Une procédure simple pour l’élevage de Delia antiqua axénique avec des aliments stériles semi-fermentés est décrite. Une seule souche de Wolbachia a été détectée dans chaque stade de D. antiqua axénique par PCR.
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Article de méthode
Une procédure simple pour l’élevage de Delia antiqua axénique avec des aliments stériles semi-fermentés est décrite. Une seule souche de Wolbachia a été détectée dans chaque stade de D. antiqua axénique par PCR.
Les insectes axéniques sont obtenus à partir de systèmes d’élevage artificiels stériles utilisant des milieux stériles. Ces insectes, caractérisés par leur petite taille, leur cycle de croissance court et leurs faibles besoins alimentaires, sont idéaux pour étudier la relation entre les micro-organismes et les hôtes. Le microbiote intestinal influence de manière significative les caractéristiques physiologiques des insectes hôtes, et l’introduction de souches spécifiques dans les insectes axéniques fournit une méthode pour vérifier les fonctions microbiennes intestinales. Delia antiqua, un ravageur menaçant de l’ordre des Diptères, de la famille des Anthomyiidae et du genre Delia, se nourrit principalement d’oignons, d’ail, de poireaux et d’autres légumes de la famille des Liliacées. Ses larves se nourrissent des bulbes, provoquant la pourriture, le flétrissement et même la mort de plantes entières. L’élevage de larves axéniques permet d’effectuer des études de suivi afin d’observer les effets de la microflore intestinale sur la croissance et le développement de D. antiqua. Contrairement à la méthode d’élimination des microbes associés par des antibiotiques, cet article présente une approche peu coûteuse et très efficace pour élever D. antiqua axénique. Après la stérilisation superficielle des œufs de D. antiqua , des aliments stériles semi-fermentés ont été utilisés pour élever les larves, et l’état axénique de D. antiqua a été vérifié par des essais dépendants et indépendants de la culture. En conclusion, la combinaison de la stérilisation des œufs d’insectes et de la préparation d’aliments stériles pour la culture larvaire a permis le développement d’une méthode efficace et simple d’obtention de D. antiqua axénique. Cette méthode fournit une approche puissante pour étudier les interactions entre les insectes et la microflore.
Les animaux axéniques, définis comme des animaux chez lesquels aucun micro-organisme ou parasite viable ne peut être détecté, sont des modèles expérimentaux précieux pour étudier les interactions hôte-micro-organisme 1,2. Les insectes, le plus grand groupe d’invertébrés, peuvent former des relations symbiotiques avec des micro-organismes3. Les insectes axéniques peuvent être utilisés pour étudier les interactions hôte-symbiote dans les systèmes symbiotiques4. Par exemple, Nishide et al.5 ont mis au point une procédure pratique d’élevage st....
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D. antiqua sont obtenus dans le champ de Fanzhen, Taian.
1. Préparation d’aliments stériles
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Les stades de développement du D. antiqua sont illustrés à la figure 4. Le cycle de vie complet comprend les œufs, les larves, les pupes (figure 4C) et les adultes (figure 4D). Ils sont cultivés dans des tubes à centrifuger stériles, et leur apparence et leur taux de survie sont impossibles à distinguer de ceux de D. antiqua élevés dans des conditions non axéniques. Les temps de croissance et de développement de ch.......
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Les insectes possèdent un microbiote intestinal très complexe20,21, ce qui nécessite l’utilisation d’insectes axéniques inoculés avec des souches microbiennes intestinales spécifiques pour étudier les interactions insectes-microorganismes. La préparation d’insectes axéniques est cruciale pour de tels efforts de recherche. Le traitement antibiotique est une méthode utilisée pour éliminer le microbiote intestinal. Par exemple, Jung et Kim,22.......
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Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.
Ces travaux ont été soutenus par la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (32272530), le projet New Twenty Policies for University in Jinan (2021GXRC040), les grands projets d’innovation scientifique et technologique dans la province du Shandong (2021TZXD002) et le projet d’intégration de la science et de l’éducation de l’Université de technologie de Qilu (2022PYI009, 2022PY016, 2022PT105).
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| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| 0,22 &mu ; Flacon filtrant M | Thermo Scientific | 450-0045 | |
| 0.22 &mu ; M Seringue Filtre | Biosharp | BS-QT-011 | |
| Tamis 100 mailles | Zhejiang Shangyu Jinding Standard Sieve Factory | Non Numéros | |
| 1x solution PBS | Solarbio | P1020 | |
| 2x Taq PCR Master Mix | GENVIEW | GR1113-1ML | |
| 5.2 % NaClO solution | Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. | ||
| Fiole conique de 500 mL | Thermo Scientific | 4103-0500 | |
| Tube à centrifuger ventilé de 50 mL | JET BIOFIL | BRT-011-050 | |
| 50x tampon TAE | GENVIEW | GT1307 | |
| Poudre de gélose | Ding Guo | DH010-1.1 | |
| Incubateur biochimique | STIK | 21040121500010 | |
| Tamis à cellules | SAINING | 5022200 | |
| Chlorure de choline | Sangon Biotech | A600299-0100 | |
| ddH2O | Ding Guo | PER018-2 | |
| Pilon de broyage jetable | JET BIOFIL | CSP-003-002 | |
| Kit d’extraction d’ADN | Sangon Biotech | B518221-0050 | |
| Marqueur d’ADN | Sangon Biotech | B600335-0250 | |
| Absolu d’éthanol | Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. | ||
| Papier filtre | NEWSTAR | 1087309025 | |
| Robot culinaire | Guangdong Midea Life Electric Appliance Manufacturing Co., Ltd. | ||
| incubateur Illuminated ; | Shanghai ESTABLISH Instrumentation Co., Ltd. | ||
| Acide L-ascorbique | Sangon Biotech | A610021-0100 | |
| Épandeur en L | SAINING | 6040000 | |
| Gélose nutritive | Hope Bio | HB0109 | |
| Ciseaux | Bing Yu | ; BY-103 | Achat sur l’incubateur Jingdong |
| Shock | Shanghai Zhichu Instrument Co., Ltd. | ||
| Sucrose | GENVIEW | CS326-500G | |
| Colorant d’acide nucléique Super Green | Biosharp | BS355A | |
| Table super-propre | Heal Force | AC130052 | |
| TSB | Hope Bio | HB4114 | |
| Pompe à vide | Zhejiang Taizhou Seeking Precision Vacuum Pump Co., Ltd. | ||
| Extrait de levure | Thermo Scientific | LP0021B |
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