Muis Epidermale neurale lijst Stem Cell (EPI-NCSC) culturen
Summary
Hier laten we onze methode om de muis epidermale neurale stamcellen (EPI-NCSC) te isoleren. Techniek houdt in micro-ontleden whisker follikels, het isoleren van de verdikking en placeing het in weefselkweek. EPI-NCSC beginnen om van uitstulping explantaten op de ondergrond emigreren binnen 3 – 4 dagen.
Abstract
EPI-NCSC zijn overblijfselen van de embryonale neurale lijst in een volwassen locatie, de uitstulping van de haarfollikels. Ze zijn multipotente stamcellen die de fysiologische eigenschap een breed scala van gedifferentieerde celtypen, waaronder neuronen, zenuwcellen ondersteunen van cellen, gladde spiercellen, bot / kraakbeen cellen en melanocyten te genereren. EPI-NCSC zijn gemakkelijk toegankelijk in de behaarde huid en kan worden geïsoleerd als een zeer zuivere populatie van stamcellen. Deze video geeft een gedetailleerd protocol voor het bereiden van de muis EPI-NCSC culturen uit whisker follikels. De snorhaar pad van een volwassen muis is verwijderd, en snorhaar follikels ontleed. De follikels worden dan de lengte en vervolgens dwars doorgesneden boven en onder de bobbel regio. De bobbel is verwijderd uit het collageen capsule en in een petrischaal. EPI-NCSC beginnen om te emigreren uit de uitstulping explantaten 3 tot 4 dagen later.
Protocol
Discussion
Op grond van hun vermogen tot migratie, kan EPI-NCSC worden geïsoleerd als een zeer zuivere populatie van stamcellen, die kunnen worden uitgebreid in vitro. Als embryonale resten in een volwassen locatie, EPI-NCSC zijn potentieel aantrekkelijke kandidaten voor toekomstige celvervangingstherapieën, biomedische engineering en / of de regeneratieve geneeskunde. We hebben getest EPI-NCSC in een muismodel van dwarslaesie, waar ze tonen wenselijke eigenschappen. Door middel van gen expressie profilering door LongSAGE (www.ncbi.nlm.nih.gov / geo…
Acknowledgements
Ondersteund door: USPHS subsidie NS38500, Nationaal Instituut voor Neurologische Aandoeningen en Stroke, NIH, USA; Biomedische Technologie Alliantie van Southeastern Wisconsin, Milwauke, WI, USA; Bryon Riesch Paralysis Foundation, Milwaukee, WI, USA, Broederlijke Orde van Eagles, Midwest hoofdstuk , USA; National ruggenmergletsel Association, Milwaukee hoofdstuk, USA, North East England Stem Cell Institute, Newcastle University, UK.
References
- Sieber-Blum, M., Grim, M., YF, H. u., Szeder, V. Pluripotent neural crest stem cells in the adult hair follicle. Dev. Dyn. 231, 258-269 (2004).
- Sieber-Blum, M., Grim, M., Tuan, R., Grim, M. The adult hair follicle – cradle for pluripotent neural crest stem cells. Birth Defects Research (Part C). 72, 162-172 (2004).
- Sieber-Blum, M., Schnell, L., Grim, M., Schneider, R., Schwab, M. E. Characterization of epidermal neural crest stem cell (EPI-NCSC) grafts in the lesioned spinal cord. Pub. 32, 67-81 (2006).
- Hu, Y. F., Zhang, Z. -. J., Sieber-Blum, M. An epidermal neural crest stem cell (EPI-NCSC) molecular signature. Stem Cells. 24, 2692-2702 (2006).
