étapes 9.1.2 et 9.1.3.
  5. Suivez l’étape 9.4. et caressez soigneusement le lapin avec la main libre du crâne à la caudale (en commençant par l’épaule) pendant que le lapin est assis sur les genoux.
    1. C et T et suivez les étapes 9.1.2 et 9.1.3.
  6. Suivez l’étape 9.4 et caressez soigneusement les oreilles du lapin avec la main libre du crâne à la caudale pendant que le lapin est assis sur les genoux.
    1. C et T et suivez les étapes 9.1.2 et 9.1.3.
  7. Suivez l’étape 9.4. et saisissez doucement l’une des oreilles du lapin pour inspecter visuellement les oreilles.
    1. C et T et suivez les étapes 9.1.2 et 9.1.3.
  8. Suivez l’étape 9.4. et caressez une patte avant ou arrière avec la main libre pendant que le lapin est assis sur les genoux.
    REMARQUE : Si le côté droit du corps du lapin est tourné vers l’entraîneur et le côté gauche du corps opposé à l’entraîneur, les pattes gauches peuvent être touchées doucement (et vice versa). Assurez-vous d’entraîner les deux côtés en alternance.
    1. C et T et suivez les étapes 9.1.2 et 9.1.3.
  9. Suivez l’étape 9.4. et soulevez soigneusement une patte avant ou une patte arrière avec la main libre pendant que le lapin s’assoit sur les genoux.
    REMARQUE : Les griffes peuvent être inspectées lorsque les pattes sont levées. Assurez-vous d’entraîner les deux côtés en alternance.
    1. C et T et suivez les étapes 9.1.2 et 9.1.3.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Dans les sections suivantes, des informations sur le matériel et les méthodes qui vont au-delà du protocole sont fournies, ainsi que les résultats représentatifs.

Statistiques

Les données obtenues à partir du protocole mentionné ci-dessus ont été stockées dans des feuilles de calcul et analysées à l’aide d’un logiciel d’analyse statistique avancée (Table des matériaux). Des tests de normalité (inspection visuelle des histogrammes et des graphiques qq, comparaison de la moyenne, de l’écart-type et de la médiane) ont été effectués pour les paramètres continus. Les différences entre les paramètres étudiés dans le test d’approche volontaire (durée, interaction avec l’entraîneur et une personne inconnue, contacts entre les pattes et les pattes avant) ont été analysées à l’aide du test de Wilcoxon. Les différences entre les techniques de manipulation ont été analysées à l’aide du test de Wilcoxon ou du test de McNemar (s’il est binaire). Les différences ont été considérées comme significatives à p < 0,05. Lors de l’utilisation du test de Wilcoxon à rang signé, la distribution des différences devait être symétrique selon l’inspection visuelle de l’histogramme.

L’étude était exploratoire. Une analyse de puissance basée sur la durée pendant laquelle les lapins ont interagi avec les « dispositifs de manipulation » a été effectuée après l’étude (test de Wilcoxon ; puissance ≥ 0,999) à l’aide de G*Power (version 3.1.9.7)52.

Accoutumance

Tous les lapins, à l’exception des lapins #4 et #10, ont ingéré de la nourriture du bol de récompense et ont laissé l’entraîneur les toucher lors de toutes les séances d’habituation. Le lapin #4 n’a pas accepté la récompense alimentaire lors de la 1èresession, mais a mangé quatre fois dans le bol de récompense lors de la 2èmesession. Cependant, la quantité de récompense absorbée a augmenté au cours des séances ultérieures et le lapin a également pu être touché. Le lapin #10 a également eu besoin de plus de temps pour s’habituer à l’entraîneur et à la récompense alimentaire. Lors de la première séance, le lapin a accepté la récompense alimentaire de l’entraîneur après 5 minutes, mais n’a pas pu être touché. Lors de la 2ème session, l’intérêt pour la nourriture n’a pas été observé. Dans les sessions suivantes, cependant, le lapin #10 a accepté à la fois des récompenses alimentaires et des touchers.

Présentation du clicker

Douze lapins sur treize ont terminé avec succès la section 4 du protocole en une journée et ont associé la récompense alimentaire (renforçateur primaire) au clic (renforçateur secondaire) au cours de cette séance d’entraînement. L’association a été testée en observant le comportement des lapins après la présentation du clic pour la dixième fois. Lorsqu’un animal cherchait la récompense immédiatement après le clic, on supposait que le lapin associait le renforçateur primaire au renforçateur secondaire. Le lapin #4 n’a pas mangé la récompense alimentaire après le clic du jour 1. Il a fallu au lapin #4 un jour de plus (c’est-à-dire deux jours) pour réussir à associer le clic et la récompense alimentaire.

Suivre la cible

Le tableau 1 fournit le nombre de séances d’entraînement (en forme de médiane, 25e centile et 75ecentile) nécessaires pour enseigner aux lapins les comportements objectifs des protocoles. Il a fallu 2 séances d’entraînement (médiane) aux lapins pour suivre le bâton cible dans l’arène d’entraînement (Tableau 1). Tous les lapins ont atteint l’étape finale (5.7) de ce comportement objectif.

Le lapin #4 et le lapin #7 ont eu besoin respectivement de 7 et 8 séances d’entraînement avant de suivre le bâton cible dans l’arène d’entraînement. Comme le lapin #7 n’a pas réussi à terminer l’étape 5.4 et n’a pas fait un saut pour suivre le bâton cible, une étape d’entraînement supplémentaire (5.3+) a été implémentée dans le protocole après l’étape 5.3. À l’étape 5.3+, le bâton cible a été placé à une plus grande distance du lapin qu’à l’étape 5.3 et le lapin a dû s’étirer vers lui dans différentes directions, mais le bâton cible était toujours accessible sans faire de saut. Le lapin #4 a eu des problèmes avec l’étape 5.5 et n’a pas été en mesure de suivre le bâton cible, qui était placé juste devant le nez et la bouche, pour un nombre variable de sauts. Par conséquent, une étape supplémentaire 5.4+ a été ajoutée au protocole. Dans ce cas, le bâton cible a été placé juste devant le nez / la bouche du lapin et a ensuite été déplacé dans différentes directions, obligeant le lapin à faire un saut. La même étape supplémentaire a également été utilisée avec succès pour le lapin #7. Après avoir terminé les étapes de formation supplémentaires avec un taux de réussite d’au moins 80 %, ils ont pu poursuivre avec les étapes suivantes.

Pesée

Les lapins ont eu besoin d’une séance d’entraînement (médiane) jusqu’à ce qu’ils effectuent l’étape 6.5 (c’est-à-dire rester sur la balance pendant une durée variable) (Tableau 1). Tous les lapins ont atteint la dernière étape (6,5) de ce comportement objectif.

Entrée dans la boîte de transport

Les lapins ont réussi toutes les étapes de 7,1 à 7,6 (c’est-à-dire entrer et sortir de la boîte de transport après le levage) en 2 séances d’entraînement (médiane) (tableau 1). Tous les lapins ont atteint l’étape finale (7,6) de ce comportement objectif.

Lorsque les lapins #2 et #3 ont réussi l’étape 7.6 pour la première fois, ils ne voulaient pas entrer de nouveau dans la boîte de transport pour répéter cette étape. Par conséquent, l’étape 7.5+ a été créée : après que l’animal ait suivi le bâton cible vers la boîte, le bol de récompense a été maintenu à travers l’ouverture du couvercle et l’animal a été attiré à l’intérieur de la boîte. Une fois que le lapin est entré dans la boîte, la porte a été fermée et la boîte a été soigneusement soulevée. Après avoir remis la boîte sur le sol, la porte a été ouverte et le lapin a été conduit avec le bâton cible hors de la boîte. Les deux animaux ont réussi à effectuer l’étape 7.5+ au moins 4 fois, suivie de l’étape 7.6 le lendemain.

Élevage

1 séance d’entraînement (médiane) a été nécessaire jusqu’à ce que les lapins réussissent l’étape 8.3 (c.-à-d. placer les pattes avant sur la main du dresseur) (tableau 1). Étant donné que 11 lapins sur 13 (c’est-à-dire tous, sauf ceux de #3 et #7) n’ont pas réussi à effectuer l’étape 8.3, une étape de dressage supplémentaire 8.2+ après 8.2 a été définie pour ces animaux. À l’étape 8.2+, le bâton cible a été déplacé au-dessus de la tête du lapin de sorte que le lapin soulève les pattes avant du sol et touche la cible avec le nez/la bouche. Alors que le lapin touchait la cible, l’entraîneur s’est approché et a touché les pattes avant (surface palmaire) avec la paume de sa main libre. Après que l’étape 8.2+ ait été réalisée avec succès dans au moins quatre tentatives sur cinq, l’étape 8.3 a été entraînée à nouveau et terminée.

Sauter sur le tour

2.5 Des séances d’entraînement (médianes) ont été nécessaires pour entraîner les lapins aux étapes 9.1. à 9,9. (Tableau 1). Dix lapins ont réussi à atteindre l’étape finale 9.9 (c’est-à-dire accepter que leurs pattes soient touchées alors qu’ils étaient assis sur les genoux de l’entraîneur). Le lapin #4 n’a atteint que l’étape 9.2 (c’est-à-dire placer ses pattes avant sur les pattes de l’entraîneur) et le lapin #10 a atteint l’étape 9.3 (c’est-à-dire sauter sur les genoux de l’entraîneur). Le lapin #7 a atteint l’étape 9.3+, qui était une étape intermédiaire supplémentaire après l’étape 9.3. Dans ce cas, le lapin a placé les pattes avant sur les pattes de l’entraîneur, comme décrit à l’étape 9.2, et a ensuite été attiré avec le bol de récompense sur les genoux de l’entraîneur. Une fois les quatre pattes placées sur les genoux de l’entraîneur, le clic et la récompense ont été présentés. Cette étape a été ajoutée avec succès au protocole pour huit lapins afin de faciliter l’exécution des étapes suivantes.

Généralisation

Pour évaluer si les lapins ont généralisé les indices entraînés pour effectuer les comportements d’objectif avec d’autres personnes que le dresseur, une gardienne d’animaux, qui était familière aux lapins mais n’avait que peu d’expérience préalable dans l’entraînement au clicker, a demandé aux lapins d’effectuer les comportements d’objectif entraînés « peser », « entrer dans la boîte de transport », « se cabrer » et « sauter sur les genoux ». Si un lapin n’a pas encore appris l’étape finale de « sauter sur les genoux », la dernière étape d’entraînement réussie doit être démontrée.

Les séances ont eu lieu pendant cinq jours consécutifs après la fin de la formation de 3 semaines (figure 1). Le gardien des animaux a lu les protocoles d’entraînement avant la1ère séance. Au début de la 1èreséance, le formateur a fait une brève démonstration de tous les comportements d’objectif. Ensuite, elle est restée dans l’enclos, a donné des instructions pendant les séances et a documenté l’étape des comportements d’objectif que les lapins ont affichée. Si un lapin ne montrait pas une étape particulière, le gardien de l’animal avait pour instruction de revenir à l’étape précédente du protocole.

Tous les lapins, à l’exception du lapin #4, ont effectué les comportements cibles « pesée », « entrée dans la boîte de transport » et « élevage » (données données données sous forme de médiane) après 1 séance, 2 séances et 2 séances, respectivement (tableau 2). Le Lapin #4 n’était pas disposé à montrer les étapes de ces comportements objectifs.

Huit animaux sur dix qui ont pu montrer l’étape finale de « sauter sur les genoux » (9,9) ont démontré ce comportement après 3 séances (médiane). Bien que les lapins #3 et #11 aient déjà appris l’étape finale du « saut sur les genoux » (9.9), ils n’ont montré l’étape 9.3 qu’avec le gardien de l’animal. Les lapins #4, #7 et #10 ont montré le même pas qu’avec l’entraîneur (9.2, 9.3+ et 9.3).

Performance des comportements d’objectif après des pauses d’entraînement de 1 semaine

Pour tester si les animaux pouvaient retenir les étapes finales de « pesée », « entrée dans la boîte de transport », « élevage » et « saut sur les genoux », le formateur a récupéré les comportements objectifs une semaine et deux semaines après les séances de généralisation (Figure 1). Pendant ces pauses, les animaux n’étaient pas dressés et ne recevaient aucune récompense.

Aux deux moments, tous les lapins ont été en mesure d’effectuer les dernières étapes de « pesée » (6,5), d'« entrée dans la boîte de transport » (7,6) et d'« élevage » (8,3) qu’ils ont apprises lors de l’entraînement précédent de 3 semaines. Les animaux (n = 10) qui ont appris l’étape finale de « sauter sur les genoux » (9,9) ont montré ce comportement aux deux points temporels ; Ceux qui n’ont pas appris la dernière étape de ce comportement d’objectif (n = 3) ont été en mesure de démontrer la dernière étape qu’ils avaient précédemment atteinte (Lapin #4 : Étape 9.2 ; Lapin #7 : Étape 9.3+, Lapin #10 : Étape 9.3) après la première pause d’une semaine. Après la deuxième pause d’une semaine, ces trois lapins ont montré les mêmes pas que la semaine précédente, mais on leur a également demandé d’effectuer les étapes suivantes et avons atteint l’étape 9.9.

Performance des comportements objectifs après une pause d’entraînement d’environ 8,5 semaines

Après que les animaux aient eu une pause d’entraînement d’environ 7,5 semaines (#1-5, #13) ou 9,5 semaines (#6-12), les comportements d’objectif ont été rappelés à nouveau. Tous les animaux ont pu montrer l’étape finale de la « pesée » (6,5), de « l’entrée dans la boîte de transport » (7.6) et de l'"élevage » (8.3). Douze lapins ont montré la dernière étape de « sauter sur les genoux » (9.9) tandis que le lapin #7 a seulement placé ses pattes avant sur les pattes de l’entraîneur et s’est étiré vers l’avant pour toucher la cible avec son nez/sa bouche (9.3).

Approche volontaire envers le formateur familier et une personne inconnue

Trois semaines après l’entraînement, le comportement d’approche volontaire des lapins a été testé pour étudier leur interaction avec le dresseur familier et une personne inconnue (les deux femelles). Avant le test, les deux personnes douchées avec le même gel douche et le même shampooing, ont mis le même type de vêtements et d’équipements de protection (gants, masques, filets à cheveux). Deux essais de 5 minutes ont été effectués, avec une pause de 2 minutes entre les essais dans l’enclos des animaux. Comme le montre la figure 4A, l’entraîneur familier et une personne inconnue étaient assis (dans la même position) en face l’un de l’autre sur le sol de l’enclos, le dos faisant face à la paroi de l’enclos. Deux maisons ont été retirées de l’enclos ; La maison restante et le tunnel ont été placés près des deux autres murs à la même distance des deux personnes. Dans le 2eessai, ils ont échangé l’emplacement de leurs sièges pour tenir compte des préférences potentielles des lapins. Ils n’ont ni bougé ni parlé pendant les 5 minutes d’essai. Si un lapin mordillait son pantalon et lui pinçait la patte, une main était doucement déplacée vers le lapin pour le faire s’arrêter. Il convient de noter que les observations des animaux individuels ont été faites au sein du groupe, c’est-à-dire que les lapins ont pu interagir les uns avec les autres pendant les deux essais.

Les vidéos ont été analysées rétrospectivement à l’aide de BORIS53. Selon l’éthogramme défini pour cette enquête, un lapin a interagi avec une personne lorsque les quatre pattes étaient dans le carré de 70 cm × 70 cm autour d’une personne ou sur la ligne de bordure de ce carré. De plus, il a été vérifié si un lapin plaçait ses deux pattes avant sur les pattes ou s’il sautait sur les genoux (les quatre pattes étant placées sur les genoux).

La figure 4B montre la durée pendant laquelle les lapins ont interagi avec les deux personnes. Le test de Wilcoxon a révélé que le temps d’interaction avec l’entraîneur et la personne inconnue différait significativement dans le 1eressai ( z = -2,040, p = 0,041, coefficient de corrélation de Pearson r = 0,57) mais pas dans le 2eessai ( z = 0,245, p = 0,807, r = 0,07). Dans le1er essai, les lapins ont passé plus de temps à interagir avec le dresseur.

Trois lapins (#1, #5, #6) et cinq (#1, #6, #7, #8, #12) ont placé leurs pattes avant sur les pattes de l’entraîneur lors des épreuves 1 et 2, respectivement. Cinq animaux ont sauté avec leurs quatre pattes sur les genoux de l’entraîneur (épreuve 1 : #1, #3, #5, #6 ; épreuve 2 : #9). Alors que quatre animaux (#1, #2, #8, #9) dans le 1eressai et trois animaux (#1, #4, #8) dans le 2eessai ont grimpé avec leurs pattes avant sur les jambes de la personne inconnue, aucun d’entre eux n’a sauté avec ses quatre pattes sur ses genoux. La moyenne des différences entre le nombre de « contacts entre les pattes avant et les pattes avant » ne différait pas significativement entre l’entraîneur et la personne inconnue dans l’essai 1 (z = -0,264, p = 0,792, r = 0,07) ni dans l’essai 2 (z = -0,707, p = 480, r = 0,20).

Effet des techniques de manipulation sur le comportement des lapins vis-à-vis du « dispositif de manipulation »

Pour déterminer si les techniques utilisées pour soulever les lapins du sol affectaient leur comportement, une observation comportementale de 2 minutes a été réalisée après cette procédure dans le cadre de l’examen général sur deux jours consécutifs (Figure 1). Cette observation a été réalisée sur sept animaux.

Le jour 1, les lapins ont été récupérés avec la boîte de transport. Pour cela, ils ont suivi le bâton cible dans la boîte, la boîte a été fermée et amenée à la table d’examen, comme décrit à l’étape 7.5 de la formation. Ici, ils ont été doucement soulevés de la boîte à la table, les deux mains / bras placés en dessous / autour du corps de l’animal. Un contrôle de santé (comprenant palpation du corps, examen visuel des oreilles, des yeux, des narines, des incisives, de la région anogénitale) a été effectué et une récompense alimentaire leur a été offerte par la suite. Après l’inspection sanitaire, ils ont été guidés doucement avec les mains dans la boîte de transport. Le bâton cible n’a pas été utilisé sur la table d’examen pour s’assurer que les mains du dresseur étaient libres pour sécuriser les animaux. Lorsque les lapins sont rentrés dans la boîte de transport et que la porte a été fermée, la boîte a été transférée dans l’enclos et la porte a été ouverte. Le lapin a été amené à suivre le bâtonnet cible et à quitter la boîte, suivi de la présentation de la récompense alimentaire, comme décrit à l’étape 7.6 de l’entraînement.

Le jour 2, les lapins ont été ramassés par la technique conventionnelle, couramment utilisée par les gardiens d’animaux (c’est-à-dire qu’ils ont été retenus par la peau de leur cou d’une main et brièvement soulevés sur l’autre bras, la tête faisant face au creux du bras). Ensuite, ils ont été transférés à la table d’examen et une inspection sanitaire a été effectuée, comme décrit ci-dessus. Après l’inspection sanitaire, une récompense alimentaire provenant du bol de récompense leur a été offerte. Enfin, ils ont de nouveau été retenus par la peau de leur cou et brièvement soulevés sur le bras pour les ramener à l’enclos. Après leur libération, une récompense alimentaire leur a été offerte à nouveau.

Après que la récompense alimentaire ait été offerte aux lapins dans l’enclos, le dresseur s’est assis sur le sol de l’enclos sans interagir avec les lapins et une vidéo de 2 minutes a été enregistrée, qui a été analysée rétrospectivement à l’aide de BORIS53. Il convient de noter que les observations des animaux individuels ont été faites au sein du groupe parce qu’ils devaient être suivis dans leur environnement familier. Cela signifie que les lapins pourraient interagir les uns avec les autres. Les paramètres suivants ont été étudiés et définis : la durée de l’interaction avec le dresseur ou la boîte de transport (c’est-à-dire qu’un lapin se trouvait dans la zone d’interaction du dresseur ou de la boîte de transport alors que le nez était à moins d’une longueur de corps de l’entraîneur ou de la boîte) ; la durée du temps passé dans la boîte de transport (c.-à-d. que cet événement s’est produit lorsque l’animal se trouvait dans la zone d’interaction de la boîte ; il a commencé lorsque les lapins sont entrés dans la boîte avec leurs quatre pattes et s’est arrêté lorsqu’une ou plusieurs pattes ont été placées à l’extérieur de la boîte) ; la durée du repas (c.-à-d. que le lapin a ingéré de la paille, du foin, des granulés ou des excréments ; le fait de mâcher les vêtements ou les chaussures de l’entraîneur n’a pas été considéré comme de la nourriture) ; la durée de la cachette (cet événement a commencé lorsque le lapin est entré dans une maison ou un tunnel avec ses quatre pattes ; il s’est arrêté lorsque le lapin a quitté l’abri avec une ou plusieurs pattes) ; sauter sur les genoux (c.-à-d. que le lapin a sauté sur les genoux du dresseur et a placé ses quatre pattes dessus ; cet événement s’est produit lorsque l’animal se trouvait dans la zone d’interaction du dresseur) ; placer les pattes avant sur les pattes (c.-à-d. que le lapin a placé les deux pattes avant sur les pattes de l’entraîneur ; cet événement s’est produit lorsque l’animal se trouvait dans la zone d’interaction de l’entraîneur).

L’analyse comportementale a été réalisée par le formateur et une personne totalement insu à la procédure effectuée. Selon Landis et Koch54, la fiabilité inter-juges entre le formateur et la personne aveugle calculée à l’aide de BORIS53 (Cohens Kappa) était substantielle à presque parfaite. Pour une analyse plus approfondie, les données extraites par l’observateur en aveugle ont été utilisées.

Le test de Wilcoxon a révélé que la technique de manipulation conventionnelle réduisait considérablement le temps passé à interagir avec le « dispositif de manutention », c’est-à-dire la somme du temps passé à interagir avec le formateur et la boîte après avoir été ramassé (z = 2,366, p = 0,018, r = 0,89 ; Figure 5A). La technique de manipulation n’a pas affecté de manière significative la durée de l’interaction avec le formateur (z = 1,014, p = 0,310, r = 0,28 ; Figure 5B). En revanche, le fait de ramasser les lapins près de la boîte augmentait la durée de leur interaction avec la boîte (z = 2,366, p = 0,018, r = 0,66 ; Graphique 5C) et dépensés dans la boîte (z = 2,201, p = 0,028, r = 0,61 ; Graphique 5D) par rapport à la technique de manutention conventionnelle. De plus, les animaux ont passé plus de temps à se cacher dans les refuges après avoir été récupérés par la technique de manipulation conventionnelle (z = -1,992, p = 0,046, r = 0,046 ; Figure 5F).

La technique de manipulation n’a pas eu d’effet significatif sur la durée de la consommation des animaux (z = 0,944, p = 0,345, r = 0,26 ; Figure 5E), le nombre de lapins qui ont posé leurs pattes avant sur les pattes du dresseur (McNemar : p = 1,000) ou sauté sur les genoux du dresseur (McNemar : p = 0,500). Indépendamment de la technique de manipulation, le lapin #9 a sauté sur les genoux de l’entraîneur et le lapin #12 a placé ses pattes avant sur les pattes de l’entraîneur. De plus, les lapins #8 et #11 mettent leurs pattes avant sur leurs pattes après avoir été ramassés par la boîte de transport.

Alors que la récompense alimentaire offerte sur la table d’examen a été ingérée par tous les lapins après le bref transport dans la boîte, un seul lapin (#8) l’a acceptée après la technique de manipulation conventionnelle. Cette différence était significative (McNemar : p = 0,031). Dans l’enclos, la récompense alimentaire a été acceptée par six lapins (c’est-à-dire tous sauf le #7) après avoir quitté la boîte de transport et quatre lapins (#7, #9, #10 et #12) après avoir été libérés du bras (technique de manipulation conventionnelle ; McNemar : p = 0,625).

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Figure 1 : Emploi du temps. Toutes les séances d’habituation, d’entraînement et de généralisation ainsi que les observations comportementales ont été effectuées le matin avant le repas et le nettoyage. Au cours de la semaine 1 (c’est-à-dire quatre jours après l’arrivée), cinq séances de conditionnement et d’habituation contextuelles (du lundi au vendredi ; section 3 du protocole) ont été effectuées par les gardiens d’animaux et l’auteur correspondant (toutes des femelles), suivies d’une période de formation de 3 semaines au cours des semaines 2 et 4 (du lundi au vendredi ; section 4-9 du protocole). Les sessions de formation ont été dirigées par l’auteur correspondant, qui est un vétérinaire spécialisé dans la science des animaux de laboratoire et expérimenté dans le dressage des lapins, des souris, des poulets et des chevaux. Après cela, des observations comportementales ont été effectuées pendant deux jours consécutifs pour déterminer si la technique utilisée pour soulever les lapins du sol affectait leur comportement. Au cours de la semaine 5, cinq séances de généralisation (du lundi au vendredi) ont été menées pour évaluer si les lapins accompliraient les comportements objectifs appris avec une autre personne que le dresseur. Au cours des semaines 6 et 7 (le jeudi) ainsi qu’au cours de la semaine 14 (lundi/mardi), l’entraîneur a testé dans le cadre de l’inspection générale hebdomadaire si les lapins pouvaient retenir et montrer les comportements visés. Un test d’approche volontaire avec le dresseur et une personne inconnue a été effectué au cours de la semaine 7 pour étudier les réponses comportementales des lapins envers les humains familiers par rapport aux humains inconnus. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

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Figure 2 : Arène d’entraînement. L’arène d’entraînement (voir tableau des matériaux) a été installée quelques minutes avant le début de l’entraînement. (A) Pour faciliter le transport et l’installation, l’arène était composée de deux pièces, qui étaient reliées l’une à l’autre dans l’enclos. (B) Deux rangées de panneaux de plastique transparent ont créé un manège d’environ 136 cm × 90 cm × 70 cm. La porte était fixée aux autres panneaux à l’aide de colliers de serrage permettant de l’ouvrir et de la fermer. La porte peut être verrouillée à l’aide d’un clip. Comme les murs de l’arène d’entraînement étaient transparents, un lapin avait un contact visuel, olfactif et acoustique avec les membres du groupe lorsqu’il entrait dans l’arène d’entraînement. Un tabouret/marchepied bas comme siège pour l’entraîneur et, en fonction du comportement d’objectif à entraîner, une balance ou une boîte de transport peuvent être placés dans l’arène. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

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Figure 3 : Bol de récompense avec clicker intégré. Le bol de récompense a été imprimé en 3D à l’aide d’acide polylactique blanc (PLA). Taille du bol carré : 8 cm × 8 cm × 3 cm ; Taille de la poignée cylindrique : 9,5 cm × 2,3 cm. Un clicker à doigt (voir tableau des matériaux) était fixé à la poignée. Un fichier d’impression 3D pour le bol de récompense se trouve dans le fichier de codage supplémentaire 1. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

figure-results-4
Figure 4 : Test d’approche volontaire. (A) Dans les deux essais de 5 minutes, le formateur familier et une personne féminine inconnue étaient assis l’un en face de l’autre dans l’enclos, le dos faisant face à la paroi de l’enclos. Une maison et un tunnel ont été placés près des deux autres murs à la même distance des deux personnes. (B) La durée de l’interaction avec une personne a été analysée pour chaque lapin. Un lapin interagissait avec une personne lorsque les quatre pattes étaient dans le carré de 70 cm × 70 cm autour d’une personne ou sur la ligne de bordure de ce carré. Les symboles indiquent les données de chaque animal individuel. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

figure-results-5
Figure 5 : Effets des techniques de manipulation sur le comportement des lapins. (A-F) Illustrations de données comportementales recueillies auprès de sept lapins après qu’ils aient été manipulés soit par la boîte de transport, soit par la technique conventionnelle (c’est-à-dire qu’ils ont été retenus par la peau de leur cou et soulevés sur le bras). Étant donné que l’entraîneur et la boîte de transport étaient considérés comme des « dispositifs de manutention », (A) Ce panneau montre la somme des panneaux B et C. Les symboles indiquent les données de chaque animal individuel. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

LapinNombre de séances d’entraînement nécessaires pour entraîner le comportement de l’objectif
Suivre la ciblePeséeEntrée dans la boîte de transportÉlevageSauter sur le tour
#111222
#211415
#321314
#472132 (étape 9.2)
#521313
#621211
#781223 (étape 9.3+)
#821211
#921212
#1022335 (étape 9.3)
#1121224
#1221111
#1323124
Médiane (25e à 75e centile)21212.5
(2–2)(1–1.5)(1.5–3)(1–2)(1–4)*

Tableau 1 : Nombre de sessions nécessaires pour entraîner les comportements de l’objectif. Si un lapin n’a pas appris la dernière étape d’un comportement d’objectif, la dernière étape d’entraînement atteinte est indiquée entre parenthèses.

Définition d’une séance d’entraînement : environ 30 minutes par groupe (6-7 animaux) ; Du lundi au vendredi pendant trois semaines ; commence lorsque le formateur est assis dans l’enclos et qu’il est prêt à commencer la formation ; se termine lorsqu’aucun des lapins ne participe plus à l’entraînement ou que tous les lapins ont atteint une étape finale d’un comportement d’objectif ; Un animal peut effectuer plus d’un essai par session.

* Les lapins #4, #7, #10 ont été exclus de ce calcul car ils n’ont pas atteint l’étape finale de « sauter sur les genoux ».

LapinNombre de séances d’entraînement jusqu’à ce que l’étape finale du comportement de l’objectif soit atteinte
Pesée (5 étapes de formation)Saisie de la boîte de transport (6 étapes de formation)Élevage (3 étapes d’entraînement)Saut sur les genoux (9 étapes d’entraînement)
#11311
#21311
#3131F (9.3)
#4FFF3 (9.2)
#52322
#61133
#71133 (9.3+)
#81113
#91113
#101333 (9.3)
#11113F (9.3)
#121133
#131325
Médiane (25e à 75e centile)1223
(1–1)(1–3)(1–3)(1.25–3)
(sauf #4)(sauf #4)(sauf #4)(sauf #3, #4, #7, #10, #11)

Tableau 2 : Généralisation. En cinq séances (du lundi au vendredi), un gardien d’animaux familier aux lapins a demandé aux lapins d’effectuer les dernières étapes (ou la dernière étape atteinte) des comportements d’objectif entraînés. Si l’étape finale d’un comportement d’objectif n’a pas été atteinte, la dernière étape d’entraînement atteinte est indiquée entre parenthèses. F (échec) était indiqué lorsqu’un animal ne présentait pas la dernière étape d’un comportement d’objectif précédemment atteint lors de l’entraînement. Définition d’une séance : du lundi au vendredi sur une semaine ; commence lorsque le gardien et le dresseur d’animaux s’assoient dans l’enclos ; se termine lorsqu’aucun des lapins ne participe (plus) ou que tous les lapins ont montré l’étape finale (ou la dernière étape atteinte) d’un comportement d’objectif souhaité ; Un animal peut effectuer plus d’un essai par session.

Fichier de codage supplémentaire 1 : Fichier d’impression 3D « bol de récompense ». L’acide polylactique (PLA) peut être utilisé pour l’impression. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.

Dossier supplémentaire 1 : Fiche de documentation pour six lapins. La feuille doit être imprimée ou ouverte sur une tablette pour documenter la progression de l’entraînement de chaque lapin. Lors de chaque séance d’entraînement, il faut noter les étapes d’entraînement auxquelles les animaux ont été atteints ou si des adaptations du protocole ont été nécessaires. Tout événement particulier (p. ex., facteurs externes, état de santé altéré) doit également être documenté. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.

Dossier supplémentaire 2 : Protocoles de formation simplifiés. Les tableaux décrivent les étapes des sections 3 à 9 du protocole de manière simplifiée. Pour plus de détails, il convient de lire les étapes du protocole du manuscrit principal. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les protocoles de formation ont été élaborés pour affiner les procédures de routine telles que la manipulation, les inspections sanitaires et la pesée chez les lapins de laboratoire. Leur faisabilité a été évaluée dans cette étude exploratoire à l’aide de treize lapines blanches de Nouvelle-Zélande. Les protocoles de dressage pourraient être appliqués de manière fiable pour réussir à dresser les lapins. La plupart des lapins ont été capables d’apprendre les comportements objectifs définis dans les protocoles d’entraînement en moins de 3 semaines, de s’en souvenir après des pauses d’entraînement d’une semaine et de les généraliser à une autre personne que l’entraîneur. Peu d’adaptations ont dû être apportées au protocole pour répondre aux besoins de chaque animal. La principale conclusion de la présente étude est que la technique de manipulation raffinée pour ramasser les lapins, telle que décrite dans les protocoles de dressage, était moins aversive que la technique de manipulation conventionnelle. Il est intéressant de noter que les lapins dressés ont montré leur comportement exploratoire non seulement envers le dresseur familier, mais aussi envers une personne inconnue dans un test d’approche volontaire.

Signification de la cible

L’objectif a servi de base au protocole d’entraînement actuel. Lors de l’introduction de la cible, les animaux ont appris que leur comportement affectait l’environnement et générait des conséquences. L’introduction de la cible renforce la confiance entre l’homme et l’animal, comme démontré par le lapin #4, il a fallu 7 séances d’entraînement avant de suivre le bâton cible dans l’arène d’entraînement, mais a appris rapidement les comportements d’objectif suivants (c’est-à-dire en 1 à 3 séances d’entraînement). Ce lapin #4 a semblé gagner en confiance dans le dresseur lors de l’introduction de la cible, ce qui a facilité l’entraînement des autres comportements de l’objectif. Cependant, ce lapin manquait toujours de confiance en les autres et n’était pas disposé à montrer la plupart des comportements objectifs lors des séances de généralisation.

Il convient de noter que la cible n’a pas été définie comme point de terminaison dans certaines sections du protocole. Au lieu de cela, par exemple, les animaux devaient suivre la cible pendant un nombre variable de sauts ou rester sur l’échelle pendant un nombre variable de secondes. Un modèle de récompense variable a été choisi pour augmenter et maintenir l’attention et la motivation des lapins dans l’entraînement.

Signalisations

Une fois que les lapins ont exécuté avec succès l’étape 5.1, dans toutes les séances d’entraînement suivantes, l’entraîneur a placé la cible à une distance proche du nez du lapin pour signaler au lapin que l’essai d’entraînement a commencé. Si le lapin touchait la cible avec le nez ou la bouche, la volonté de participer à l’entraînement était prise en compte et l’entraînement commençait.

Les protocoles actuels n’incluaient pas d’autres signaux, par exemple, la balance, la boîte de transport ou la main n’étaient pas considérées comme des signaux. Au lieu de cela, la cible était utilisée pour conduire l’animal dans l’arène d’entraînement, sur la balance, dans la boîte de transport, dans les airs (cabrage) ou sur les genoux de l’entraîneur. Cela signifie que les comportements d’objectif « peser », « entrer dans la boîte de transport », « se cabrer » et « sauter sur les genoux » étaient des modifications de « suivre la cible ». La raison en était les exigences du protocole de dressage : il devrait pouvoir être effectué par le personnel des animaleries, qui ne sont peut-être pas des experts en dressage d’animaux, et s’intégrer facilement dans la routine de travail quotidienne. Par conséquent, les protocoles doivent être efficaces et atteindre rapidement les comportements de l’objectif.

Cependant, la main qui est placée devant le lapin (étape 8.3), la balance ou la boîte de transport ont également le potentiel de devenir à la fois un signal et une cible pour les pattes. Par conséquent, il peut être possible de définir d’autres étapes qui vont au-delà des protocoles actuels et ne nécessitent pas l’utilisation du bâtonnet cible. Par exemple, dès que le lapin voit l’écaille, celle-ci signale aux lapins de sauter dessus avec leurs quatre pattes.

Adaptations des protocoles

Bien que l’on puisse s’attendre à ce que le phénotype d’animaux de laboratoire presque génétiquement identiques soit très similaire, il existe des « différences comportementales entre les individus qui sont constantes dans le temps et à travers les situations [et] sont appelées personnalité »55, par exemple, certains animaux sont plutôt timides et d’autres audacieux56. Il peut falloir plus de temps aux animaux timides et moins explorateurs pour apprendre les comportements objectifs définis du protocole (par exemple, lapin #4). Même si les protocoles de dressage standard peuvent convenir à la majorité, le dressage doit tenir compte des besoins de chaque animal et s’y adapter, si nécessaire26. Ainsi, des étapes intermédiaires plus petites supplémentaires devraient être définies pour les lapins qui n’apprennent pas une étape de dressage du protocole. Les étapes supplémentaires de la formation intermédiaire devraient les aider à passer avec succès à l’étape suivante. En particulier parce que les plans d’entraînement sont élaborés en théorie puis testés dans la pratique, il peut devenir évident que des étapes d’entraînement supplémentaires sont nécessaires pour entraîner un comportement d’objectif particulier.

En ce qui concerne les protocoles d’entraînement actuels, certaines étapes d’entraînement intermédiaires ont dû être ajoutées pour les comportements objectifs « suivre la cible », « entrer dans la boîte de transport », « se cabrer » et « sauter sur les genoux », comme décrit en détail dans la section sur les résultats représentatifs, car les animaux individuels n’ont pas réussi à poursuivre l’étape d’entraînement suivante. Il est intéressant de noter que les étapes intermédiaires 8.2+ et 9.3+ étaient requises par la plupart des lapins, ce qui souligne leur importance. Par conséquent, ces étapes ont été ajoutées en tant que note aux protocoles de formation.

Alternativement, à l’étape définie 8.2+, l’entraîneur pourrait placer une main sur le sol avec la paume vers le haut et laisser le lapin marcher sur la main avec une et éventuellement les deux pattes avant. De plus, il est concevable qu’un lapin ait besoin d’étapes intermédiaires supplémentaires avant l’étape 9.3+, par exemple, le lapin place d’abord une patte arrière et ensuite les deux pattes arrière sur les genoux de l’entraîneur. Si un lapin n’accepte pas d’être touché aux étapes 9.5-9.9, la durée de contact avec les différentes parties du corps pourrait être progressivement augmentée. De plus, au début, seuls l’index et le majeur pouvaient être utilisés pour caresser les animaux avec une pression légère comme une plume. Ensuite, le nombre de doigts utilisés pour le toucher et la pression peuvent être augmentés en plusieurs étapes.

Perfectionnement des techniques de manutention

On peut supposer que la manipulation est très aversive, en particulier chez les lapins ayant un trait de personnalité timide. Les lapins sont des proies terrestres et le fait d’être soulevé (c’est-à-dire ramassé du sol) ou immobilisé (c’est-à-dire tenu dans les bras d’un humain) pour une inspection sanitaire et une procédure expérimentale est susceptible de causer de l’anxiété et de la détresse. Une option pour affiner les méthodes de manipulation a été introduite dans les protocoles de dressage : au lieu de retenir le lapin par la peau du cou et de le soulever sur l’autre bras, le lapin peut être conduit avec le bâton cible dans la boîte et porté dans la boîte jusqu’à la table d’examen, comme suggéré précédemment50, 57, où le lapin est doucement transféré de la boîte à la table. Alternativement, le haut de la boîte peut être retiré, ou le lapin peut être guidé avec le bâton cible hors de la boîte.

Les observations comportementales effectuées après que les lapins aient été ramassés à l’aide de la technique de manipulation conventionnelle ou de la boîte de transport ont révélé que la technique de manipulation conventionnelle était associée à plus de comportement lié au stress et à l’anxiété que la technique alternative. Cette conclusion a été tirée du nombre élevé d’animaux refusant la récompense alimentaire sur la table d’examen et de l’augmentation du temps passé à se cacher dans les refuges lorsque la technique de manipulation conventionnelle a été appliquée. Il est intéressant de noter que la technique de manipulation n’a pas affecté le temps d’interaction avec le formateur, ce qui indique que le processus de manipulation n’a peut-être pas altéré la relation homme-animal. Cependant, outre le formateur, la boîte de transport servait également de « dispositif de manutention » (c’est-à-dire que le dispositif de manutention de la technique conventionnelle était le formateur, les dispositifs de manutention de la technique alternative étaient à la fois le formateur et la boîte de transport). Par conséquent, le temps d’interaction avec la boîte de transport a également été analysé. Bien que les lapins viennent d’être ramassés avec la boîte de transport, ils ont passé plus de temps à interagir avec la boîte ou dans la boîte qu’à être ramassés par la technique conventionnelle. Cela suggère que la boîte de transport pourrait être associée à un effet positif. En comparant le temps passé à interagir avec les deux « dispositifs de manipulation » (c’est-à-dire la somme du temps passé à interagir avec la boîte et le dresseur), la technique de manipulation des boîtes a augmenté la durée de l’interaction avec les « dispositifs de manipulation », c’est-à-dire que cette technique a eu un effet positif clair sur la réponse comportementale des lapins envers les « dispositifs de manipulation » en prévision d’être manipulés. Des résultats similaires ont été obtenus chez des souris de laboratoire, démontrant que les techniques de manipulation douces et l’entraînement réduisaient le stress et l’anxiété : les animaux qui ont été ramassés à l’aide d’un tunnel ou des mains en coupe ont passé plus de temps à interagir volontairement avec le « dispositif de manipulation » et ont montré moins de comportement lié à l’anxiété que les souris à poignée de queue12. L’entraînement semblait renforcer cet effet. Leidinger et al. ont démontré que les souris à poignée douce (tunnel/tasse) présentaient moins d’urine, de défécation et de vocalisation lorsqu’elles étaient retenues par la peau de leur cou et moins de comportement flottant dans le test du labyrinthe d’eau de Morris lorsqu’elles étaient entraînées à l’aide de PRT par rapport aux souris non entraînées13.

Faisabilité des protocoles pour le travail quotidien - durée de la formation, rétention et généralisation

Le nombre de séances d’entraînement nécessaires pour apprendre un comportement objectif dépendait de l’animal individuel et des comportements cibles, qui comprenaient un nombre différent d’étapes allant de la section 3 à la section 9 du protocole présenté ci-dessus.

En fonction du nombre d’animaux qui ont réussi à apprendre un comportement objectif et du nombre d’adaptations qui ont dû être apportées aux protocoles pour chaque animal, les étapes de dressage avaient différents niveaux de difficulté. Le comportement « suivre la cible » a été la première expérience d’entraînement des lapins et, par conséquent, il a fallu plus de temps à certains animaux pour s’entraîner sur ce comportement que sur l’autre comportement objectif, comme discuté ci-dessus. Bien que tous les animaux puissent être entraînés à la « pesée » selon le protocole actuel, des étapes intermédiaires supplémentaires ont été nécessaires pour « entrer dans la boîte de transport » par deux animaux et pour « élever » ainsi que pour « sauter sur les genoux » par presque tous les lapins. Cela peut s’expliquer par le degré de contact physique entre l’animal et le dresseur qui était nécessaire pour exécuter les différents comportements cibles. La « pesée » et l'« entrée dans la caisse de transport » n’impliquaient aucun contact physique entre l’animal et l’homme. L’étape finale de l’élevage (8.3) et les étapes 9.2-9.4 du saut sur les genoux exigeaient que les lapins établissent un contact physique avec l’entraîneur. De plus, le dresseur a touché l’épaule, le dos, la croupe, les oreilles ou les pattes du lapin au cours des étapes 9.5 à 9.9 du « saut sur les genoux », augmentant ainsi le degré de contact physique entre l’animal et le dresseur. Accepter d’être touché était plus difficile pour certains lapins que pour d’autres. Comme nous l’avons vu ci-dessus, il a été bénéfique d’adapter les protocoles d’entraînement de ces comportements d’objectif et d’ajouter des étapes intermédiaires.

Cependant, trois lapins ont eu besoin de séances d’entraînement supplémentaires pour atteindre l’objectif de comportement « sauter sur les genoux » (#4, #7, #10). Les déficiences physiques qui empêchaient ces animaux de sauter sur les genoux de l’entraîneur pourraient être exclues. De plus, les lapins ont pu sauter sur leurs maisons, les hauteurs de celles-ci étaient plus élevées que les genoux de l’entraîneur.

Il a été remarqué que deux de ces trois lapins (#4 et #10) avaient besoin de plus de temps pour s’habituer à l’entraîneur ainsi qu’à la récompense alimentaire lors des séances d’accoutumance et avaient partiellement besoin de plus de séances d’entraînement pour atteindre l’étape finale des autres comportements cibles. C’était également vrai pour le lapin #7, qui avait une blessure à la queue due à des bagarres au sein du groupe depuis la quatrième séance d’habituation. Par conséquent, le lapin #7 a été ramassé, transféré à la table d’examen, traité et inspecté quotidiennement pendant 15 jours, ce qui a peut-être entraîné une prudence accrue envers les humains. D’une part, il est crucial de noter que les performances d’entraînement peuvent être affectées, par exemple, par un état de santé altéré, une augmentation des niveaux de stress ou une relation homme-animal perturbée en raison d’autres interventions. D’autre part, ces observations ont démontré l’importance de l’accoutumance à l’entraîneur et à la récompense alimentaire. Certains animaux peuvent avoir besoin de plus de temps pour se familiariser avec la présence du dresseur et accepter la récompense alimentaire de celui-ci. Si des séances d’habituation supplémentaires avaient été effectuées, les lapins #4 et #10 auraient peut-être obtenu de meilleurs résultats lors des séances d’entraînement. La pertinence de l’habituation des lapins aux humains a déjà été rapportée dans la littérature. L’éleveur commercial, auprès duquel les lapins utilisés dans cette étude ont été achetés, a récemment introduit des séances de caresses régulières, ce qui a réduit le comportement lié au stress et éliminé les agressions58. Dans une étude antérieure, il a été démontré que les caresses et la manipulation de jeunes lapins diminuaient le comportement lié à l’anxiété, augmentaient leur prise de poids et réduisaient le taux de mortalité59.

Une fois que les lapins avaient appris les différents comportements d’objectif, ils étaient encore capables de les afficher après deux courtes pauses d’entraînement (une semaine) et une longue (environ 7,5 à 9,5 semaines), sauf exceptions individuelles. Ces observations peuvent indiquer qu’il suffit de demander aux lapins d’effectuer les comportements d’entraînement une fois par semaine lors de l’examen général et du nettoyage de la pièce ou de l’enclos.

Pour la faisabilité du protocole pour la vie professionnelle quotidienne, il est également crucial que les lapins généralisent les comportements d’objectif entraînés à d’autres personnes que le formateur. En cas de vacances ou de maladie, une autre personne doit continuer la formation et les soins aux animaux. La majorité des lapins (douze sur treize) ont généralisé les comportements objectifs « peser », « entrer dans la boîte de transport » et « élever » au gardien de l’animal, bien que, dans certains cas, il ait fallu plus d’une séance d’entraînement aux lapins pour montrer le comportement souhaité. Le terme « pesée » semblait être le mieux généralisé ; suivi de « Entrée dans la boîte de transport » et « Élevage ». Cependant, « sauter sur les genoux » semblait plus difficile à généraliser à une autre personne. Il a fallu plus de temps aux animaux pour démontrer le comportement souhaité (9.9.) et deux lapins, qui avaient précédemment appris l’étape finale 9.9, n’ont pas réussi à montrer ce comportement objectif, peut-être en raison du contact physique plus élevé nécessaire (voir ci-dessus). Un lapin (#4) n’a montré aucune étape des comportements objectifs « pesée », « entrée dans la boîte de transport » et « élevage » et n’était pas intéressé à interagir avec le gardien de l’animal. Le lapin #4 était l’un des animaux qui avait besoin de plus de temps pour s’habituer à l’entraîneur et à la récompense alimentaire lors des séances d’habituation. Cela peut indiquer que, pour certaines personnes, des séances supplémentaires au cours desquelles les gardiens d’animaux passent du temps avec les lapins, les habituent à accepter la récompense alimentaire de leur part et construisent un lien positif sont bénéfiques23. Les lapins peuvent être capables de distinguer différentes personnes, comme cela a été démontré pour les rats60. D’autres facteurs susceptibles d’affecter les performances des lapins lors des séances avec le dresseur et le gardien des animaux peuvent être des signaux inconscients que le dresseur a donnés aux animaux pendant les séances de dressage, par exemple, la position du bâton cible ou du bol de récompense, la position ou le mouvement du corps. Si le formateur n’est pas au courant de ces signaux, ils ne seront pas documentés et les autres personnes ne les imiteront pas.

De plus, les compétences de dressage des personnes travaillant avec les animaux, y compris la routine de manipulation du bâton cible et la présentation des récompenses, peuvent influencer le comportement des animaux. Outre la connaissance des principes d’apprentissage et de la communication animale, des expériences pratiques sont nécessaires pour réussir à dresser un animal61 et retrouver un comportement objectif. Étant donné que les sessions de généralisation impliquant une personne versée dans l’art et une personne non qualifiée n’ont pas été comparées, la pertinence du facteur « compétences de formation » ne peut être déterminée. Cependant, à la connaissance des auteurs, une grande partie du personnel des animaux de laboratoire n’est pas formée au dressage des animaux et, par conséquent, les conditions dans lesquelles les séances de généralisation ont été effectuées (c’est-à-dire impliquant un gardien d’animaux ayant peu d’expérience préalable dans le dressage au clicker) représentaient un cadre réaliste dans les installations pour animaux de laboratoire.

Les données représentatives des protocoles donnent aux animaleries une idée de la charge de travail associée à l’entraînement des différents comportements cibles. Les données peuvent aider les animaleries à créer leurs propres horaires de travail lors de la mise en œuvre du protocole (ou de parties de celui-ci). En fonction des comportements individuels de l’animal et de l’objectif, un peu de temps supplémentaire doit être réservé au processus de généralisation. Cependant, la durée peut varier lorsque vous travaillez avec des lapins mâles ou une autre race de lapin. Dans les animaleries, il faut discuter de la question de savoir s’il y a suffisamment de temps et de ce qui doit être changé pour permettre le dressage des animaux.

Outre le temps nécessaire à l’entraînement des animaux, il faut tenir compte du fait que la formation nécessite des formateurs qualifiés et que l’enseignement au personnel de l’éducation des animaux peut également prendre beaucoup de temps. Si la formation était une partie obligatoire de la formation du personnel des animaux de laboratoire, c’est-à-dire des gardiens d’animaux, des vétérinaires et des chercheurs, la mise en œuvre de la formation des animaux dans les installations serait facilitée et prendrait moins de temps. Selon l’annexe III de la directive 2010/63/UE, « les établissements doivent mettre en place des programmes d’habituation et de dressage adaptés aux animaux, aux modalités et à la durée du projet », c’est-à-dire que la formation des animaux est exigée par la loi. En Allemagne, de tels programmes doivent être soumis lors de la demande de licence d’expérimentation animale. Pour ce faire, les personnes qui planifient des expériences sur des animaux et qui travaillent avec des animaux de laboratoire doivent être qualifiées dans l’éducation animale. Cependant, au moins en Allemagne, le dressage des animaux ne fait pas partie du programme de formation des soigneurs d’animaux dans le domaine de la recherche et de la clinique 62,63,64. De plus, il n’est pas explicitement mentionné dans les recommandations-cadres de l’UE pour l’éducation et la formation65. Par conséquent, tant qu’une formation n’a pas été mise en œuvre dans ces règlements, le développement professionnel continu axé sur la formation par renforcement positif nécessite plus d’attention. Le personnel des animaux de laboratoire doit apprendre les principes des techniques d’apprentissage et de dressage, les critères nécessaires, le transfert des procédures entre les formateurs, la tenue de registres et la façon d’intervenir auprès des animaux qui ne participent pas de la manière souhaitée afin d’assurer l’uniformité et la prévisibilité.

Interaction homme-animal

Le temps d’interaction intense entre l’homme et l’animal pendant les séances d’entraînement offre un cadre optimal pour renforcer la relation entre les lapins individuels et le dresseur26,66. Une relation positive entre l’homme et l’animal est bénéfique pour le bien-être des animaux, car elle peut réduire leur niveau de stress dans les milieux d’élevage et d’expérimentation67. Dans les protocoles de dressage actuels, le dresseur tient compte de l’agentivité des lapins et ils peuvent décider de participer (ou de ne pas participer) à la formation sur une base volontaire. Fournir aux animaux une capacité d’action est bénéfique pour leur bien-être 16 et doit donc être poursuivi dans les expériences ainsi que dans le logement et l’élevage. Il existe différents niveaux d’agence comportementale68 ; la participation à l’EPR peut être attribuée au niveau d’action motivée, c’est-à-dire « se comporter activement pour atteindre les résultats actuels [p. ex., se procurer de la nourriture] »68.

En analysant l’approche volontaire des lapins envers le dresseur et une personne inconnue, une interaction intensive homme-animal a pu être observée. Les résultats ont révélé que tous les lapins, à l’exception d’un animal dans le 1eressai ( #12), ont interagi à la fois avec le dresseur et la personne inconnue. Ils semblaient reconnaître l’entraîneur puisqu’ils montraient une nette préférence pour interagir avec l’entraîneur lors du1er essai et certains d’entre eux ont sauté avec les quatre pattes sur les genoux de l’entraîneur ; un comportement qui n’a pas été affiché envers la personne inconnue. Bien que les lapins aient passé plus de temps à interagir avec l’entraîneur que la personne inconnue lors du1er essai, le temps d’interaction n’a plus varié lors du 2eessai. Une raison de cette observation peut être que les lapins s’attendaient à recevoir une récompense alimentaire de la part du dresseur lors du1er essai et, en raison du manque de récompenses alimentaires dans le test d’approche volontaire, ils n’ont plus passé plus de temps avec le dresseur lors du 2eessai. Ces données ont néanmoins souligné que les lapins dressés se sont rapidement habitués à la présence d’une personne inconnue et qu’aucun d’entre eux n’était trop timide pour interagir. En revanche, ils étaient très explorateurs et s’intéressaient à la personne inconnue. Cependant, comme un groupe témoin non entraîné n’a pas été étudié, l’effet de l’entraînement sur le comportement d’approche volontaire des lapins n’est pas clair.

Une hypothèse expliquant le comportement du lapin #12 dans le1er essai est que cet individu devait encore s’habituer à la présence de la personne inconnue dans le1er essai et était plus intéressé à interagir avec le dresseur (70 secondes) et la personne inconnue (9 secondes) dans le 2eessai. Les lapins ont des traits de personnalité différents qui peuvent affecter le niveau de confort autour de personnes inconnues et, à son tour, la latence d’approche ou la durée de l’interaction avec une personne69,70.

Limitations

Nous sommes conscients que tous les lapins dans l’enclos/la salle, et pas seulement celui qui participe à l’entraînement, peuvent entendre le clic (c’est-à-dire le renforçateur conditionné) pendant une séance d’entraînement et que son effet de renforcement peut être affaibli puisque la récompense alimentaire (c’est-à-dire un renforçateur naturel/non conditionné) n’est pas présentée. Si un lapin à l’extérieur de l’arène d’entraînement montre un comportement dressé et entend le clic, mais qu’aucune nourriture n’est présentée (et ce scénario se produit plusieurs fois), le comportement entraîné peut être éteint. Ce phénomène est appelé extinction64,71. Cependant, étant donné que tous les comportements d’objectif des protocoles actuels dépendent de la cible présentée par l’entraîneur, il est peu probable que l’extinction se produise dans notre cadre d’entraînement.

Étant donné que les murs de l’arène d’entraînement étaient transparents et que l’arène d’entraînement était située dans l’enclos, les lapins pouvaient se voir, s’entendre et se sentir pendant l’entraînement, ce qui est un avantage évident lié au bien-être. De plus, les lapins ont peut-être observé les membres de leur groupe pendant les séances d’entraînement et ont appris les uns des autres. Chez les rats, il a été précédemment démontré que les individus apprenaient à adopter un comportement d’objectif en observant leur compagnon de cage être entraîné par PRT45. Ce fait peut être considéré à la fois comme un avantage et un inconvénient. Les progrès d’apprentissage des animaux peuvent être plus rapides lorsqu’ils peuvent s’observer les uns les autres. Cependant, les données de chaque animal peuvent être influencées par les performances des membres du groupe et ne peuvent pas être attribuées uniquement à l’entraînement de l’animal individuel. Ainsi, l’entraînement d’animaux sans aucun contact avec les membres de leur groupe ou les lapins monologés pourrait prendre plus de temps.

Les observations comportementales des individus (dans le test d’approche volontaire et après l’application des différentes techniques de manipulation) ont été effectuées dans leur environnement social familier et dans leur groupe afin d’éviter le stress et la distraction causés par un nouvel environnement et la séparation de leur groupe, ce qui aurait à son tour affecté les observations comportementales. L’inconvénient est cependant que les lapins peuvent avoir influencé le comportement de l’autre pendant les séances d’observation.

Les effets des techniques de manipulation n’ont été étudiés que chez sept animaux impliquant le formateur en tant que personne manipulant les animaux. Les auteurs prévoient une étude de suivi comprenant un calcul a priori de la taille de l’échantillon afin de reproduire les résultats avec d’autres manipulateurs et d’examiner plus en détail les différences entre les techniques de manipulation.

Tous les humains qui ont participé à la formation, à la manipulation et au test d’approche volontaire étaient des femmes. Il n’a pas été cherché à savoir si les performances d’entraînement des lapins ou leur comportement varieraient si des personnes mâles étaient impliquées.

Les protocoles de dressage actuels devraient donner au lecteur une idée de ce qui peut être dressé chez les lapins, mais ne comprennent pas tous les comportements d’objectif potentiels qui seraient bénéfiques à dresser chez un lapin de laboratoire. Par exemple, le marquage d’un lapin comme suggéré dans la section sur le protocole sur les exigences générales vaudrait également la peine d’être entraîné à l’aide de la PRT.

Comme indiqué plus haut, le choix de la bonne récompense n’est pas anodin. En raison de restrictions d’hygiène, l’utilisation d’herbes fraîches comme récompenses alimentaires n’est pas autorisée dans certaines installations pour animaux de laboratoire et, par conséquent, des récompenses alimentaires moins appropriées telles que des graines de tournesol ou des friandises à base de céréales doivent être utilisées. En ce qui concerne la décision concernant la récompense alimentaire, certaines règles et règlements des pratiques de laboratoire actuelles nuisent au bien-être des animaux et à l’efficacité de la formation et, par conséquent, peuvent devoir être réexaminés au cas par cas. Il peut également être possible d’utiliser des alternatives aux récompenses alimentaires, par exemple, des contacts doux ou des interactions avec le formateur ou des articles d’enrichissement. Cependant, le dresseur doit s’assurer pour chaque animal que l’alternative est de récompenser l’animal, car une récompense n’est une récompense que si le lapin la favorise vraiment. En particulier, les contacts peuvent ne pas être reçus comme gratifiants par tous les lapins.

Conclusions

En résumé, la présente étude a été une première étape pour combler le manque de connaissances sur les protocoles de dressage appropriés pour les lapins de laboratoire. Les lapines blanches de Nouvelle-Zélande pourraient être entraînées pour les procédures d’élevage de routine à l’aide de la PRT et généraliser les comportements objectifs appris à d’autres personnes, bien que du temps supplémentaire doive être réservé au processus de généralisation. Les comportements d’objectif sans contact physique semblaient être plus faciles à apprendre que les comportements nécessitant un contact physique avec les humains. Une fois que les animaux ont terminé avec succès l’entraînement d’un comportement objectif, il a suffi de les récupérer une fois par semaine dans le cadre de l’examen général et du nettoyage de l’enclos. Les protocoles de dressage considérés comme généralement appliqués à tous les lapins sont pratiques, mais le dresseur doit être conscient que, dans certains cas, il doit être adapté aux besoins de l’animal. Les résultats sur les techniques de manipulation suggèrent que le fait de soulever les lapins avec la boîte de transport au lieu de les retenir par la peau du cou et de les soulever sur le bras était moins réticent. Dans l’ensemble, les protocoles actuels fournissent des instructions réalisables pour le processus d’accoutumance et d’entraînement des lapins et peuvent servir de perfectionnement dans les installations pour animaux de laboratoire.

Les animaux ne doivent pas souffrir en raison de l’économie de main-d’œuvre, de temps ou d’argent (du moins selon la loi allemande sur le bien-être des animaux72). Il est important de prendre soin de tous les animaux et de les manipuler de la manière la plus douce possible. Étant donné que les animaux non dressés souffrent à un degré plus élevé d’anxiété et de détresse causées par les procédures d’élevage expérimentales et de routine que leurs homologues entraînés13, le dressage est une simple mesure de raffinement pour les empêcher efficacement de ressentir des états affectifs négatifs.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les auteurs ne déclarent aucun conflit d’intérêts lié à cette publication.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Les auteurs remercient les soigneurs d’animaux d’avoir pris soin des lapins et leur travail compatissant et dévoué. Merci à Kai Diederich pour la relecture du manuscrit.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Lit NestThe Andersons, Inc., Maumee, États-UnisLa réussite de la mise en œuvre du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
Finger ClickerASCOhttps://ascoshop.de/products/fingerclicker
G*Powerversion 3.1.9.7
Heu-ProppenSsniff Spezialdiä ; ten GmbH, Soest, AllemagneLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
IBM Corp. Sortie en 2020. Statistiques IBM SPSS pour Windows,  ; Armonk, NY : IBM CorpIBM CorpVersion 27.0.dans le manuscrit, il est fait référence à « Logiciel d’analyse statistique avancée »
Kaninchen Haltung + 25 mg/kg Salinomycine-Natrium-SondermischungSsniff Spezialdiä ; ten GmbH, Soest, AllemagneLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
Bloc LignocelLignocel J. Rettenmaier & Sö ; hne GmbH + Co KG, Rosenberg, AllemagneLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
Lillebro geschä ; lte Sonnenblumenkerne", Martina GmbH, Mü ; nchen, Allemagne) et Rainbow Foraging Bits (Bio-Serv, Flemington, États-Unis)  ;Martina GmbH, Mü ; nchen, AllemagneLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
Microsoft Excel pour Microsoft 365 MSOMicrosoft CorporationVersion 2305dans le manuscrit appelé « feuille de calcul"Lapins
blancs de Nouvelle-Zélande  ;Charles River Laboratories France
Plattformwaage DE 35K5DLKERN & SOHN GmbH, Balingen-Frommern, AllemagneLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
Litière scientifique haut de gamme (fine & floconneuse)SAFE, Augy, FranceLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
Rainbow Foraging BitsBio-Serv, Flemington, États-UnisLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
Snackball fü ; r Kaninchen &ndash ; 7 cmTRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, AllemagneLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
Cible avec clicker intégréTRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, AllemagneLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
Trixi Transportbox Capri Open TopTRIXIE Heimtierbedarf GmbH & Co. KG, Tarp, AllemagneLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.
Weiden-HeuballJR FARM GmbH, Holzheim-Pessenburgheim, AllemagneLa mise en œuvre réussie du protocole ne dépend pas de ce produit particulier. Vous pouvez utiliser des produits comparables d’autres sociétés.

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