सचेत चूहों में सबक्लेवियन नस रक्त नमूनाकरण
Summary
यहाँ हम प्रभावी चूहे प्रतिबंध और subclavian नस पंचर विधियों है कि तेजी से सक्षम का एक संयोजन प्रस्तुत करते हैं, सुरक्षित, और संज्ञाहरण के बिना चूहों में दोहराया रक्त संग्रह.
Abstract
चूहों से बार-बार रक्त के नमूने प्राप्त करने के लिए कई स्थापित तरीके हैं, जिनमें सबसे अधिक नियोजित तरीके संज्ञाहरण के बिना पार्श्व पूंछ नस नमूनाकरण और संज्ञाहरण के साथ जुगुलर नस का नमूना है। हालांकि, इनमें से अधिकांश विधियों में सहायता और संवेदनाहारी उपकरण की आवश्यकता होती है और कभी-कभी रक्त संग्रह या रक्त के नमूनों की खराब गुणवत्ता के मामले में कठिनाइयां पैदा होती हैं। इसके अलावा, रक्त संग्रह के इन तरीकों में महत्वपूर्ण समय और मानव संसाधनों का उपभोग होता है जब बड़ी संख्या में चूहों के लिए बार-बार रक्त के नमूने की आवश्यकता होती है। यह अध्ययन एक एकल कुशल व्यक्ति द्वारा गैर-संवेदनाहारी चूहों में दोहराए जाने वाले रक्त के नमूने के लिए एक तकनीक प्रस्तुत करता है। सबक्लेवियन नस को पंचर करके अत्यधिक संतोषजनक रक्त के नमूने प्राप्त किए जा सकते हैं। विधि रक्त संग्रह के पूरा करने के लिए चूहे संयम से केवल 2 मिनट की एक औसत समय के साथ, 95% की एक प्रभावशाली समग्र सफलता दर का प्रदर्शन किया. इसके अलावा, निर्दिष्ट सीमा के भीतर लगातार रक्त संग्रह करने से चूहों को कोई नुकसान नहीं होता है। यह विधि रक्त संग्रह के लिए प्रचार करने लायक है, विशेष रूप से बड़े पैमाने पर फार्माकोकाइनेटिक अध्ययनों में।
Introduction
चूहे सबसे आम प्रयोगात्मक जानवरों में से एक हैं, और रक्त के नमूने प्राप्त करने के कई तरीके हैं। समापन चरण में एकल रक्त संग्रह से जुड़े प्रयोगों के लिए, हृदय पंचर या उदर महाधमनी रक्त संग्रह1 के माध्यम से पर्याप्त मात्रा में रक्त प्राप्त किया जा सकता है। हालांकि, कुछ अध्ययनों में नियमित रक्त या जैव रासायनिक विश्लेषण के लिए चूहों से बार-बार रक्त संग्रह की आवश्यकता होती है, विशेष रूप से फार्माकोकाइनेटिक्स और विष विज्ञान अध्ययनों में,जहां दवाओं के अवशोषण, वितरण और चयापचय को निर्धारित करने के लिए बार-बार रक्त संग्रह की आवश्यकता होती है।
वर्तमान में, हालांकि पूंछ नस रक्त संग्रह चूहों से रक्त के नमूने के लिए सबसे आम तरीका है, संज्ञाहरण की आवश्यकता नहीं होने के बावजूद, इस विधि दोहराया संग्रह के लिए चुनौतीपूर्ण हो सकता है, और एकत्र रक्त की मात्रा अपेक्षाकृत छोटे 3,4 है. इसके अतिरिक्त, हालांकि रक्त saphenous और penile नसों से एकत्र किया जा सकता है, प्राप्त रक्त की मात्रा सीमित है, और संज्ञाहरण 1,5 की आवश्यकता है. इसके अलावा, सबमांडिबुलर शिरापरक प्लेक्सस से एकत्र किए गए रक्त के नमूने, साथ ही साथ सब्लिंगुअल, जुगुलर और सबक्लेवियन नसों में उच्च गुणवत्ता वाले नमूने प्रदान करते हैं, लेकिन आमतौर पर संज्ञाहरण या कई व्यक्तियों की सहायता की आवश्यकता होती है 1,6,7,8,9. अंत में, रेट्रो-ऑर्बिटल साइनस/नहर रक्त संग्रह न केवल संज्ञाहरण की आवश्यकता है, लेकिन यह भी संभावित रूप से चूहों 9 के लिए चोट और तनाव पैदा करसकता है.
आमतौर पर प्रमुख नसों से प्राप्त रक्त के नमूनों की गुणवत्ता आम तौर पर उच्चतम मानक1 की होती है। वर्तमान में, कुछ अध्ययनों में पाया गया है कि गले की नस के माध्यम से निरंतर microsampling चूहों में विषैले अनुसंधान के लिए एक बहुत ही उपयुक्त विधि है, हालांकि इस विधि आमतौर पर जुगुलर नस कैथीटेराइजेशन10,11,12की आवश्यकता है. इसलिए, यह पता लगाने योग्य है कि सर्जिकल हस्तक्षेप के बिना पशु अनुसंधान के 3R सिद्धांत के अनुसार उच्च गुणवत्ता वाले रक्त के नमूने कैसे प्राप्त करें। इस अध्ययन का उद्देश्य चूहों में सबक्लेवियन नस से रक्त को कुशलतापूर्वक निकालने के लिए एक विधि प्रस्तुत करना था। यह तकनीक संज्ञाहरण की आवश्यकता के बिना एकल-व्यक्ति प्रक्रिया के माध्यम से संतोषजनक नमूनों के तेजी से संग्रह को सक्षम बनाती है।
Protocol
Representative Results
Discussion
हालांकि पूंछ नस रक्त संग्रह चूहों में दोहराया रक्त नमूना के लिए सबसे आम तरीका है, यह संज्ञाहरण दवाओं से प्रभावित हो सकता है, और पूंछ नस के छोटे आकार के कारण, रक्त की मात्रा है कि एक ही उदाहरण में एकत्र किय?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस अध्ययन को लान्चो विश्वविद्यालय के दूसरे अस्पताल (अनुदान सं। PR0121015) और मूत्र प्रणाली रोग अनुसंधान की गांसु प्रांतीय कुंजी प्रयोगशाला (अनुदान संख्या 0412D2)।
Materials
| 0.75% normal saline | Gansu Fuzheng Pharmaceutical Technology Co., Ltd. | —— | Prepared heparin sodium solution |
| 1 mL Pasteur pipette | Biosharp | BS-XG-01-NS | Blood collection |
| 1 mL syringe (26 G, 0.45 mm x 12 mm) | Shinva Medical Instrument Co.,Ltd. | 0.45*12RWLB | Blood collection |
| 1.5 mL Eppendorf tube | Biosharp | BS-15-M | Blood storage and collection |
| 75% medical alcohol | Shandong Lircon Medical Technology Co., Ltd. | —— | Disinfection of rat blood collection site |
| Centrifuge tube holder | Biosharp | BS-05/15-SM60 | —— |
| Electronic scale | Shanghai PUCHUN Measure Instrument Co., Ltd. | JE1002 | Weigh |
| Heparin sodium injection | Hebei Changshan Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd. | —— | Rinse the syringe and EP tube; dilute with normal saline to 25 U/mL |
| Low temperature centrifuge | HuNan Xiang Yi Centrifuge Instrument Co., Ltd. | H1750R | Separation of serum |
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