Summary

עכבר עוריות עצבית קרסט לתאי גזע (EPI-NCSC) תרבויות

Published: May 09, 2008
doi:

Summary

כאן אנחנו מראים השיטה שלנו לבודד אפידרמיס עכבר לתאי גזע עצביים לפסגה (EPI-NCSC). טכניקה מערבת מיקרו לנתח זקיקי השערה, בידוד בליטה ו placeing אותו בתרבית רקמה. EPI-NCSC להתחיל להגר explants בליטה על גבי תשתית בתוך 3-4 ימים.

Abstract

EPI-NCSC הם שרידי רכס עובריים עצביים במיקום מבוגר, את הבליטה של ​​זקיקי השיער. הם בתאי גזע multipotent כי יש את המאפיין הפיזיולוגי ליצור מגוון רחב של סוגי תאים מובחנים, כולל נוירונים, תאים תומכים עצב, לתאי שריר חלק, עצם / סחוס תאים מלנוציטים. EPI-NCSC נגישים בקלות בעור שעיר ניתן לבודד כאוכלוסייה טהור מאוד בתאי גזע. וידאו זה מספק פרוטוקול מפורט להכנת עכבר EPI-NCSC תרבויות מן זקיקי השערה. כרית זיף של עכבר בוגר מוסר, ועל זקיקי השערה גזור. זקיקים הם ואז לחתוך longitudinally ובהמשך רוחבי מעל ומתחת לאזור בליטה. בליטה יוסר הקפסולה קולגן להציב צלחת תרבות. EPI-NCSC להתחיל להגר מן explants בליטה 3 עד 4 ימים מאוחר יותר.

Protocol

Dissection הבליטה של ​​זקיקי השערה למבוגרים עכבר אנו משתמשים 10 שבועות עד 6 חודשים עכברים ישנים. עכברים צעירים לעתים קרובות להניב יותר תאים. עכבר להרדים בעלי חיים לצלול לתוך התערובת כולה 01:01 של בבטאדין (פתרון יוד) ואת מי חמצ…

Discussion

בזכות יכולת הנדידה שלהם, EPI-NCSC ניתן לבודד כאוכלוסייה טהור מאוד בתאי גזע, אשר ניתן להרחיב במבחנה. כמו שרידים עובריים במיקום מבוגר, EPI-NCSC הם מועמדים אטרקטיבית פוטנציאלית לעתיד החלפת טיפולים התא, הנדסה ביו ו / או רפואה רגנרטיבית. בדקנו EPI-NCSC במודל של עכברים של פגיעה בחוט השדרה, שם הם מר…

Acknowledgements

נתמך על ידי: USPHS מענק NS38500, המכון הלאומי להפרעות נוירולוגיות ושבץ, NIH, ארה"ב; הברית ביו טכנולוגיה של מזרח ויסקונסין, Milwauke, וויסקונסין, ארה"ב; Bryon Riesch שיתוק קרן מילווקי, וויסקונסין, ארה"ב; סדר אחווה של הנשרים, פרק התיכון , ארה"ב; הלאומי פגיעה בחוט השדרה האגודה, פרק במילווקי, ארה"ב, צפון מזרח אנגליה לתאי גזע המכון, אוניברסיטת ניוקאסל, אנגליה.

References

  1. Sieber-Blum, M., Grim, M., YF, H. u., Szeder, V. Pluripotent neural crest stem cells in the adult hair follicle. Dev. Dyn. 231, 258-269 (2004).
  2. Sieber-Blum, M., Grim, M., Tuan, R., Grim, M. The adult hair follicle – cradle for pluripotent neural crest stem cells. Birth Defects Research (Part C). 72, 162-172 (2004).
  3. Sieber-Blum, M., Schnell, L., Grim, M., Schneider, R., Schwab, M. E. Characterization of epidermal neural crest stem cell (EPI-NCSC) grafts in the lesioned spinal cord. Pub. 32, 67-81 (2006).
  4. Hu, Y. F., Zhang, Z. -. J., Sieber-Blum, M. An epidermal neural crest stem cell (EPI-NCSC) molecular signature. Stem Cells. 24, 2692-2702 (2006).
check_url/fr/772?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Sieber-Blum, M., Hu, Y. Mouse Epidermal Neural Crest Stem Cell (EPI-NCSC) Cultures. J. Vis. Exp. (15), e772, doi:10.3791/772 (2008).

View Video